北京地区南瓜病毒病病原种类鉴定

为明确北京地区南瓜病毒病种类及其主要侵染病原,2016~2017年在北京周边采集疑似感染病毒的南瓜病样84份,并根据南瓜上的6种病毒特异性引物对其进行反转录PCR(RT-PCR)检测。结果表明:共有79份南瓜病样检测显示阳性,其中黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的检出率最高,为52.38%;其次是小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)和西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV),检出率分别为44.01%、14.29%,其他病毒暂未检出。此外,16.67%的样品受2种病毒复合侵染,CMV和ZYMV复合侵染占7.14%,ZYMV和WMV复合侵染占9.52%。北京地区南瓜上优势病毒种类为CMV,且存在病毒复合侵染现象。     

猫鼻气管炎病毒、怀状病毒、泛白细胞减少症病毒的分离及其其形态学观察

根据病毒的理化特性，从猫三联活疫苗中分离出猫鼻气管炎、猫西洋太和猫泛白细胞减少症病毒；筛选出每种病毒敏感的细胞，并将该3种病毒分别分别在其中传代与扩增；通过电镜观察此3种病毒的形态学特征及其在宿主细胞内增殖部位、分布情况等，并以此对猫3种病毒进行了初步鉴定。     

内蒙古山羊流产病毒的特性研究

1990－1992年从野外山羊流产的胎儿中分离到2株病毒。1994年又从野外自然流产的山羊胎盘中分离到1株病毒。用琼脂扩散试验做交叉反应，证明3株分离病毒属于同一种病毒。用FUDR抑制试验鉴定其核酸型为RNA，在电镜下为圆形颗粒，直径约60－70mm，其能在BHK21，Vero细胞上和鸡胚中增殖，产生明显的CPE。将其回归孕山羊，引起51．2％（21／41）流产。研制的福氏完全佐剂灭活苗初试与对照比较，可使流产降低46％，血清学反应证实其与BTV，IBARKIV，EHDV，AKBV无相关性。     

家畜繁殖生物技术研究现状及趋势

牛胚胎移植技术已趋于成熟。我国新疆牧科院用一步细管法移植牛冻胚受胎率达41%;牛和羊鲜胚四分胚移植也产下1头犊牛和6只羔羊。家畜体外受精,因卵子体外成熟和受精卵体外培养尚不过关,目前仍停留在实验室阶段。胚胎性别鉴定,1990年Koopman发现单拷贝基因,该基因是Y染色体的性决定区,命名为SRY,可利用PCR技术制成雄性特异DNA探针盒,进行马、牛、羊、猪早期胚胎性别鉴定。北京农学院等单位用PCR扩增牛SRY序列进行奶牛胚胎性别鉴定准确率达100%。英、日、法等国已获得牛胚胎细胞核移植后代;我国也获得1只核移植兔。北农大和新疆牧科院合作以绵羊精子为载体导入牛生长激素基因rMTbGH DNA成功,外源基因整合率为3%。     

传染性牛鼻气管炎亚单位疫苗免疫原性的研究

用犊牛睾丸细胞培养传染性牛鼻气管炎病毒（IBRV），反复冻融，差速离心提取病毒，用Triton X-100溶解，超声波处理，制成IBRV TritonX-100亚单位抗原，经SDS－PAGE电泳，其分子量在176kD-53kD之间，其中有6条清晰的蛋白带。该抗原与一定比例的白油－司盘佐剂乳化，接种育成年，经间接ELISA检测，可使接种的育成牛产生高效价的血清抗体（OD492mm=1.57)。2种不同剂量（80mg/头，40mg／头）的IBRV亚单位疫苗接种育成牛，体内抗体效价相差不显著，抗体可在体内持续12周，用IBRV TrionX-100亚单位疫苗2次接种育成牛，其体内抗体效价显著高于用灭活疫苗2次接种育成牛体内的效价。试验结果表明：提取的IBRV多肽制作的亚单位疫苗具有良好的免疫原性，且抗体持续时间较长。     

家蚕质型多角体病毒苏州核包涵体小种的纯化

从BmCPV_t内发现和分离出一株新的核包涵体小种,初步命名为家蚕质型多角体病毒—苏州核包涵体小种(Cytoplasmic Polyhedrosis Virus——Suzhou nuclear polyhedra forming strain,简称CPV——Suzhou N strain),家蚕感梁CPV——Suzhou N Strain引起的多角体病,与国内外已知的CPV各变异株不同。本病蚕的多角体只在中肠组织圆筒形细胞核内检出,多角体内有许多病毒粒子,病毒粒子球状,具有核蛋白紫外吸收特征性光谱和较强的感染活性,病毒核酸初步鉴定为dsRNA。     

苹果退绿叶斑病毒组织印迹的免疫法检测与定位

用组织培养技术将富士苹果茎尖外植体建立在ＭＳ培养基中,形成试管苗。取４—６周龄的茎与愈伤组织,徒手切取约１ｍｍ厚的横切面,印迹在硝化纤维膜上。印迹组织经封闭后,与ＣＬＳＶ碱性磷酸酶标抗体反应。对反应结果进行显色。感染ＣＬＳＶ的印迹组织呈紫色反应,正常组织无显色反应。结果表明,该方法十分容易检测印迹组织中的ＣＬＳＶ。带毒愈伤组织较茎的显色反应敏感,显色反应时间仅为茎的一半（１５ｍｉｎ）。ＣＬＳＶ在愈伤组织中有两种分布情况：一是所有组织均有显色反应;二是呈不均匀分布。ＣＬＳＶ在茎组织中有三种分布情况：第一,除髓部外,表皮、皮层及维管系统中均有分布;第二,不均匀分布,ＣＬＳＶ集中分布于表度组织中,在皮层及韧皮部仅有少量分布;第三,“嵌合”分布,即同一种组织中部分组织带毒,部分为正常组织。     

狐狸脑炎病毒的分离鉴定

通过ＭＤＣＫ传细胞从黑龙江某狐场疑似狐狸脑炎病狐的肝脏中分离到对本动物具有较强致病能力的强毒株,定名为ＦＥＶ－Ｈ。经系统鉴定,并与已知国内分离毒株狐狸脑炎病毒ＦＥＶ－８８０１,狐喉气管炎病毒ＦＡＶ－２比较,证实为狐狸脑炎病毒,属犬１型腺病毒（ＣＡＶ－１）。     

苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒在家蚕蛹体内的复制及重组病毒外源基因的表达

家蚕蛹在复眼着色期,经4℃冷藏24小时后,可被Ac NPV(苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒)感染。在蛹体内复制出的多角体大小差异较大,且比在昆虫Sf—21细胞中繁殖的Ac NPV和在蚕蛹体内形成的Bm NPV多角体小。在蛹体内繁殖的Ac NPV的游离病毒可以回返感染Sf—21细胞。由蚕蛹内分离的Ac NPV基因组DNA的限制性内切酶图谱与野生型的Ac NPV相同。以上结果证明Ac NPV可以在蚕蛹体内复制。含HBsAg基因(人乙肝表面抗原)的重组Ac NPV亦可感染家蚕蛹,并能正确表达外源基因。此外,还发现化蛹后第2天的家蚕蛹被注射约5×10~5PFU的Ac NPV,可诱导“人工滞育蛹”现象的发生,在25℃经过30天后蛹仍存活,发育停滞在复眼着色前阶段。     

陕西线辣椒病毒病病原检测简报

在陕西省线辣椒主产区多点随机取样,采用酶联免疫吸附法对陕西线辣椒病毒病毒原进 行了鉴定。结果表明,陕西线辣椒病毒病毒原有BBWV、PMMV、CMV、ToMV、TMV、PVY和 CVMV。优势毒原是BBWV、PMMV和CMV。