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氨苄青霉素单抗鉴定与酶联免疫检测方法的初步研究 总被引:6,自引:1,他引:6
利用碳化二亚胺(EDC)法将氨苄青霉素(AMP)与匙孔嘁血蓝蛋白(m cKLH)偶联制备免疫原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,建立分泌氨苄青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体数目为97~104条,3D12株亚型为IgG2 a,用其制备的腹水ELISA效价达到2×106。亲和常数为3×10-10mol/L,抗体相对分子质量为1.54×105,与其他抗生素的交叉反应率小于0.01%。采用间接竞争ELISA方法建立检测AMP的标准曲线,在0.5~100 ng/mL范围内呈线形相关,回归方程为Y=0.056 9X+0.130 8,相关指数R2=0.994 8,以10%抑制率对应的浓度计算,该方法对AMP的检测限为0.3 ng/mL,对市售消毒纯牛奶模拟样品最低检测限为0.4 ng/mL。 相似文献
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银杏为雌雄异株、风媒传粉植物。其雌花为裸露的胚珠,胚珠在传粉期不仅负责捕捉和识别空气中漂浮的花粉,而且形成花粉进入胚珠体内的通道和贮存花粉的结构,因此胚珠结构对银杏传粉效率和繁殖成效有重要影响。本文利用半薄切片和扫描电镜等技术观察传粉前后银杏胚珠形态与结构特征的变化,以揭示银杏适应风媒传粉的机制。结果表明:银杏胚珠发育过程中珠柄原基于当年12月首先发生,翌年1月珠被原基分化;3月中旬珠心组织和珠托分化形成,珠心组织分化的同时,周围珠被组织细胞不断分裂增殖,在珠心上方围合形成珠孔道,珠心内则分化形成孢原细胞;3月下旬胚珠珠孔开始开张,珠孔道伸长,珠心组织靠近珠孔端细胞发生解体死亡,贮粉室逐渐形成,孢原细胞逐渐伸长转变为大孢子母细胞;4月上旬,珠孔开张达到最大,并形成向外翻卷的漏斗状,珠孔处产生传粉滴,珠孔道的长度达到最长,贮粉室上方形成开口,大孢子母细胞减数分裂形成四分体,此时为传粉授粉最佳时期;传粉结束后传粉滴消失,珠孔、珠孔道及贮粉室闭合,雌配子体发育进入游离核阶段。以上结果显示经过长期的自然选择与生态演化,银杏胚珠已经具备了许多适应于风媒传粉过程中接受和识别花粉的结构特征。 相似文献
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试验旨在优化Smad泛素化调节因子2(Smurf2) siRNA最佳转染条件,筛选最佳siRNA干扰片段,进而实现对Smurf2基因的瞬时沉默,为研究Smurf2基因在马兜铃酸肾病(aristolochic acid nephrohathy,AAN)中的作用奠定基础。本研究通过培养小鼠原代肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs),并以脂质体LipofectamineTM 2000为转染介质,将Smurf2 siRNA转染入RTECs;通过观察绿色荧光的表达量及Real-time PCR反应优化转染条件,转染后Real-time PCR检测mRNA表达抑制率。CCK-8法检测Smurf2 siRNA复合物对RTECs活性的影响;同时,用Real-time PCR和Western blotting检测不同位点Smurf2 siRNA对Smurf2 表达的影响。结果显示,当Lipofectamine TM 2000与siRNA比例为1.5 μL∶30 pmol时,转染效率最高,为70%~80%;Smurf2-619 siRNA干扰效果最明显;与正常组相比,转染siRNA组的Smurf2蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。最终确定了Smurf2 siRNA最佳转染条件,其中Smurf2-619 siRNA对Smurf2 表达的抑制率最高。 相似文献
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陆彦 《黑龙江农垦师专学报》1999,(2)
在教学过程中,教师的“教”和学生的“学”组成双边协同活动,其中,教师居于主导地位,起主导作用,学生是学习的主体。教师在知与不知等矛盾中,具有主导作用。不仅要通过传授等方式使外部影响得以与教育对象已有的心理结构相同化,使学生获得新的知识、技能和其它新的心理品质,而且还表现在教师的启示作用,即通过启发引导等方式培养学生获得自我教育,自我发展,自我创造的能力,从这层意义上看,对学生的成长,有更重大,更深远的意义。在教学活动中,学生受教育的过程,不单纯是一个由外向内传导的过程,也是一个由内向外的主观作用… 相似文献
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【目的】探明不同种类的消毒剂对动物源菌株的消毒效果。【方法】将宠物收容站、肉鸡养殖场和鹌鹑养殖场来源采集的样品进行分离培养和生化鉴定;采用微量肉汤法测定7种常用消毒剂对不同动物源菌株的最小抑菌浓度(MIC);通过PCR方法检测动物源菌株携带的消毒剂抗性相关基因。【结果】从动物源样品中分离鉴定得到1株Escherichia coli、Pasteurella、Staphylococcus aureus、Streptococcus和3株Salmonella。药物敏感性试验结果表明鹌鹑源Salmonella typhimurium F35对部分阳离子表面活性剂类、过氧化物类消毒剂抗药;宠物源Staphylococcus aureus和Streptococcus对多种消毒剂抗药性增加。抗药基因检测鹌鹑源Salmonella F35菌株携带merA、intI1、qacEΔ1基因,宠物源Staphylococcus aureus检测出tehA基因,宠物源Streptococcus检测出tehA和intI1基因。【结论】鹌鹑源Salmonella typhimurium F35通过整合子以及外排泵等机... 相似文献