不同动物髓样分化因子88基因的功能研究及应用

髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)作为Toll样受体信号通路中的关键转接分子,在多种疾病的发生和免疫调控中发挥重要作用。论文就Toll样受体信号通路中MyD88的结构、表达、免疫调控功能、单核苷酸多态性位点、与动物肠道疾病发病机制研究的相关性及其应用进行综述。     

COVID-19病毒N基因在昆虫细胞内的表达

为获得具有和天然蛋白质类似功能与活性的COVID-19核衣壳蛋白并应用于实际检测中,首先根据Bac-to-bac昆虫表达系统和人工合成的COVID-19核衣壳蛋白(N蛋白)序列,将pFastBac^TMHTB载体上的酶切位点BamHⅠ和XbaⅠ分别加入上下游引物,利用PCR技术对N基因进行扩增,先后连接T-Vector pMD19(simple)载体与pFastBac^TMHTB载体,并获得重组质粒pMD19-T(simple)-COV19-N和pFastBac^TMHTB-COV19-N,最终在DH10Bac细胞中构建重组杆粒DH10Bac-pFastBac^TMHTB-COV19-N并使其在昆虫细胞Sf9内进行表达,获得重组蛋白后进行SDS-PAGE和WB分析。通过PCR方法成功扩增N基因,构建的重组质粒pMD19-T(simple)-COV19-N经PCR和双酶切鉴定均证明正确,在DH10Bac细胞内构建的重组杆粒DH10Bac-pFastBac^TMHTB-COV19-N通过PC...     

红嘴鸥TLR7基因克隆与生物信息学分析

【目的】克隆野生鸟类红嘴鸥Toll样受体7(TLR7)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学分析,为后期TLR7蛋白的抗病毒活性研究做准备。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)扩增红嘴鸥TLR7基因全序列,通过生物信息学软件分析TLR7基因序列、稀有密码子、相似性及其编码蛋白的理化性质、跨膜区域、信号肽、N-糖基化位点、磷酸化位点和亚细胞定位,分别利用SOPMA和SWISS-MODEL软件预测TLR7蛋白的二级结构和三级结构。【结果】试验成功克隆红嘴鸥TLR7基因(GenBank登录号:MZ668652),全长1 720 bp,开放阅读框(ORF)大小为1 182 bp,存在39个稀有密码子,其中含8个连续稀有密码子,编码393个氨基酸;红嘴鸥TLR7基因与GenBank中原鸡、红腹角雉、鹌鹑、绿头鸭、黑天鹅、山雀、白鹭、帝企鹅、红喉潜鸟和巴布亚企鹅的TLR7基因相似性分别为85.7%、84.9%、85.4%、87.0%、87.8%、86.8%、91.0%、93.1%、93.1%和93.1%。系统进化树结果显示...     

不同动物TLR7基因研究概况

Toll样受体是调控机体免疫反应的一类重要模式识别受体,不仅能识别病原微生物调控免疫应答反应,启动固有免疫机制,其引发的信号通路还能引起适应性免疫反应的活化。其中Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)参与抗病毒免疫反应,在天然免疫中起重要作用。论文就TLR7基因的发现、不同动物单核苷酸多态性(SNP)分析、免疫调控作用研究、不同动物TLR7基因参与抗病毒作用及展望进行综述。     

流行性出血病病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒的研制

为研制流行性出血病病毒（epidemic hemorrhagic disease virus，EHDV）ELISA 抗体检测试剂盒，用饱和硫酸铵浓缩EHDV灭活病毒作为包被抗原，以EHDV鼠源单克隆抗体作为阻断抗体，商品化的IgG-HRP羊抗鼠二抗作为检测抗体，通过优化检测试剂中各组分含量和反应程序，建立了一种EHDV阻断ELISA抗体检测方法。用研制的试剂盒与ID Screen参考试剂盒分别检测实验室保存的血清样本，结果发现该方法的特异性、敏感性与ID Screen参考试剂盒一致，二者符合率为97.00%。结果表明，研制的EHDV阻断ELISA抗体检测试剂盒可作为EHDV抗体检测的候选试剂盒，代替国外试剂盒使用，从而降低EHDV检测成本，这对该病防控具有重要意义。     

蓝舌病病毒血清8型定性传入风险评估

2006年8月荷兰暴发的蓝舌病8型(BTV-8)疫情已蔓延至欧洲大陆,而国内目前尚未发现BTV-8感染的报道.为评估BTV-8传入国内的风险,采用定性评估方法,通过收集BTV-8疫源地国家的疫情信息数据,结合其病原学特征、传播媒介、分布及流行情况、传染源、传播途径和易感动物等方面的研究内容进行传入风险分析.鉴于我国与欧...     

蓝舌病在全球的流行及分布

蓝舌病（bluetongue,BT）是由蓝舌病病毒（bluetongue virus,BTV）引起的一种烈性传染病,主要通过易感动物移动、易感动物聚集、病毒基因重配以及强大的传播媒介等4个因素在全球长时期传播流行。自20世纪初发现BT以来,BT持续在全球流行,欧洲是重灾区;BTV血清型复杂,全球各大洲均有多种血清型分布流行,目前已陆续鉴定出29个BTV血清型。进入21世纪后,受全球气候变暖、畜产品贸易等因素影响,BT全球流行范围继续扩大。面对严峻的BT流行形势,需要采取加强进出口检疫和易感动物流动监管,建设无规定动物疫病生物安全隔离区,以及实施有效的预防接种制度等综合措施。     

流行性出血病的全球流行及分布

流行性出血病（EHD）是由流行性出血病病毒（EHDV）引起的，经库蠓属媒介昆虫传播的非接触性传染病。根据世界动物卫生组织（WOAH）通报及相关文献报道，EHDV已在美洲、非洲、大洋洲、亚洲流行传播，流行范围逐渐扩大；欧洲虽尚未报告EHDV感染病例，但地中海周边亚非国家暴发的EHD疫情，对欧洲构成了较高的入侵风险。本文根据文献记载以及WOAH统计信息，综述了EHDV的病原学特征及其全球流行分布状况，据此提出了EHDV宿主规模逐渐扩大、传播方式发生变化、病毒基因发生重配、人为因素促进病毒变异、气候变化引起传播媒介活跃等风险因素。基于EHDV全球流行传播情况，针对性提出了我国防控EHD的建议，以期为有效防范EHD传入提供借鉴。