紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析

【目的】鲨烯环氧酶(squalene epoxidases,SQE)是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶(MsSQE1)基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA3条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯(MeJA)的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表...     

苜蓿生物活性物质在动物上的应用

苜蓿中含有许多生物活性物质,能够显著影响动物的生长性能、繁殖机能和免疫功能,有些活性物质还可以作为人的保健品使用。本文主要介绍苜蓿皂苷、苜蓿多糖、苜蓿黄酮的生物学功能以及国内外学者对苜蓿中活性成分研究的最新成果。苜蓿中活性物质可以作为动物的饲料添加剂使用,一定剂量的苜蓿活性物质可以提高动物体内的淋巴细胞水平,增加免疫力;提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性,抑制丙二醛的水平,具有抗氧化功能;增加动物的生产性能和繁殖性能。     

海参皂苷的研究现状

海洋中蕴涵着丰富的天然资源,海参作为一种食品和药材,具有很高的保健功能和药用价值。海参皂苷是海参体内的一种次生代谢产物,具有广泛的生理药理活性,因此潜藏了极大的应用价值。本文就近年来国内外关于海参皂苷性质的研究状况做一些简要的概述,为进一步研究海参皂苷提供较为详尽的参考资料。     

计算机软件模拟α-乳白蛋白与皂苷的分子对接

皂苷小分子具有很强的生理活性,在人体中必须与靶细胞生物大分子相互作用才能发挥其生物作用。α-乳白蛋白（α-lactalbumin,α-LA）是球状蛋白质,能结合疏水配体,在食品工业作为功能性配料。采用计算机模拟的方法,对2类皂苷（达玛烷型皂苷和齐墩果型皂苷）和α-LA相互作用进行研究,并获得其相互作用模式的相关图像。分子对接结果表明,2种类型的皂苷与α-LA活性口袋内的氨基酸残基均以疏水相互作用及氢键作用结合,但达玛烷型皂苷结构更复杂,可以提供更多结合位点,且其形成氢键的作用力更强。     

海参加工废液中皂苷的提取及其抗肿瘤作用的研究

为了研究其对肿瘤小鼠的抑瘤作用,以及对免疫器官的影响。从海参废液中提取海参皂苷,通过建立S180皮下肿瘤小鼠模型,采用经口灌胃和腹腔注射2种方式给药后,将小鼠称重,断颈处死,然后剥离的肿瘤组织、胸腺、脾脏,称重并进行统计学分析。结果表明：海参皂苷能显著抑制S180皮下瘤小鼠的肿瘤生长;通过2种给药方式相比较,腹腔注射给药方式抑瘤效果(60.29%,P＜0.01)明显优于经口灌胃给药方式(37.70%;P＜0.05);与阳性对照环磷酰胺相比,海参皂苷对小鼠的生长影响较小,而且提高小鼠的脾脏指数和胸腺指数,对小鼠免疫器官有促进作用。本实验为今后海参皂苷抗肿瘤活性的进一步研究提供了有效依据。     

干柱层析法制备油茶总皂苷对照品初探

目的 研究干柱层析法制备油茶皂苷对照品的方法。方法 原料用60 %乙醇超声提取,浓缩至无醇味,石油醚脱酯后用正丁醇按3:1体积比加入萃取。取正丁醇层并真空浓缩至干,干法上样于100目~200目硅胶柱色谱分离,用乙酸乙酯-甲醇-正丁醇-水(2:1:4:7)的上相展层;根据Rf值取出相应的条带并用甲醇淋洗收集蒸干,薄层及理化性质检测。结果 该方法所制样品由薄层色谱为一点,纯度较高。结论 该方法简便、实用且制备量大,可作为油茶总皂苷对照品。     

Panax notoginseng saponins suppress oxygen-glucose deprivation/reoxygenation-induced pyroptosis of SH-SY5Y cells

AIM To investigate the effect of Panax notoginseng saponins (PNS) on pyroptosis of SH-SY5Y cells induced by oxygen-glucose deprivation/reoxygenation (OGD/R). METHODS The OGD/R was conducted to induce ischemia/reperfusion injury in SH-SY5Y cells. The effects of PNS on the viability (detected by CCK-8 assay) and membrane permeability [indicated by lactate dehydrogenase (LDH) leakage and propidium iodide (PI) staining positive cell proportion] of OGD/R-induced SH-SY5Y cells were observed. The protein levels of gasdermin D (GSDMD), GSDMD N-terminal fragment (GSDMD-N), caspase-1 and caspase-4, and the release of interleukin-1β (IL-1β) and IL-18 in the cells were also determined. RESULTS After exposure to OGD/R, the viability of SH-SY5Y cells dramatically decreased (P<0.01), while the LDH leakage, the PI staining positive cell proportion, the protein levels of GSDMD, GSDMD-N, caspase-1 and caspase-4, and the release of IL-1β and IL-18 were significantly increased (P<0.01). However, PNS treatment enhanced the viability of SH-SY5Y cells inhibited by OGD/R (P<0.01), but reduced the leakage of LDH and the percentage of PI staining positive cells (P<0.05 or P<0.01). Moreover, PNS reversed the increases in the protein levels of GSDMD, GSDMD-N, caspase-1 and caspase-4 and the release of IL-1β and IL-18 in OGD/R-induced SH-SY5Y cells (P<0.05 or P<0.01). CONCLUSION Treatment with PNS alleviates OGD/R-induced injury in SH-SY5Y cells. Its mechanism may be related to inhibition of SH-SY5Y cell pyroptosis induced by OGD/R.     

三七及竹节参中皂甙的不同提取方法

采用冷浸、回流、微波等方法提取三七及竹节参皂甙,按光密度值分别计算出三七及竹节参皂甙的含量。结果显示,微波提取法与冷浸、回流法相比提取率稍高,并且微波提取法操作简单、安全、省时。因此,微波提取法将使三七和竹节参资源得到更好的开发和利用。     

水溶性盾叶薯蓣皂苷及其药理活性研究进展

盾叶薯蓣甾体皂苷包含水溶性皂苷和脂溶性皂苷2大类,其中水溶性盾叶薯蓣皂苷是传统中医药临床药理的重要活性基础,但没有进行系统性地研究。该文对近年来水溶性盾叶薯蓣皂苷的化学成分、分离纯化及药理活性等方面的研究进行综述,为甾体皂苷类新药研发及皂素工业生产中对水溶性盾叶薯蓣皂苷回收利用提供理论参考。     

双水相体系萃取油楠种子总皂苷的研究

利用双水相萃取技术提取分离油楠种子中的总皂苷,以乙醇/硫酸铵为双水相萃取体系,研究乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、p H值、温度等因素对萃取效果的影响。结果表明:在乙醇质量分数为30%,硫酸铵质量分数为20%,p H6.0,温度为30℃的萃取条件下,油楠总皂苷在两相的分配系数为12.60,回收率为94.8%。该方法可用于油楠种子中总皂苷的提取分离。