奶牛MTT比色法的最佳条件探讨

为建立奶牛淋巴细胞增殖反应MTT比色法,对试验条件进行了研究。应用L16(45)正交试验,对影响MTT比色法的四个主要因素,包括ConA浓度、细胞浓度、培养液小牛血清浓度及培养时间进行了比较和探索。试验表明几个因素对其增殖反应都有显著影响(P<0.05),且最佳反应条件为:15μg/mL的ConA、1×106/mL细胞浓度、10%小牛血清及60h的培养时间;影响增殖反应的先后顺序为细胞浓度、ConA浓度、培养时间及血清浓度。     

番茄酱中亚硝酸盐与硝酸盐含量的测定

番茄酱是新疆自治区的特色农产品，由于番茄在种植过程中过量施用化肥，以及农田灌溉水的污染，造成番茄酱中硝酸盐和亚硝酸盐的含量过高，严重危害人体健康。因此硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定极为重要。目前我国测定蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的方法有示波极谱法、镉柱法、选择电极法、动力学法等，镉柱法较为烦琐，不适合批量测定，选择电极法只适用于含水量较高的蔬菜样品，不适合果胶含量较     

用于水生病原菌的3种高通量活菌计数方法的比较

以一株副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)作为研究对象,比较了MTT [3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]比色法、ATP生物发光法和高通量生长曲线法在活细菌高通量计数上的应用效果。用96孔培养板进行不同浓度细菌活菌计数,确定了上述3种方法在副溶血弧菌活菌计数的标准曲线和线性范围。结果显示,副溶血弧菌的MTT比色法以DMSO溶解的MTT产物甲瓒在555 nm的吸光度(OD555 nm)为计数依据,活菌数的对数(LgC)与LgOD555 nm线性关系的标准曲线为LgC=(1.0439±0.0200)LgOD555 nm+(8.0565±0.0125),相关系数R²=0.9965,线性检测范围为7.8×106~2.5×108 CFU/ml;ATP生物发光法以ATP产生的相对发光度值(RLU)为计数依据,LgC与LgRUL线性关系的标准曲线为LgC=(0.9590±0.0065)LgRLU+(0.9949±0.0366),相关系数R²=0.9994,线性检测范围为1.0×104~3.0×108 CFU/ml;高通量生长曲线法以生长曲线达到拐点的时间(Ts)为计数依据,LgC与Ts线性关系的标准曲线为LgC=?(0.8727±0.0230)Ts+(9.0128±0.1572),相关系数R²=0.9924,线性检测范围为1.0×100~1.0×107 CFU/ml。用3种方法对实际菌液测量并与平板计数法比较表明,ATP生物发光法与高通量生长曲线法有很好的准确性,MTT比色法准确度稍差,而高通量生长曲线法有最宽的线性范围,也最适合高通量测定。     

钼蓝比色法测定笃斯越橘成熟果实中还原型抗坏血酸含量及体系优化

以笃斯越橘(Vaccinium uliginosum)成熟果实为试材,以钼蓝比色法测定笃斯越橘果实还原型抗坏血酸(Reduced ascorbic acid,As A)含量进行条件优化。结果表明,3%偏磷酸-乙酸用量为100μL、5%硫酸和5%钼酸铵用量均为200μL、以去离子水补充至1 500μL,30℃干热恒温浴显色40 min,取出室温下放置1 h后,在700 nm下测定,所得数据稳定,准确性适合用于笃斯越橘果实As A含量的测定;测得含量为(40.20±6.23)mg/100 g FW。     

有机质肥料中硝酸態氮素分析方法的研究

一、绪言硝酸态氮素定量分析,普通多使用还原法与比色法两种。但有机质肥料如厩肥、堆肥含大量有色体、尿素、氯化物等杂质,以上两种方法,都不适用。动物粪便中,每含有大量铵盐及易于分解的各程氮的化合物。无论在酸性或     

用二乙酰肟比色法对饲料中尿素含量的测定

国家标准GB6432-86是利用凯氏定氮法测定饲料中粗蛋白的含量。一些不法分子在饲料中掺入尿素,以此来提高饲料中总氮含量,这就给测定饲料中粗蛋白质的真实含量带来困难。饲料中尿素含量没有标准的检测方法。在长期的工作实践中,我发现二乙酰肟比色法测定尿素含量较为可靠。现介绍如下：     

市售酶抑制-比色法农残速测试剂盒对多种农药的敏感性测定

【目的】为全面了解市售酶抑制-比色法农药残留快速检测试剂盒的品质,使其在农产品检测与监管工作中发挥更大作用。【方法】采用产自广州的达园品牌的酶抑制-比色法农药残留快速检测试剂盒,对28种农药的敏感性进行测定。【结果】该试剂盒对各农药的敏感性存在显著性差异,在所测定的28种农药中,试剂盒对克百威和涕灭威亚砜的敏感性较强,对二嗪磷、甲拌磷、三唑磷、蝇毒磷、倍硫磷、水胺硫磷、地虫磷、乐果、甲基异柳磷、丙溴磷10种农药的敏感性极低;对杀扑磷的敏感性在样品提取液取用3 mL和2.5 mL之间产生较大差异,测定甲基对硫磷时抑制率和农药浓度对数之间不存在线性关系。【结论】按照50%的判定阈值进行判定,在所测定的28种农药中,只有当样品中含有克百威、涕灭威砜、辛硫磷和喹硫磷时可以报出阳性。酶抑制-比色法农药残留快速检测试剂盒对各种不同农药敏感性的巨大差异是引起该试剂盒测试样品产生的假阳性、假阴性检测结果的原因之一,需要引起相关人员的重视。建议国标和行标修改判定阈值。     

两种饲料混合均匀度测定方法的比较

饲料混合均匀度的测定方法,常用的有GB/T5918-1997甲基紫法、沉淀法、氯离子选择电极法。也有部分厂家采用钙测定法、粗蛋白分析法、原子吸收法等。长期以来,我们化验室测定饲料混合均匀度的方法,都是采用国标的甲基紫法。此方法主要是以甲基紫色素作为示踪物,与添加剂一起加入,参与饲料混合生产,然后用比色法测定甲基紫的含量,通过甲基紫的含量差异来反映饲料的混合均匀度。此方法的主要缺点在于:①甲基紫需要充分研磨,使其全部通过100目标准筛,需要研磨较长时间。②研磨时,不管研磨者怎样“武装”,甲基紫都能进入研磨者的口、鼻、衣服内…     

2种测定稻米直链淀粉含量方法的差异性研究

在15,20,25℃3个温度梯度下,利用简易碘蓝比色法与GB／T15683—1995分别测定稻米直链淀粉含量,测得的结果作成对数据的t测验发现,在15,20,25℃下,差异均不显著。在15℃下,当直链淀粉含量较低时．简易法的测定结果略高于国标法,而直链淀粉含量高时则相反．在20,25℃下,简易法的测定结果普遍高于国标法,因此,2种测定方法在15℃下差异最小。通过研究还发现,简易法在不同温度下的测定值较稳定,标准曲线的斜率变化不大,因此简易法在温度15℃左右可以用于测定稻米直链淀粉含量,高于20℃则用简易法测得的结果由于普遍偏高,因此可用于粗略的估计,不宜作为精确的测定方法。