人肝癌细胞系HepG2的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型的建立

本试验旨在建立次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷型的HepG2细胞系,为细胞杂交与单克隆抗体的研究提供亲本细胞。通过N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HepG2细胞突变,逐步提高培养液中6-巯基鸟嘌呤(6-TG)的浓度,筛选出对6-TG有抗性的细胞株,检测它在HAT中生长的情况。得到可在含20 μg/mL 6-TG的高糖DMEM完全培养基中稳定生长的细胞株,此细胞株在HAT培养基中第3天出现明显的死亡,第12天全部死亡,诱变后细胞的染色体分布于32-88,染色体众数为48。突变筛选出的细胞具有对6-TG抗性和对HAT敏感的特性,证实该细胞是HGPRT缺陷型细胞株,为以后进行杂交瘤制备提供了适宜的亲本细胞。     

猞猁3类组织体外培养细胞的生物学特性分析

为研究体外培养猞猁细胞的生物学特性,深入开展猞猁基因组学及濒危野生动物保护工程,本试验获取猞猁不同组织细胞,用α-MEM培养液进行原代、传代培养,并对培养的细胞进行形态学观察、生长特性检测及核型分析。结果表明,猞猁不同组织细胞具有不同的生物学特性;心脏、躯体及睾丸来源的组织块分别在培养5~6、8~9、11~12 d时开始有成纤维样细胞从中长出,而在进行传代时,这3种组织来源的细胞生长速度没有表现出明显的差异,通常在4~5 d可铺满瓶底;核型分析结果表明,体外培养的猞猁细胞染色体数目为2n=38,为19对,其中18对为常染色体,1对为性染色体。上述结果可为今后猞猁不同组织细胞的深入研究提供试验材料和依据,也将为猞猁的细胞系构建提供参考。