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通过计算机软件筛选出绵羊痘病毒基因组中心编码区的ORF90核蛋白、ORF112融合蛋白、ORF117糖蛋白、ORF55膜蛋白和基因组末端的ORF134宿主范围相关基因的6段T、B细胞优势抗原表位,以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头,串联合成1条全新的多表位嵌合基因mE,将其克隆到原核表达载体pET-32中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建pET32-mE质粒;用IPTG在不同条件下诱导表达,确定最佳表达条件,表达产物经SDS-PAGE分析。结果表明,重组蛋白是分子质量为41ku的融合蛋白。在IPTG浓度为0.5mmol/L,温度为37℃、诱导4h时目的蛋白的表达量最大,约占菌体的32%。Western-blotting试验表明,目的蛋白可被羊痘血清识别。 相似文献
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羊痘病毒分子特征及检测方法研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
羊痘是以发热、全身性的皮肤损伤、痘疹和淋巴结病变为特征的一种传染性高、病死率高、分布广泛的烈性羊病毒病,是所有动物痘病毒中最为重要的一种,严重影响养羊业和国际贸易的发展。目前,国内外对羊痘的研究主要涉及病原学、诊断技术和基因工程疫苗等方面。 相似文献
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牛海绵状脑病研究概况 总被引:1,自引:0,他引:1
牛海绵状脑病研究概况康文彪李元新董碧兰陈轶霞(甘肃省畜牧兽医研究所平凉744000)(甘肃省兽医技术推广总站)牛海绵状脑病(BSE)是一种与不明可传播媒介有关的疾病。因其临床上以神经症状为主,故俗称“疯牛病”。又因该病与羊的瘙痒病相似,曾经有人称之为... 相似文献
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自20世纪80年代以来,在甘肃省陇东地区的西峰、合水、庆城、华池、镇原等县(区)的牛群中,相继发生一种以犊牛双目失明为主要症状的疫病。开始呈零星散发,但从1998年春季开始发病数量逐渐增加,流行范围不断扩大。因病因不明,故当地农民根据症状叫做犊牛瞎眼病。我们从2000年1月至2003年通过流行病学调查、实验室诊断、病理剖检等方面深入细致的工作,证实该病是食用黄花菜根引起的萱草根素(Hemerocallin)中毒。我们采集病牛眼球和人工复制病牛的眼球、肾、肝、心、脑组织送甘肃农业大学进行了病理组织学检查及现场病理剖检观察。 相似文献
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【目的】对绵羊痘病毒甘肃古浪株RING finger蛋白的基因进行克隆,表达以及序列分析,初步探究绵羊痘病毒RING finger蛋白是否具有E3泛素连接酶活性,为阐明其在绵羊痘病毒感染过程中对泛素蛋白酶体系统的调控作用奠定基础.【方法】以绵羊痘病毒甘肃古浪株DNA为模板,通过PCR扩增RING finger基因.利用Pfam数据库、DNAstar等软件进行序列及遗传进化分析;将RING finger基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建pGEX-SPPVRFP重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并进行SDS-PAGA和Western-blot分析.【结果】绵羊痘病毒RING finger基因由723个核苷酸组成,编码的240个氨基酸的分子量约为28.5 ku,具有RING finger结构域.不同羊痘病毒株间RING finger基因核苷酸序列同源性高达99.2%,氨基酸序列同源性高达98.3%.不同的RING finger蛋白都含有8个保守的半胱氨酸和组氨酸.SDS-PAGA分析显示,重组SPPVRFP大小约为55 ku,Western-blot分析显示,重组SPPVRFP不能与绵羊痘病毒阳性血清反应.【结论】成功克隆、表达并纯化了绵羊痘病毒RING finger基因,对SPPV GS-GL株RING-finger蛋白进行序列分析,推测其可能具有E3泛素连接酶活性. 相似文献
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选取GenBank上4株不同绵羊痘毒株ORF121基因序列,采用DNASTAR软件对该基因序列进行同源性分析,并以B细胞表位分析参数及蛋白质二级结构分析数据,综合预测ORF121蛋白B细胞表位。结果表明:4株不同绵羊痘毒株ORF121基因核苷酸序列的同源性为99%;在ORF121蛋白的肽链中,35~46、76~82、160~167区段亲水性强,35~45、54~83、90~124、130~139、144~158和160~167区段柔韧性好,37~45、112~116、129~137和143~167区段抗原指数高,33~45、78~83和159~167区段表面可及性高,30~57和151~170区段可形成一定的空间构象。结果说明ORF121基因在不同的绵羊痘病毒流行株之间非常保守,ORF121蛋白35~45、160~167区段可能是B细胞表位优势区,具有潜在的疫苗或/和诊断价值。 相似文献
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IB一度成为鸡继新城疫后的主要传染病之一 ,并且因为传染性支气管炎病毒 (IBV)能引起鸡的呼吸道型、肾型、腺胃型等病变 ,血清型众多 ,相互之间交叉免疫性差 ,给本病的防治带来了很大困难。珍珠鸡抵抗力较强 ,传染病的发生比鸡、山鸡少而轻 ,但养殖者往往过高估计了珍珠鸡的抵抗力 ,对其采取的免疫等预防措施不够 ,导致了一定的损失。本文报道 3起珍珠鸡IB疫情的发病与诊断情况 ,以引起广大养殖者的重视。1 发病情况与解剖变化2 0 0 0年 5月 ,兰州市红古区某珍珠鸡养殖场饲养的 110 0只珍珠鸡发病 ,其中 1月龄 60 0只 (A1群 ) ,2月龄 5… 相似文献