家蚕组织蛋白酶O（BmCatO）基因鉴定及表达分析

【目的】克隆家蚕（Bombyx mori）蛋白酶O基因Cathepsin O（BmCatO）,分析其mRNA表达特征,通过原核表达、蛋白纯化和多次免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,为进一步探究组织蛋白酶O在家蚕变态发育中的功能奠定基础。【方法】利用RACE技术克隆获得家蚕组织蛋白酶O的全长cDNA序列,然后采用RT-PCR对其时空表达特征进行研究。从NCBI下载其他物种组织蛋白酶O基因序列,利用Clustalx和MEGA 6.0软件进行同源比对和进化分析。选取特异性较高的片段设计特异性引物,将PCR扩增产物连接至PET32a质粒,转化至E. coil表达菌株Rosetta(DE3),经IPTG诱导获得组织蛋白酶O重组蛋白,然后利用Ni+亲和层析方法对重组蛋白进行纯化,最后多次免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体。【结果】家蚕组织蛋白酶O基因存在于家蚕第14号染色体上,scaffold为nscaf2943,基因编号BGIBMGA009231。该基因有两种剪切形式,剪切体1开放阅读框（ORF）全长为1 071 bp,编码356个氨基酸,预测蛋白分子量36 kD,等电点8.594;剪切体2 ORF全长为942 bp,编码313个氨基酸,预测蛋白分子量40 kD,等电点7.951。两种剪切体均有6个外显子和5个内含子构成,剪切体2的第六外显子出现部分缺失。两种剪切体编码的蛋白结构相似,均含有信号肽、Inhibitor129和Pept-C1结构域。进化分析结果表明,无脊椎动物组织蛋白酶单独聚为一类,且家蚕组织蛋白酶O与同为鳞翅目成员的二化螟（Chilo suppressalis）组织蛋白酶O最为接近。RT-PCR结果显示该基因特异性持续表达于幼虫血细胞,剪切体1的表达水平明显高于剪切体2,但这两种剪切体在幼虫血细胞发育时期表达趋势一致。构建家蚕组织蛋白酶O原核表达系统,利用亲和层析纯化获得高纯度的家蚕组织蛋白酶O重组蛋白,并利用纯蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA显示其效价高达到1﹕1 280 000。Western印迹结果表明,该抗血清可以特异性识别家蚕组织蛋白酶O重组蛋白。【结论】获得了家蚕组织蛋白酶O基因的完整cDNA序列及表达特征,经原核表达、纯化获得高纯度的融合蛋白,通过多次免疫新西兰大白兔成功获得抗体。     

地下污染水处理工艺设计

根据湖北省西北部农村地区生活用水所含物质成份,设计了地下污染水处理工艺流程,具体介绍了过滤净化装置中滤料的选取和系统压力和流量的控制。研究表明,采用该处理方法能够去除水中的杂质和有害物质,使地下污染水得以净化,从而达到生活用水的标准。     

农村公共产品供给能力评价与演化研究-以广西为例

建立区域农村公共产品供给能力评价指标体系,利用投影寻踪评价方法对广西农村公共产品供给能力进行综合评价,对农村公共产品供给能力的变化趋势进行非线性回归,得到其动态演化模型.研究表明：采用Logistic增长模型研究区域农村公共产品演化规律是可行的,能较好反映农村公共产品供给和演化特征,其结果将有助于决策者制定区域农村公共产品供给政策的制定.     

GIS探索性空间数据分析方法及其在地价分布信息提取中的应用研究

基于GIS探索性空间数据分析框架,利用江苏省镇江市的统计数据,对其城市地价分布信息进行了研究.首先建立探索性空间数据分析模型,包括空间数据结构分析、全局趋势分析、方向分析、离群值查找、合理步长确定等;随后在Arc/Info支持下,以镇江市商业地价样点数据为例,采用逐步比较法,对探索性分析方法的运用进行实证研究.误差分析表明,探索性空间数据分析在地价分布信息上的使用,可得到较合理的结果.     

基于CiteSpace的喀斯特地区水资源研究可视化分析

为探讨中国喀斯特地区水资源研究的热点与前沿,定量分析喀斯特地区水资源研究的主要研究力量及其时空演化特征,探索其发展趋势,运用科技文本数据挖掘可视化网络分析软件CiteSpace对中国知网(CNKI)数据库1991—2018年与喀斯特地区水资源研究相关的科技文献进行定量分析,从研究时间、关键词和中心度、主要研究作者和机构等方面对结果进行可视化网络表达。结果表明,中国近30年来喀斯特地区水资源研究科研论文数量随着时间变化总体上呈现曲折上升趋势,一直是学者们关注的热点;岩溶地下水、石漠化、水资源承载力等是喀斯特地区水资源研究的热点领域;苏维词、梁虹、梁彬等研究者是中国喀斯特地区的水资源研究领域作者网络构建者与知识传递者;主要研究机构包括中国地质科学院岩溶地质研究所、中国地质大学(武汉)等科研院所和高校,研究机构间合作关系存在较强地域性。为此提出应持续拓展喀斯特地区的水资源研究的外延与内涵,顺应社会经济发展趋势,寻求新的解决思路。     

GIS空间分析支持下的城市地价分布研究--以江苏省镇江市为例

以江苏省镇江市为研究区,对商业用地市场交易样点进行选择,在Arc/Info8.1地理信息系统的支持下,采用Or dinaryKriging插值,提取地价分布信息,生成商业地价等值线。结果显示:①镇江市商业地价中心分为两级,1级中心1个,次级中心4个;②商业地价空间分布形态呈辐聚状,辐聚中心在大市口附近;③地价等值线在1200元·m-2以上,围绕中心有规则地扩展成同心圆结构,1200元·m-2以下,产生次级地价中心;④商业中心与地价中心的分布有较强的一致性。上述结果表明:采用GIS空间分析对市场交易样点进行插值,进而研究城市地价分布规律,方法简单、分析结果误差小、结果可信。     

唐山市古树名木资源调查分析

唐山市于2017年开展了古树名木普查工作,对全市现存的古树名木进行了全面调查。本文以前期调查的相关数据为基础进行分析。结果表明,唐山市古树资源丰富,共记录到古树名木合计10 311株,包括古树群70个,古树群古树9 974株,散生337株(包括名木12株),其中板栗、油松居多。本文分析了唐山市古树名木存在的问题,并提出了相应的保护措施,以期为古树名木的保护提供参考依据。     

唐山市湿地植物资源研究

唐山市是河北省湿地类型齐全、数量最多的设区市.湿地高等植物共73科204属318种,被子植物占绝对优势.湿地植被面积为18445.03 hm2.