畜禽规模化养殖主要病原菌耐药性检测及控制技术研究进展

随着畜禽规模化养殖业的发展,大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、巴氏杆菌等已成为畜禽规模化养殖场的主要病原菌,由这些病原菌引起的疾病已成为畜禽规模化养殖中的常见多发病.国内外研究表明,由于抗生素的不合理使用,使主要病原菌产生了严重的耐药性.在美国,1995年约有90%的金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素耐药.Vasil-M(斯洛伐克)(1998)研究发现葡萄球菌对青霉素的耐药率为31.3%,大肠杆菌对土霉素的耐药率为26.1%.……     

郎德鹅巴氏杆菌病的诊治

鹅巴氏杆菌病又称鹅出败或鹅霍乱,是由禽多杀性巴氏杆菌引起的一种急性败血性传染病。该病各种年龄的鹅均能感染,但雏鹅和青年鹅多发,成年鹅发病较少。该病往往散发。本病分急性型和慢性型两种:急性型表现为败血症,发病率和死亡率很高;慢性型表现为呼吸道炎、关节炎。1发病情况某郎德鹅养殖专业户于2002年10月引进了1300只郎德鹅种鹅。2003年初,种鹅开始产蛋并先后成功孵化出3000多只小鹅。此前,鹅群一直比较健康,但当第一批小鹅长到60～70日龄时开始发病。发病鹅精神不振,极度消瘦,病程较长。接着,种鹅和30～40日龄的小鹅也开始发病,特别是…     

鸡传染性支气管炎病毒（IBV）的血清学分型研究

本文动用气管环血清中和试验对１２个ＩＢＶ毒株进行了血清研究。以气管环纤毛运动为指示系统，以能中和２．０ｌｏｇ１０ＣＤ５０同源病毒血清效价为１个抗体单位，含２０个抗体单位的血清与等量病毒作用测定血清对纤毛运动保护百分率，以欧氏距离数字分类分型，并用ＳＰＳＳ软件聚类分型分析。     

禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达

根据GenBank已公布的传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)株S1基因序列及pPIC9K表达载体序列,设计1对IBV S1基因表达片段的PCR引物,用RT-PCR方法扩增出长度为1 566 bp IBV S1基因表达片段,5′端不含信号肽序列,3′端添加了终止密码子。用限制性内切酶SnaB和Not将S1基因和载体pPIC9K酶切回收后连接,构建了重组表达载体pPIC9K-S1。用限制性内切酶Bgl将表达质粒pPIC9K-S1线性化,然后用电转化的方法导入毕赤酵母GS115,在MD平板上生长的转化子经过PCR鉴定和表型筛选后,获得了整合型阳性重组菌株GS115/pPIC9K-S1 His Muts。将重组菌株在1%甲醇中进行诱导分泌表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,IBV S1基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的分子量约为76 000,能与IBV阳性血清特异性结合,表达的蛋白占上清中总蛋白量的12.5%。     

大熊猫源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性检测

本试验在对从四川卧龙大熊猫研究中心和雅安碧峰峡野生动物园的圈养大熊猫肠道大肠杆菌分离鉴定的基础上,对其耐药性进行了检测与分析,为本地区采用高效低残留的抗生素治疗大熊猫大肠杆菌病提供依据.     

猪源致病性沙门氏菌耐药基因的分析

采用平板稀释法，选用氨基糖苷类、四环素类、磺胺类和氯霉素类4大类抗生素的11种药物，对30株猪源致病性沙门氏菌进行了药敏试验，结果有28株菌（93．3％）至少对一种药物有耐药性；对四环素、强力霉素、磺胺甲基异口恶唑、复方新诺明、链霉素、卡那霉索和氯霉素有耐药性的菌株较普遍，在所有菌株中占比例分别为83．3％、80％、80％、76．7％、60％、56．7％和56．7％。设计了25对引物，对耐药基因进行了扩增及序列测定，结果扩增到13种耐药基因，与GenBank中的相应基因有很高的同源性（≥98．1％）。30株猪源致病性沙门氏菌中至少含有一种耐药基因的菌株有28株（93．3％），sul1、aph（3′）-Ⅱa、tetC、Catl、tetA和aadAl耐药基因较为普遍，检出率分别为76．7％、60％、60％、43．3％、40％和36．7％。药敏试验结果与耐药基因检测结果有很高的一致性（≥88％）。     

传染性支气管炎病毒结构蛋白免疫鸡对CD4+CD8+T淋巴细胞亚群的影响

为了比较传染性支气管炎病毒3种主要结构蛋白免疫鸡后对CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的不同影响.本试验以pVAX1载体为携带工具,制备分别含有IBV主要结构蛋白基因的质粒免疫健康雏鸡,采用流式细胞仪(FACS)对免疫鸡外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数进行检测.结果显示:各试验组间,携带N蛋白基因的质粒在免疫后3周内CD4+T淋巴细胞数和CD8+T淋巴细胞数均高于其他组,且差异极显著(P＜0.01).由此可见,IBV的N蛋白可明显诱导CD8+T淋巴细胞的CTL免疫作用和CD4+T淋巴细胞的辅助性免疫作用,其细胞免疫原性高于S1蛋白和M蛋白.     

大肠杆菌β-内酰胺酶耐药基因blaTEM,blaSHV,blaCTX-M三重PCR检测方法建立

本研究以我国大肠杆菌中常见的3种β-内酰胺酶耐药基因(bla,TEM blasHV和blaCTX-M)作为目的基因,设计3对特异性引物,建立了blaTEM,bla SHV和blaCTX-M耐药基因三重PCR检测方法.三重PCR反应体系为:10×PCR缓冲液2.5 μL,MgCl2(25 mmol/L) 2.5 μL,dNTP (2.5 mmol/L)4 μL,blaTEM,blasHV和blaCTX-M上下游引物(25 μmol/L)分别为0.25 μL、0.5 μL、1.0μL,Taq DNA聚合酶(2.5 U/μL)0.4μL,模板2.5μL,反应总体积为25 μL.反应参数为:94℃5 min,94℃50 s,55℃55 s,72℃1 min,32个循环,72℃延伸5 min.本方法的建立为大肠杆菌中β-内酰胺酶耐药基因的快速检测及分子流行病学调查提供了新的手段.     

苹果矮化砧木新品种‘Sc5’

‘Sc5’是由‘黄海棠’与‘SH5’杂交选育的苹果矮化砧木新品种。树冠较小,树势中庸,节间长2.1 cm。嫁接‘红富士’盛果期树高3.27m,冠径2.83m;树体嫁接口生长平滑,无气生根,嫁接品种与矮化中间砧干周比为0.97。嫁接‘长富2号’第2年结果株率65.3%,第5年进入盛果期,6～9年生树产量43 290～57 330 kg·hm^-2,果实可溶性固形物含量16.8%,果肉硬度9.34 kg·cm^-2。该砧木矮化性与‘M26’相似,抗寒性优于‘M26’,适宜于黄土高原或类似气候地区栽培。     

"自杀性"DNA疫苗研究进展

DNA疫苗作为第三代全新的疫苗,具有传统疫苗和其他基因工程苗不可比拟的优点.但由于其安全性方面存在着一些尚待解决的问题,使得实际应用受到限制."自杀性"DNA疫苗是基于常规的DNA疫苗和自主复制型RNA疫苗而发展起来的一种新型疫苗.由于其制备原理和过程与常规DNA疫苗相类似,所以它具备常规DNA疫苗在制作、运输储存以及免疫等各方面的优点.同时由于它以甲病毒复制子为基础能诱导转染细胞自主凋亡,故比常规DNA疫苗更为安全有效.文章针对"自杀性"DNA疫苗载体的构建、作用机理、优点以及国内外研究情况作一介绍.