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【目的】建立梨悬浮细胞体系,并利用悬浮细胞体系获得高质量悬浮细胞,进行遗传转化和原生质体的分离。【方法】以新梨7号花药为试材,诱导获得梨花药愈伤组织,研究了细胞悬浮系建立和影响悬浮细胞增殖的主要因子。【结果】花药在1/2 MS+1.0 mg·L-12,4-D+0.4 mg·L-1NAA+30 g·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂(pH值为5.8~6.0)培养基上诱导的愈伤组织,经4~5次继代得到了黄白色、颗粒状,状态相对较好的愈伤组织;将愈伤组织接种于液体培养基中,于28℃,200 r·min-1的黑暗条件下悬浮振荡培养,经4~5次悬浮继代培养建立了悬浮细胞系,适宜的启动和增殖培养基为:MS+1.5 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+30 g·L-1蔗糖,细胞生长曲线呈“S”型,活细胞率达81.98%,近圆细胞率达83.66%,可作为遗传转化的受体,转化率为20.00%。也可直接用于原生质体的分...  相似文献   
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为探究杜梨嫩枝扦插的影响因素,筛选出最佳扦插方法,提高其扦插成活率,以杜梨嫩枝为试材,采用单因素试验设计筛选最优插条来源、新梢部段、插条长度和扦插基质,正交试验设计筛选最佳扦插生长调节剂配比。结果表明:连栋温室中采集的杜梨新梢中部段、长10~15 cm的插条更适合杜梨嫩枝扦插;IBA对扦插生根的影响大于NAA和IAA,IBA主要影响生根率和平均根数,NAA和IAA主要影响平均根长;基质湿度和基质配比是影响扦插成活的2个重要因素,其中基质湿度对嫩枝扦插的影响大于基质配比。综上,以长10~15 cm的温室杜梨新梢中部段为插条,在100 mg/L IBA+40 mg/L NAA+10 mg/L IAA中浸泡1 h,再插入河沙∶珍珠岩∶草炭土=1∶2∶2的半干湿基质中,扦插生根率可达70%。  相似文献   
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