菌根真菌液泡的分离及特性研究

从菌根真菌黑核菌（ＣｅｎｏｃｏｃｃｕｍｇｅｏｐｈｉｌｕｍＦｒ．）和鹅膏菌［Ａｍａｎｉｔａｍｕｓｃａｒｉａ（Ｌ．ｅｘＦｒ．）Ｐｅｒｓ．ｅｘＨｏｏｋ．］菌丝中，采用多元碱化合物诱导原生质体裂解方法，分离出细胞器──液泡。实验结果表明，在加磷的ＭＭＮＣ培养基中培养４—７天的菌丝经水解酶作用所释放出的原生质体具有较高的液泡化程度；液泡产率约为原生质体的５－１０％；细胞质特征酶葡萄糖－６－磷酸－脱氢酶活性测定结果证明了液泡的纯度；而等量原生质体和液泡中酸性磷酸酶及α－甘露糖苷酶活性的比较表明这两种酶主要存在于液泡中，因此，它们可以作为菌根真菌黑核菌和鹅膏菌液泡的特征酶。     

浅析土生空团菌(Cenococcum geophilum)自然侵染率及其与植被、根际土壤因子的关系

为了明确土生空团菌环境适应机理,以内蒙古地带性植被为研究对象,调查和测定了不同森林类型区土生空团菌自然侵染率、植被类型、土壤养分含量变化,探讨土生空团菌自然侵染率与植被、土壤因子的关系。结果表明,从植被类型来看,大兴安岭兴安落叶松、黑里河油松、大青山虎榛子、乌拉山白桦、贺兰山青海云杉等宿主植物土生空团菌自然侵染率均为30%以上,不同森林类型区油松土生空团菌自然侵染率也存在一定的差异。从根际土壤因子分析,土生空团菌自然侵染率与根际土壤有机质(r=0.492)、全氮(r=0.479)呈明显正相关(P<0.05),与根际土壤速效磷(r=0.575)呈极显著正相关(P<0.01)。     

Effect of ectomycorrhizae on the growth and uptake and transport of 15N-labeled compounds by Pinus tabulaeformis seedlings under water-stressed conditions

 Seedlings of Chinese pine (Pinus tabulaeformis Carr.) were grown in a growth chamber using a sterilized soil/sand/vermiculite mixture, and were inoculated with the ectomycorrhizal fungus Cenococcum graniforme (Sow.) Ferd. and Winge. The function of external mycelium of ectomycorrhiza for uptake and transport of N from ¹⁵N-labeled NH₄ ⁺ and NO₃ ^– for plant nutrition was evaluated under well-watered conditions and water stress. The pots comprised two-compartments, whereby the penetration of roots was prevented by a nylon mesh bag which the mycorrhizal hyphae were allowed to pass in order to colonize the rest of the pot. ¹⁵N-labeled NH₄ ⁺ or NO₃ ^– was applied to the area of the pot to which the root had no access. At harvest, the ¹⁵NH₄ ⁺ concentration in plant tissues was significantly promoted by the formation of mycorrhizae both under well-watered conditions and water stress. The ¹⁵NO₃ ^– concentration was reduced by water stress and increased by mycorrhizal formation. The enhancement of ¹⁵NO₃ ^– uptake caused by mycorrhizal formation was more evident under water stress than under well-watered conditions. The external mycelia of the ectomycorrhizae took up and transported NH₄ ⁺ and NO₃ ^– from the soil to the plant, thereby improving plant nutrition and growth, in addition to helping the plants to avoid the effects of water stress. Received: 31 October 1997     

影响菌根真菌黑核菌原生质体分离的因子研究

从菌根菌黑核菌菌丝出原生质体，并获得再生菌落。研究了预处理方法及不同水解酶组合，酶解温度和菌丝密度对原生质体产率的影响。在用胰蛋白酶预处理后，以０．８Ｍ山梨醇为渗透压稳定剂，温度为２０Ｃ，ｐＨ５．５及纤维素酶，溶解酶和浸解酶处理，可获得较高的原生质体产量。     

土生空团菌(Cenococcum geophilum Fr.)的菌种鉴定及其遗传多样性的初步分析

 【目的】鉴定外生菌根真菌土生空团菌（Cenococcum geophilum Fr.（Cg））菌种，分析土生空团菌的遗传多样性，探讨影响土生空团菌遗传分化的因素。【方法】采用形态特征结合PCR方法，从分离自6种寄主植物的27个中国菌株和来自法国的5个Cg菌株中鉴定出20个Cg菌株。利用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和随机扩增片断多态性DNA（RAPD）两种分子标记方法对这20个Cg菌株进行遗传多样性分析。【结果】PCR-RFLP方法以通用引物ITS1和ITS4对20个Cg菌株的核糖体DNA转录间隔区（ITS）进行了PCR扩增，扩增产物用3种内切酶（EcoRⅠ、HinfⅠ和MboⅠ）酶切，酶切图谱显示菌株间有明显差异。RAPD方法用经过筛选的随机引物（5'-CGCACCGCAC-3'）对20个菌株的基因组DNA进行PCR扩增，扩增产物的片段大小在300～2 000 bp范围之间，共产生19个多态性位点。根据电泳图谱上DNA带的数目、位置及强度进行数值化，用聚类分析软件计算菌株间的遗传距离和遗传相似性，根据遗传距离构建20个菌株的系统聚类图。【结论】来源于不同寄主及地域的20株Cg有着较丰富的遗传多样性；地理环境和寄主对Cg遗传多样性的影响不大。     

虎榛子愈伤组织对土生空团菌菌丝生长的影响

新研究表明植物不能形成菌根的障碍是缺失一种植物形成菌根的信号物质,这种信号物质可以诱导菌根真菌菌丝的生长和分枝,为下一步研究植物与外生菌根真菌互作的生化机制和互作过程中的信号传导途径提供理论基础,建立虎榛子愈伤组织与其外生菌根菌的共培养体系,在纯培养条件下采用干重法,测定虎榛子愈伤组织、愈伤组织匀浆液和愈伤组织分泌物对两株土生空团菌[Cenococcum geophilum Fr. (Cg)]菌株生长的影响。结果表明,供试Cg菌株与宿主的愈伤组织共同培养可以明显地促进菌丝的萌发和生长,而愈伤组织匀浆液和愈伤组织分泌物也可促进菌丝体早期生长,其中共培养法培养促生作用最强,尤为突出,两菌株单菌落的生物量分别达到63.5 mg和45.2 mg。初步研究表明,虎榛子愈伤组织与菌根菌共培养可以明显促进菌丝生长,证明虎榛子愈伤组织细胞在生长的过程中会分泌一类生化物质对外生菌根真菌菌丝的生长有促进作用,但究竟有哪些物质在起作用,是进一步研究的内容。     

土生空团菌（Cenococcum geophilum Fr.）菌丝体纯培养条件的初步研究菌丝

土生空团菌(Cenococcum geophilum Fr.)是自然界最为常见的外生菌根真菌之一。通过对其菌丝体营养生理特性的研究，报道了不同培养基，碳、氮源和pH值对于土生空团菌菌丝体生长的影响。结果表明：(1)从供试的培养基来看，MRD为最适培养基；(2)该菌在供试的C源中以葡萄糖和蔗糖利用较好；(3)N源的利用以硝酸钾效果最佳，而且该菌种也能够利用有机态的氮(即蛋白胨)；（4)土生空团菌菌丝体对pH值的适应范围较广。     

土生空团菌与虎榛子形成的菌根及其对虎榛子生长的影响

菌根是高等植物根系与土壤中的一类特殊真菌形成的互惠联合体。研究证明 ,菌根不但决定植物的分布 ,影响群落的组成 ,改变植物之间的相互关系 ,而且还对生态系统的稳定与物质运输、能量转化 ,生物多样性的维持 ,受损生态系统的恢复均产生很大的影响 (杨国亭等 ,1999)。深入研究