菌根真菌液泡的分离及特性研究

从菌根真菌黑核菌（ＣｅｎｏｃｏｃｃｕｍｇｅｏｐｈｉｌｕｍＦｒ．）和鹅膏菌［Ａｍａｎｉｔａｍｕｓｃａｒｉａ（Ｌ．ｅｘＦｒ．）Ｐｅｒｓ．ｅｘＨｏｏｋ．］菌丝中，采用多元碱化合物诱导原生质体裂解方法，分离出细胞器──液泡。实验结果表明，在加磷的ＭＭＮＣ培养基中培养４—７天的菌丝经水解酶作用所释放出的原生质体具有较高的液泡化程度；液泡产率约为原生质体的５－１０％；细胞质特征酶葡萄糖－６－磷酸－脱氢酶活性测定结果证明了液泡的纯度；而等量原生质体和液泡中酸性磷酸酶及α－甘露糖苷酶活性的比较表明这两种酶主要存在于液泡中，因此，它们可以作为菌根真菌黑核菌和鹅膏菌液泡的特征酶。     

三羟鹅膏毒肽的反相高效液相色谱分离纯化

用反相高效液相色谱法,以0.02mol醋酸铵-乙腈为流动相和梯度洗脱模式,从灰花纹鹅膏菌中分离纯化出三羟鹅膏毒肽(amanin),产品纯度达96%以上,三羟鹅膏毒肽的分子量为903.3.     

鹅膏菌毒素的研究进展

鹅膏菌的主要毒素根据其结构、性质等可分为鹅膏毒肽、鬼笔毒肽和毒伞素3类。通过对毒肽进行定向修饰,可以改造它们的化学性质和生物学特性。随着对它们的深入了解和研究,这3类毒肽已经成为具有广阔研究和应用前景的新兴资源。为进一步认识和利用这些资源,本文对鹅膏菌毒素的分布、检测、化学结构、化学性质、代谢动力学、毒理,临床症状与治疗,以及综合利用等方面的研究进展作了系统的总结和评述。     

灰花纹鹅膏菌及其生态习性

灰花纹鹅膏菌Amanita fuliginea Hongo的分类地位和生态习性国内一直没有详细报道.用形态解剖、HPLC和种群生态学研究方法对其研究表明日本学者Hongo对该菌的分类是正确的；它的毒素含量与欧洲的主要种毒鹅膏菌Amanita phalloides(Fr.∶Fr.)Link毒素含量相当，甚至更高.湘东湘南丘陵针栎混交林非常适宜该菌生长发育与演化.     

红托鹅膏生态环境研究

以武定狮山为样点,对红托鹅膏的生境进行了初步研究。结果表明,红托鹅膏主要生长于滇青冈、滇石栎等阔叶林或针（云南松）阔混交林中,其生长的土表层疏松、透气、潮湿,具有厚4 cm~9 cm的腐叶层,有稀薄的阳光透入,土层有机质含量高,矿物质养分丰富,土壤容重较小,偏微酸性（pH5.4~5.7）。子实体分化发育较适宜的温度为19℃~21℃,空气湿度为75%~86%,土壤含水量为38%~50%,并每天保证1 300 lx~2 000 lx的光照2 h~5 h,200 lx~900 lx的弱光6 h~9 h。     

鹅膏菌产抑菌物质培养条件优化及安全性分析

经前期试验验证鹅膏菌菌株AV对杨树烂皮病病原菌金黄壳囊孢菌有抑制作用,通过比色法和生物量测定结果得出其抑菌物质产生的最佳营养条件。在供试营养物质中,乳糖为最佳碳源,蛋白胨为最佳氮源,方差分析结果表明,碳源是鹅膏菌AV生物量及其抑菌物质产生的最主要影响因素,与其他营养元素差异显著(α=0.05)。培养基最佳组合为:①乳糖30.0 g/L,蛋白胨0.5 g/L,MgSO41.5 g/L,KH2PO44.5 g/L;②乳糖10.00 g/L,蛋白胨0.50g/L,MgSO40.75 g/L,KH2PO44.50 g/L;③乳糖30.0 g/L,蛋白胨2.0 g/L,MgSO41.50 g/L,KH2PO43.0 g/L。液体发酵培养时,菌株AV产生抑菌活性物质的最适培养条件为:pH值5～6,温度25℃,接种量1.25%,装液量50%,摇床转数180 r/min,培养时间20 d。当温度超过75℃,pH大于9或小于4时,或者紫外照射时间超过4 h都会使抑菌物质活性降低。小鼠毒性试验结果表明,小鼠饲喂菌株AV菌丝体,LD50为418.70 mg/kg,95%可信限为453.11～386.90 mg/kg,抑菌物质控制在2 g/L以内对小鼠无影响,因此,在进行病原菌防治时,为减少对环境中其他生物的影响,菌株AV抑菌物质质量浓度应低于2 g/L。     

鹅膏菌的抑菌作用及活性成分的FT-IR分析

对鹅膏菌AV对病原菌的抑制效果和分离物的结构进行了初步分析。结果表明:鹅膏菌AV粗提物对病原菌的菌丝生长抑制率是68.27%,孢子处理8 d后未萌发,而对照5 d内即萌发。对粗提液进行柱层析分离得3个成分,其中分离物Ⅳ对病原菌的抑制效果最好,即生长抑制率是76.73%,孢子处理8 d后未萌发;分离物Ⅳ为鹅膏菌AV主要抑制病原菌的活性物质。通过对3个分离物进行FT-IR分析,可以看出3类物质均有酰胺的特征吸收,初步推断分离物Ⅳ为伯酰胺或仲酰胺类物质。试验证明FT-IR能够简便、快速地提供某些有机化合物主要官能团特征吸收的信息。     

鳞柄白鹅膏培养特性及其菌株的rDNA ITS序列测定

鳞柄白鹅膏为外生菌根菌.为了确定试验菌株是否为鳞柄白鹅膏(Amanita virosa),对其菌丝体进行了ITS序列测定和GenBank基因库比对,并通过生长速率法研究其室内培养条件.结果显示,试验菌株的ITS序列长度为516 bp,在GenBank核酸序列数据库中比对,试验菌株与鳞柄白鹅膏的相似率为95％,可以确定此菌株为鳞柄白鹅膏,GenBank登录号为EF493032.pH值对鳞柄白鹅膏培养菌丝生长的影响根据不同的培养基而不同,其中在含马铃薯的培养基中,pH值对菌丝生长的影响很小,pH值在5～10时均生长良好,可以作为后续试验的主要培养基.供试最适碳源为甘露醇,最适氮源为酵母膏,最适生长温度为25℃.     

灰花纹鹅膏的毒素及毒性研究初报

用抑酶法测定灰花纹鹅膏(Amanita fuliginea)子实体内的毒素,结果表明,灰花纹鹅膏菌所含毒素与毒鹅膏(Amanita Phalloides)所含毒素相近。小白鼠肌肉注射毒性试验表明,每只小白鼠注射1ml浓度为0.05g/ml的灰花纹鹅膏菌子实体水提液,6h内被测小白鼠全部死亡;若注射浓度在0.01g/ml以下,小白鼠有中毒症状而无死亡,说明该菌是一种剧毒鹅膏菌。     

我国的几种剧毒鹅膏菌

在鹅膏属 (Ａｍａｎｉｔａ)真菌中 ,有的是重要的食用菌 ,有的有一定的毒性但误食并不致命 ,而有的则是剧毒的 ,误食常会危及生命。绿盖鹅膏〔Ａ .ｐｈａｌｌｏｉｄｅｓ (Ｆｒ.)Ｌｉｎｋ .〕、春生鹅膏〔Ａ .ｖｅｒｎａ(Ｂｕｌｌ.:Ｆｒ .)Ｌａｍａｒｃｋ〕和鳞柄鹅膏〔Ａ .ｖｉ