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文章探索建立简单可靠的SHR大鼠心室肌细胞的分离方法,提高细胞存活率和膜片钳试验成功率。采用Langendorff灌流装置,离体心脏逆向灌流,分离单个SHR大鼠心室肌细胞。使用膜片钳全细胞记录技术,记录大鼠心室肌细胞L-型钙电流。通过对细胞的观察发现,细胞呈长杆状,横纹清晰,细胞膜结构完整。膜片钳全细胞记录到典型的L-型钙电流,激活电位-40 mV,峰值电位0 mV,反转电位+50~+60 mV,呈现出电压依赖性。观察到的L-型钙电流可被钙通道阻滞剂维拉帕米抑制。结果表明,采用的大鼠心肌细胞分离方法可分离制备出适合膜片钳电生理观察的心肌细胞标本。 相似文献
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【目的】研究逆境信号水杨酸(SA)刺激条件下,蚕豆气孔保卫细胞中H2O2的产生及其对气孔运动的影响。【方法】以蚕豆为材料,利用表皮条生物分析、膜片钳等方法研究SA诱导蚕豆气孔关闭过程中质膜内向K+电流的变化。【结果】SA可以浓度依赖的方式诱导蚕豆叶片的气孔关闭。质膜NADPH氧化酶抑制剂二亚苯基碘(DPI)可削弱SA作用的45%~60%。借助膜片钳手段记录SA处理条件下全细胞内向K+电流的变化,胞外0.1mmol/L SA处理后20 min可抑制内向K+电流的70%左右。电极液中10μmol/L DPI作用20 min可逆转SA抑制全细胞内向K+电流的46%左右。【结论】SA诱导的气孔关闭可能与H2O2的产生有关,DPI逆转SA对保卫细胞内向K+电流的抑制作用暗示,H2O2可能通过抑制质膜内向K+电流而介导SA诱导的气孔关闭过程。 相似文献
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实验得出适合膜片钳实验的耐盐木本植物中国沙棘子叶原生质体的游离条件,即取当天脱壳的子叶,放入渗透浓度为0.88 mol/L,pH为5.8,酶液的组分为10 g/LCellulase R-10、0.5 g/LPectolyase Y-23、1.5 g/LMacrozymeR-10、1 g/L Hemicellulase、1 g/L BSA、1 g/L PVP-40、2 mmol/L CaCl2、10 mmol/L Mes和5 mmol/L Vc的溶液中,在26℃、黑暗条件下,静置4 h。并且利用Multiclamp 700B放大器和Clampex 9.2软件,记录到了该原生质体质膜全细胞内向K 通道电流(-459.137 pA及-290.527 pA)和非选择性阳离子通道的外向电流(8.036 pA)。这为沙棘属木本植物细胞的电生理特性及其耐盐性机制关系的研究奠定基础。 相似文献
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应用细胞膜片钳技术,分别对正常对照组、犬瘟热(CD)组、川芎嗪组、黄芩甙组、黄芪组、黄连素组犬支气管平滑肌细胞(BSMC)电压门控性钾通道(Kv)动力学指标、静息膜电位(Em)、静息膜电容(Cm)和电流密度(pA/pF)进行了测定。结果表明,CD组BSMC膜Kv活性显著降低。川芎嗪、黄芩甙、黄芪3种中药(成分)均能不同程度拈抗CD模型犬BSMC膜Kv通道活性的抑制,促进支气管平滑肌细胞膜Kv通道的开放。黄芩甙具有显著提高支气管平滑肌细胞膜Kv通道活性,促进支气管平滑肌舒张作用,在4种中药(成分)中表现突出。 相似文献
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【目的】对氟虫腈结构进行衍生改造,寻找作用于昆虫中枢神经系统的新型活性化合物,为新杀虫剂的开发提供实践经验和理论指导。【方法】运用中间体衍生化策略,以氟虫腈为原料,经2步反应合成6个新型芳基吡唑脲类化合物(2a~2f),MS、~1H NMR和~(13)C NMR分析确认化合物2a~2f的结构;采用浸叶法测定目标化合物对3龄小菜蛾幼虫的生物活性;利用膜片钳技术检测目标化合物对昆虫中枢嗅觉神经元的毒性作用方式。【结果】生测结果表明化合物2a毒力最大,12 h LC_(50)值为6.17μg·mL~(–1);电生理数据显示,化合物2b、2d、2e、2f对神经元的作用方式不同于母体化合物,呈现出神经元膜电位短暂去极化,继而膜电位逐渐超级化,并伴随自发电活动被抑制。【结论】在具有生物活性的分子上引入酰胺脲键,是改变农药对昆虫中枢神经系统毒性作用方式的潜在策略,对新农药创制具有一定指导意义。 相似文献
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目的为解决目前商品化灌流系统的价高,通道易发生堵塞且维修、保养费时费事,特研制了一种稳定、高效的四通道灌流系统(简称STD-1型)。方法制作方法分为2部分:⑴四通道灌流部分以有机玻璃制作:⑵密封瓶部分以橡胶塞打孔插入玻管并连接胶管后连接装置,最后用膜片钳全细胞记录的设备对STD-1型灌流系统进行效果检测。结果与结论自制的STD-1型灌流系统浴槽内的液面稳定且液体置换迅速,不易发生堵塞,且维护简便,经我室多年使用效果良好。 相似文献