Selection and amplification of the liver stem cell subset from rat bone marrow cells with a medium containing cholestatic serum in vitro

AIM: To explore the feasibility of direct separat and selective enlargement of the bone marrow-derived liver stem cells (BDLSC) from bone marrow cells with a culture system containing cholestatic serum in vitro. METHODS: Bone marrow cells of rats were cultured with selective media containing 2%, 5%, 7% and 10% cholestatic rat serum, respectively. The BDLSC were then induced to proliferate with the addition of hepatocyte growth factor (HGF) on the firth day. BDLSC were characterized using immunocytochemistry and RT-PCR for lineage markers, glycogen staining and urea synthetic assay for functions 2 weeks later. RESULTS: Bone marrow cells were unble to form colony in the presence of 2% cholestatic serum and apopotosis appeared gradually in 7% or 10% cholestatic serum. The BDLSC survived in the medium containing 5% cholestatic serum while the other types of cells did not. The survival cells proliferated with a high speed during the second week and then formed hepatocyte-like colony-forming units (H-CFU). Cells in the H-CFU expressed the characteristic proteins of fetal hepatocytes. Furthermore, they had glycogen storage and urea synthesis functions, two of the critical features of hepatocytes. CONCLUSION: The selective micro-environment effectively selected BDLSC from the bone marrow cell, and will be a new way to provide an abundant source of donor hepatocytes for clinical cell therapy.     

水泡性口炎病毒人工感染小白鼠的组织学和免疫组织化学观察

水泡性口炎病毒（VSV）具有广泛的宿主范围，临床血清学调查发现，许多动物表现为血清阳性[1]，可以感染多种试验动物和禽类。感染动物大多数表现为阴性感染和持续性感染，本试验以小白鼠为攻毒对象，探讨VSV在体内的致病作用，进一步了解病毒在机体内的分布及其所引起的组织病理学变化。     

不同轮作模式对稻田土壤肥力和微生物群落结构的影响

为了探索不同水稻轮作模式对稻田土壤微生物群落结构的影响,以及与土壤养分供给的关系,本研究采用高通量测序技术对3种不同轮作模式下（水稻-小麦轮作、水稻-紫云英轮作、水稻-休耕）土壤细菌和真菌的群落结构变化进行分析,并进一步探讨了微生物群落结构与土壤养分含量之间的相互关系。结果表明：水稻-紫云英轮作模式能够明显改善稻田土壤的综合肥力,紫云英连续翻压还田后显著提高了土壤中总氮（TN）和有效氮（AN）的含量。土壤微生物群落结构方面,不同种植模式对细菌群落结构的影响大于真菌。水稻-紫云英轮作模式中优势菌群如酸杆菌门（Acidobacteriota）和子囊菌门（Ascomycota）等的富集有助于促进土壤生态系统的养分循环与生态健康。不同种植模式条件下土壤养分的变化如TN、AN、总钾（TK）及速效钾（AK）等可能是导致土壤细菌和真菌群落结构发生变化的主要驱动因素。稻田土壤中细菌群落结构对于土壤养分变化的敏感性要高于真菌。综合来看,水稻-紫云英轮作模式是更加适合水稻生态可持续栽培的种植模式,能够明显改善稻田土壤的综合肥力和土壤微生态环境。     

胡杨硬枝扦插技术研究

胡杨是我国西北地区优良的防风固沙树种,种子寿命短,实生苗获得困难,因此研究其硬枝扦插技术可为规模化生产提供技术支撑.以胡杨硬枝插条为供试材料,采取纯净水浸泡枝条72 h,再结合IBA、NAA及二者混合溶液分别50、100、150 mg/L浓度处理枝条12 h的方法,研究胡杨硬枝扦插及移栽成活情况,结果表明:不同激素不同...     

轮胎印迹识别及案例分析

轮胎印迹是轮胎在地面上滑动,摩擦生热,使轮胎橡胶产生塑性变形,并产生橡胶微粒,粘附于地面上形成的。事故现场的轮胎印迹分为三种：胎印、擦印和拖印。其中轮胎拖印是事故分析过程中最有价值的资料之一。它不仅反映了事故前后车辆的运动轨迹、轮胎状态、碰撞点的位置和制动措施,而且还可以根据印迹长度和形态分析车辆碰撞分离时刻的速度。     

茭白黑粉菌脉冲电泳分析方法

采用脉冲电泳法对茭白黑粉菌染色体进行核型分析。分析结果表明,茭白黑粉菌脉冲电泳样品处理方法包括原生质体的制备、电泳参数的设置等,对试验结果有一定影响,在制备电泳样品时,包埋的原生质体或孢子的浓度不能太低,蛋白酶K的浓度不能过高,低熔点琼脂糖的浓度不能太低,此外还应确保电泳槽水平,并且电泳结束后及时取出凝胶。     

番茄青枯病抗性两个相关基因功能的初步鉴定

对抗性番茄材料‘Hawaii 7996’分别接种强致病力青枯菌（RsH）和中等致病力青枯菌（RsM）后,利用双向电泳技术找到了两个差异表达蛋白质--谷胱甘肽S转移酶L3和Remorin 1蛋白。在利用携带八氢番茄红素脱氢酶基因PDS的TRV重组病毒载体通过叶片浸润法证明VIGS体系可行后,进一步利用该技术沉默上述两个蛋白质的对应基因GST-L3和Rem-1,并用半定量RT-PCR检测沉默效果。结果表明,分别沉默GST-L3和Rem-1的番茄植株抗性减弱,在接种中等致病力青枯菌（RsM）后青枯病发病率和病情指数都明显高于对照植株,说明基因GST-L3和Rem-1与番茄对青枯病的抗性相关。     

三唑酰草胺在不同类型土壤中的降解特性

为科学评价除草剂三唑酰草胺在土壤环境中的生态风险,采用室内模拟方法,研究了三唑酰草胺在吉林黑土、江西红土和安徽水稻土中的降解特性。结果表明:三唑酰草胺在土壤中的降解符合一级动力学方程。好氧条件下三唑酰草胺在3种土壤中的降解半衰期分别为86.5、106和91.4 d;厌氧条件下半衰期分别为106、130和127 d;水稻田厌氧条件下半衰期分别为162、219和188 d。研究表明,三唑酰草胺在水稻田厌氧条件下的降解速率明显慢于其他2种试验条件下。     

猪胸膜肺炎放线杆菌结构蛋白基因ApxIVA特异性片段的表达和纯化

以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清8型分离株Hpn-405株基因组DNA为模板,PCR方法扩增ApxIVA特异性片段,PCR产物经纯化后与载体pMD18-T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建成重组表达质粒pET-ApxIVA3,转入到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导重组蛋白的表达,SDS-PAGE检测结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为18 ku,与预期片段大小相符;将经过超声破碎的菌液离心取沉淀经尿素洗涤溶解后用镍金属螯合层析柱进行纯化。Western-blot分析证实,该融合蛋白具有免疫学活性。     

旋转式多比例分样方法对作物籽粒分样效果的研究

为验证旋转式多比例分样方法的可行性,探究旋转式多比例分样方法对作物籽粒的分样效果,以谷子、绿豆、大豆和玉米籽粒材料制备成混合样品,在不同转速（0～30.0r/min）处理和不同进样时间（60、90、120s）内比较旋转式多比例分样方法获得1/2、1/4、1/8和1/16子样的代表性和缩分比误差。结果表明,在转速0～30.0r/min和进样时间60～120s的情况下,旋转式多比例分样方法获得子样的分样误差和均无显著差异,且均不高于四分法（CK）。但是,除不旋转（0r/min）处理的1/8四盒和1/16单盒及30r/min处理的1/16单盒子样的缩分比误差显著高于对照外,旋转处理（转速≥7.5r/min）的单盒、双盒或四盒子样的缩分比误差不高于四分法对照。因此,在进行样品前处理的分样工作中应用旋转式多比例分样方法是可行的,应设置转速≥7.5r/min,取相对2个扇盒或十字相对4个扇盒形成的子样。