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通过BLAST比较已公布的鸭坦布苏病毒核酸序列,在其E基因保守区域设计了4对引物,并用鸭坦布苏病毒培养物核酸筛选出最佳的一对引物建立了SYBR Green qPCR。用构建的重组质粒建立标准曲线,扩增效率为90.5%,在2.0×10~1~2.0×10~8copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低检测限为100拷贝/反应。该qPCR方法可以检测5个鸭坦布苏病毒分离株以及WF100活疫苗,灵敏性比文献已发表的其他3对引物高10倍;且特异性很好,不与其他常见禽类病毒交叉反应。由此表明本研究新建了一种高度灵敏和特异的鸭坦布苏病毒的SYBR Green qPCR检测方法。 相似文献
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肌动蛋白解聚因子通过切断微丝,增加G-actin的浓度,从而促进细胞骨架的重组,影响细胞的迁移、增殖、凋亡等重要的生理功能.文章通过原位杂交技术在小鼠卵巢组织切片中观察到Cofilin的mRNA在卵母细胞中存在强表达,应用免疫荧光技术检测到Cofilin蛋白主要定位于GV期卵母细胞核内染色体附近,从而推测Cofilin可能与卵母细胞中染色质的凝集、移动及其他功能有关,参与调节哺乳动物卵母细胞的发育. 相似文献
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