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为筛选纳米铜对大鼠(Rattus norvegicus)肝脏毒性的差异蛋白,探讨其毒性作用机制,本研究应用双向电泳(two dimensional gel electro-phoresis,2-DE)和质谱等蛋白质组学方法,分离和鉴定肝毒性相关差异蛋白,并利用荧光定量PCR验证和生物信息学分析。结果共筛选到显著差异表达的蛋白斑点共43个,其中下调的一个差异蛋白点1006被鉴定为磷脂酰乙醇胺结合蛋白1(phosphatidy lethanolamine-binding protein 1,PEBP1);荧光定量PCR验证与双向电泳结果一致。PEBP1蛋白的生物信息学分析表明其性质稳定,不存在信号肽,定位于细胞质,可能属于非分泌性蛋白,含磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族信号位点64YTLVLTDPDAPSRKDPKFREWHH86;主要二级结构元件为无规则卷曲和延伸链。同源性分析表明,大鼠PEBP1蛋白与其他9个物种有较高同源性,并构建了PEBP1蛋白的系统进化树。中毒组大鼠肝脏PEBP1蛋白表达下调,导致肝细胞线粒体功能障碍,可能是纳米铜发挥毒性作用的途径之一。 相似文献
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蹄叶炎奶牛血浆蛋白质组学2-DE图谱的构建及分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采集患病牛和健康牛血浆,用人白蛋白和IgG抗体去除其高丰度蛋白后,通过双向凝脉电泳(Two dimension-al gel electrophoresis,2-DE)技术和PDQuest分析软件比较2组间血浆蛋白组表达差异.结果显示,蹄叶炎奶牛血浆2-DE图谱中有39个蛋白斑点表达上调,23个蛋白斑点表达下调,共检测到62个差异蛋白点.结果表明,奶牛发生蹄叶炎时,其血浆蛋白组表达模式发生了改变,这种改变可能与蹄叶炎的发病机制密切相关. 相似文献
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根据已发表的牛Bac5 mRNA序列设计1对特异性引物,进行RT-PCR扩增,将目的片段定向克隆到原核表达载体PET28a(+),构建原核重组表达质粒PET28a-Bac5,并转化大肠杆菌Rosetta,进行IPTG诱导和SDS-PAGE检测.结果表明:采用RT-PCR技术成功扩增出414bp去信号肽的Bac5基因片段,重组蛋白经ZPTG诱导和SDS-PAGE检测发现,在19ku附近有1条清晰蛋白条带,与理论预测值大小一致;对表达的Bac5重组蛋白(rBac5)处理后进行抑菌活性的初步鉴定结果表明,rBac5对大肠杆菌(CVCC1450)和金黄色葡萄球菌(CVCC545)2种标准菌株和乳房炎乳的3种常见分离菌株均有一定的抑菌活性. 相似文献
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奶牛蹄叶炎与血液生理生化指标的相关性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究奶牛蹄叶炎与其血液生理生化指标的相关性,采集健康组奶牛15头和蹄叶炎患病组奶牛36头的血样,检测其生理生化指标。结果:患病组奶牛血浆中生化指标总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量和健康组相比有显著差异(P<0.05);而2组间奶牛血液生理指标和其他生化指标均无显著性差异(P>0.05)。表明奶牛发生蹄叶炎可能与脂质代谢紊乱有密切关系,TC和HDL-C可作为蹄叶炎发病监测的候选指标,并建议通过调节奶牛的脂质代谢平衡来防治蹄叶炎。 相似文献