谷胱甘肽、咖啡因、染料木黄酮及其组合对牛冷冻精液精子运动性和体外受精的影响

为了探究还原型谷胱甘肽(GSH)、咖啡因(caffeine)和染料木黄酮(genistein)及其组合对牛冷冻精液解冻后精子运动能力和体外受精后早期胚胎发育的影响,将精液解冻后用分别添加不同组合GSH、caffeine和genistein的Sp-TALP和Fert-TALP培养基处理,2h后用计算机精子辅助分析(CASA)系统分析精子运动参数;并在受精滴中分别添加不同组合的GSH、caffeine和genistein,统计卵裂率、桑椹胚发育率和囊胚发育率。结果表明:(1)SpTALP培养基中添加5mM GSH+5mM caffeine,精子活率(TM)、平均曲线速度(VCL)以及平均鞭打频率(BCF)均显著高于10μM genistein+5 mM caffeine(P0.05)。(2)FertTALP培养基中添加5 mM GSH+5 mM caffeine和10μM genistein,直线运动精子活率(PM)均显著高于对照组(P0.05);同时5mM GSH+5mM caffeine也显著提高了精子运动参数VCL、BCF以及平均移动角度(MAD)(P0.05)。(3)在Fert-TALP培养基中添加5mM GSH+5mM caffeine,与Sp-TALP培养基相比,精子的VCL显著增加(P0.05),直线性(LIN)、摆动性(WOB)以及非前向运动(C级)精子百分率均显著降低(P0.05)。(4)受精滴中添加5mM GSH+5mM caffeine以及10μM genistein,卵裂率和桑椹胚发育率与对照组相比有较大幅度的提高,但差异不显著(P0.05)。10μM genistein处理组的囊胚发育率最高,但与对照组差异不显著(P0.05)。因此,10μM genistein或5mM caffeine+5mM GSH处理冻精,可以改善牛冷冻精子运动性和生存能力,并轻微促进体外胚胎的发育。     

妊娠失败水牛血常规分析

[目的]通过分析空怀水牛血常规数据,从血液生理变化层面探讨水牛人工授精后早期妊娠失败的原因。[方法]采集14头摩拉水牛人工授精后0d、18d、20d、23d和28d血液样本,利用全自动血液细胞分析仪进行血常规检测。于人工授精后的42d进行直肠检查和B超诊断,对确诊为空怀的摩拉水牛血液参数进行统计分析。[结果]人工授精后0d和18d白细胞(WBC)参数均在正常值范围或接近正常值。20d、23d和28d白细胞数显著高于0d(P0.05),并且超出正常值范围;其中,18d和20d嗜中性粒细胞绝对值(NEU)及其比例显著低于0d(P0.05),18d~28d淋巴细胞绝对值(LYM)及其比例均高于0d。与0d相比,18d及之后,红细胞数(RBC)和红细胞压积(HCT)均极显著下降(P0.01),但红细胞平均体积(MCV)和红细胞分布宽度变异数(RDW)均极显著上升(P0.01)。[结论]妊娠失败摩拉水牛中淋巴细胞及其比例上升是导致外周血白细胞数显著上升的主要原因;妊娠失败一方面与胚胎发育早期母体较弱的免疫耐受/妊娠识别能力有关,另一方面,人工授精后牛群的贫血体况也提示有必要进一步加强对与配母牛的繁殖管理。