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1.
玻璃化法是近几年才建立起来的一种细胞、胚胎及卵母细胞的冷冻保存技术。Nekagata和Shaw分别于1989年和1991年用此化法冷冻保存小鼠成熟卵母细胞,取得理想结果。本实验对玻璃化法冷冻保存绵羊卵巢内卵母细胞作了尝试。1 材料与方法从屠宰后东北细毛羊取出卵巢,用注射器从直径2~6mm的卵泡中抽取卵丘—卵母细胞复合体,选择正常的用成熟培养液(M199+10%FCS)洗2次后,转入VS_1(20.5%(w/v)二甲基亚砜, 相似文献
2.
3.
哺乳动物胚胎的超低温保存技术对于动物种质资源的保存和良种家畜的国际交流具有重要意义,是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等胚胎生物技术不可分割的组成部分。1972年,英国学者Whittingham等人首次利用慢速冷冻法保存小鼠胚胎获得成功。此后许多学者对冷冻方法进行了广泛的研究。然而,在胚胎冷冻和解冻过程中都存在许多会使胚胎受到损伤的因素,如:抗冻保护剂的毒性,冷冻损伤,细胞内冰晶的形成,破裂损伤,渗透压引起的膨胀。因此,使用不同的冷冻和解冻法应避免或减少胚胎受到损伤,以提高胚胎解冻后的存活率。1抗冻保护剂和冷冻溶液在哺乳… 相似文献
4.
玻璃化冷冻水牛MⅡ期卵母细胞的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为建立玻璃化冷冻保存水牛MⅡ期卵母细胞的有效程序.试验比较了3种冷冻保护剂组合(Ⅰ:20%乙二醇 20%二甲基亚砜:Ⅱ:25%乙二醇 25%二甲基亚砜:Ⅲ:25%乙二醇 25%甘油)和3种玻璃化冷冻方法(毛细玻璃管法、铜环法及半麦管法)对水牛MⅡ期卵母细胞的毒性和冷冻效果的影响.结果表明,Ⅲ组的卵母细胞形态正常率显著低于I和Ⅱ组(P<0.05),且Ⅲ组的存活率也显著低于Ⅰ组(P<0.05).而Ⅰ和Ⅱ组的卵母细胞形态正常率和存活率没有显著差异(P>0.05).进一步孤雌激活发现,Ⅰ组的卵裂率显著高于Ⅲ组(29.17±4.81%,5.56±11.11%,P<0.05),Ⅰ组的囊胚发育率显著高于Ⅱ和Ⅲ组(8.33士2.23%,2.43±2.87%,1.86±3.71%,P<0.05).然而Ⅱ和Ⅲ组间的卵裂率和囊胚发育率没有差别(P>0.05).采用铜环法的回收率显著高于半麦管法(P<0.05),但和毛细玻璃管法之间差异不显著(P>05),冻后卵母细胞孤雌激活后的卵裂率和囊胚发育率差异不显著(P>0.05).3种冷冻保护剂中Ⅰ组的细胞毒性作用最小.Ⅲ组的细胞毒性作用最大;铜环法和毛细玻璃管法能有效冷冻保存水牛的MⅡ期卵母细胞. 相似文献
5.
利用解剖学方法,对披针叶黄华(Thermopsis lanceolatar)试管正常苗与玻璃化苗茎叶的解剖结构进行了观察比较。结果表明,玻璃化试管苗叶片和茎的解剖结构与正常试管苗有显著差异。前者叶片肥厚,无角质层,上表皮细胞多肿胀破裂;叶肉中栅栏组织退化消失,海绵组织细胞体积膨大,液泡化,某些区域细胞壁发育不完全,出现大的裂隙腔;叶片维管束退化;茎部表皮不完整,皮层和髓部组织的细胞皱缩变形,维管组织分化不完全等。这些结构上的畸形发育是影响披针叶黄华试管苗正常生长和增殖的重要原因。 相似文献
6.
玻璃化法超低温保存匍匐翦股颖胚性愈伤组织及其植株再生 总被引:2,自引:0,他引:2
采用玻璃化法对匍匐翦股颖愈伤组织进行超低温保存条件及植株再生进行初步研究.结果表明:将继代2次的愈伤组织接种到预培养基上,4℃低温预培养5 d.预培养后的愈伤组织在常温下用装载液过渡10 min,再于0℃下用玻璃化溶液PVS2处理50 min后,加入新鲜的PVS2迅速投入液氮中保存1 h以上,取出后在30℃水浴中解冻,用MS+1.0 mol.L-1蔗糖溶液洗涤3次,每次10 min,细胞存活率可达85.6%,接种在恢复培养基上培养,胚性愈伤组织能正常进行体细胞胚胎发生、成熟和植株再生. 相似文献
7.
Nutritional oil for infant formula food was microencapsulated by the spray drying method with coating materials including maltodextrin (MD), soy protein isolate (SPI), and emulsifier (soy lecithin). Vegetable oil blend was prepared by mixing coconut oil, safflower oil and soybean oil at a ratio to achieve a fatty acid profile comparable to human milk fat (HMF). The fatty acid composition of the product was determined by capillary gas chromatograph. As a result, the composition was as close as possible to that of HMF, it could be used for infant fomular food to make up some deficiencies of milk powder in nutrition and functional properties. Furthermore, the glass transition temperature (Tg) of the wall material was determined by DSC and its Tg was 66.42℃. It provided a theoretical basis for the storage of the product at the normal temperature. 相似文献
8.
种质资源是决定生物“种性”并将其遗传信息从亲代传递给后代的遗传物质的总体。由于种质资源的重要性及其面临流失的巨大危机,采用适当的方式妥善保存种质资源已是当前国际上普遍关注的问题。本文从对种子、花粉、茎尖、芽等不同类型的种质资源的保存方法进行归纳,并预测了该领域未来的发展方向,旨在为今后种质资源的进一步研究和应用提供基础。 相似文献
9.
胚胎冷冻保存一般指0~-80℃的温度下保存胚胎,而超低温冷冻保存则是在极低的温度(液氮-196℃、液氦-269℃)下保存动物胚胎。处于超低温下的胚胎,其新陈代谢几乎完全暂时停止,因而可以达到长期保存的目的。朱等(1998)对小鼠扩张囊胚在液氮中冷冻保存1h、1年和2年,解冻后的囊胚恢 相似文献
10.
云南乌蒙山区土壤养分空间变异及海拔梯度分布规律 总被引:1,自引:1,他引:0
[目的]为探知云南乌蒙山区土壤养分空间分布格局和规律,[方法]本文应用经典统计学和地统计学方法对云南乌蒙山区土壤的酸碱性(pH)、有机质(SOM)、全氮(TN)、有效磷(AP)、速效钾(AK)含量,进行空间变异分析和海拔梯度分布规律研究。[结果]结果表明云南乌蒙山区土壤整体呈酸性,绝大部分地区的SOM、TN、AP、AK处于中等或较高水平,各土壤养分呈现中等以上变异性。空间变异分析显示5种养分的最佳拟合模型均为指数模型,pH、TN空间自相关强烈,空间变异主要受结构性因素影响,SOM、AP、AK具有中度空间自相关,受结构性因素和随机性因素共同影响,土壤pH值和各养分含量空间分布均呈斑块状,条带性分布趋势不明显;云南乌蒙山区pH与海拔整体呈极显著负相关,各养分含量与海拔极显著正相关,但北部、中部、南部相互存在差异,海拔是影响乌蒙山区土壤pH值和养分含量空间异质性的重要结构性因素,但土壤SOM、AP、AK还受随机因素干扰。[结论]本研究有助于进一步从区域尺度上探索山地土壤养分空间异质性的形成机理。 相似文献