玻璃化冷冻对小鼠卵母细胞透明带超微结构变化及体外受精效果的影响

本实验采用OPS法玻璃化冷冻小鼠卵母细胞,通过扫描电镜观察透明带表面物理特性的变化。旨在研究冷冻导致小鼠卵母细胞透明带表面超微结构的变化以及冷冻卵母细胞体外受精后胚胎发育率和精子穿透透明带能力的影响。结果表明:冷冻后透明带表面网状结构消退或消失,发生熔融样变化。冷冻组中A型透明带比例(57.14%)显著低于毒性实验组(79.32%)及对照组(81.25%)(P<0.05),而发生熔融样变化的比例显著高于其他两组(P<0.05)。体外受精后,冷冻组的卵裂率和囊胚发育率(60.90%,39.51%)均显著低于毒性实验组及对照组(81.74%,55.72%;87.47%,61.63%)。体外受精4 h,冷冻组透明带平均结合精子数(10.56)与毒性实验组和对照组(10.26,10.21)间均无显著性差异(P>0.05);但受精后对透明带消化处理发现,冷冻组紧密结合精子的平均个数(3.28)与其他两组(5.11,5.21)存在显著性差异(P<0.05)。结果显示,冷冻导致透明带表面物理特性的变化,进而造成受精率下降。     

不同浓度紫杉醇预处理对绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存效果的影响

细胞骨架系统的稳定对于提高卵母细胞或胚胎冷冻后的存活率及其发育能力具有重要作用。紫杉醇(Taxol)作为细胞骨架稳定剂,可增强α、β-微管蛋白二聚体的紧密联系,增大微管交联,促进微管聚合和稳定。本实验以绵羊体外成熟卵母细胞为材料,旨在探讨紫杉醇预处理对玻璃化冷冻绵羊卵母细胞存活率、形态正常率及体外受精后胚胎发育率的影响。采用0、0.5、1.0、1.5μmol/L的紫杉醇预处理绵羊卵母细胞并进行玻璃化冷冻保存,未经处理的新鲜卵母细胞为对照组。结果表明:采用浓度为0.5μmol/L紫杉醇预处理绵羊卵母细胞冷冻保存效果最佳,其解冻后的存活率(82.38%)与其他3个试验组相比有显著差异性(P0.05);体外受精卵裂率(51.17%)和桑囊胚率(20.30%)也显著高于其他3个试验组(P0.05),但低于对照组(69.42%,34.77%)(P0.05)。由此可见,以0.5μmol/L浓度的紫杉醇预处理组绵羊体外成熟卵母细胞冷冻后能获得较好的效果。