分泌型Cecropin B 抗菌肽基因转化血橙提高其抗溃疡病水平

 为了利用Cecropin B（CB）抗菌肽基因提高柑橘对溃疡病的抗性,人工合成了两个含有信 号肽的Cecropin B 抗菌肽基因PR1aCB 和AATCB。洋葱表皮瞬时表达分析表明,与非分泌型CB 抗菌肽 相比,PR1aCB 和AATCB 抗菌肽在细胞间隙中优势积累。进一步构建了CaMV 35S 调控 PR1aCB 和AATCB 基因的植物表达载体,转化塔罗科血橙（Citrus sinensis Osbeck）上胚轴,获得转基因植株。GUS 组织化 学染色、PCR 和Southern blot 分析表明外源基因已成功整合入柑橘基因组。Real-time PCR 定量分析表明, 抗菌肽基因在转基因植株中成功表达。柑橘叶片离体抗性分析表明,转PR1aCB 和AATCB 基因植株的抗 性显著强于非转基因植株,其抗性水平与高抗品种‘南丰蜜橘’（C. succosa Hort. Ex Tan）和‘四季橘’ （C. madurensis）相当。     

转Cecropin B抗菌肽基因柑橘对溃疡病的离体抗性评价

本文对转Cecropin B抗菌肽基因的锦橙植株进行了表达检测以及柑橘溃疡病病原菌的接菌实验。分别用喷雾法和针刺法进行离体接菌实验,用Real-time PCR和Southern blot进一步检测分析了在转基因植株中Cecropin B基因的表达、整合情况。结果显示与喷雾法相比,针刺接种处理的离体叶片开始显症时间短,且发病率高,便于统计分析。针刺接种6天后,大部分转基因株系发病率与非转基因植株无显著差异,其中,PR8、PR11、AAT8 和AAT14株系的发病率分别为67%、63%、68%和54%,显著低于非转基因植株。Real-time PCR表达分析结果表明,转基因株系中Cecropin B基因表达量明显高于对照株系。Southern blot结果显示PR8和AAT14株系中转基因为单拷贝, PR11和AAT8株系中转基因分别为两个拷贝和三个拷贝。实验结果表明转Cecropin B抗菌肽基因提高了对柑橘溃疡病的抗性。     

植物诱导抗病基因工程育种研究进展

综述了植物抗病育种中主要功能基因的研究进展及其表达策略,在此基础上评述了诱导性抗病育种的研究进展及其优缺点,并对其今后应用进行了展望。     

鲜食葡萄品种多酚类物质含量及抗氧化活性分析

以6个主要鲜食葡萄品种为试材,利用比色和荧光分光光度法测定葡萄的果皮、果肉、种子和果梗中花青素、总酚和总黄酮含量,分析了清除氧自由基(ORAC)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)和铁离子还原(FRAP)能力与多酚类物质之间的相关性。结果表明:葡萄品种多酚类物质主要以黄酮类化合物为主,其中花青素在果皮以及总酚和总黄酮在种子和果梗中含量较高,但多酚类物质在果肉中最低。葡萄品种‘夏黑’果皮中花青素、总酚和总黄酮含量均高于其它葡萄品种。以‘巨玫’果皮和果肉花青素、总酚和总黄酮含量最高,但‘青提’果皮和果肉中花青素、总酚和总黄酮含量均低于其它葡萄品种。通过分析各葡萄品种抗氧化活性与多酚类物质之间的关系发现,果皮中FRAP和ORAC清除率以及种子和果梗中DPPH·清除率与花青素、总酚及总黄酮之间均呈显著性正相关,且多酚类物质含量较高说明其抗氧化活性较强。