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以纯化的大肠埃希菌K99菌毛蛋白为包被抗原,建立检测大肠埃希氏菌K99 Ig G抗体的间接ELISA方法。确定间接ELISA的最适反应条件,即抗原包被的ELISA板4℃过夜,最适抗原包被浓度为4.94μg·m L-1,兔抗体稀释倍数为1:50,猪抗体稀释倍数为1:200,确定最佳封闭液为100 g·L-1脱脂奶粉,最佳封闭时间为0.5 h,血清反应时间为1 h,二抗最适浓度梯度为1:2000,反应时间为37℃0.5 h,底物室温反应时间为37℃10 min,阴阳性临界值兔血清为0.25、猪血清为0.35。试验证实该间接PPA-ELISA方法的特异性强、敏感性高、重复性好,可以为疫苗效力检验和流行病学调查提供参考方法。 相似文献
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新城疫病毒感染绵羊诱导免疫应答反应的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为探索新城疫病毒(NDV)作为羊病毒病疫苗载体的可行性,验证NDV感染绵羊的可能性,本研究采用NDV Clone-30株分别通过滴鼻和气管灌注两种途径接种绵羊,接种后观察临床症状,检测接种动物排毒情况,通过血凝抑制试验检测接种绵羊特异性血凝抑制抗体,ELISA试验检测接种绵羊血清特异性IgG抗体,微量中和试验检测接种绵羊血清中和抗体.研究结果表明,NDV在绵羊体内是非致病性的,并且通过两种接种途径在绵羊体内均可以产生血凝抑制抗体、NDV特异性IgG抗体和中和抗体反应.本研究结果表明NDV有可能作为宿主限制性疫苗载体用于预防无特效疫苗的羊类疾病,且与气管灌注接种途径比,滴鼻接种途径相对安全. 相似文献
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于2011年1月至2012年7月,自山东省潍坊、临沂、淄博、滨州等部分地区送检114份病死兔病例中,经细菌分离鉴定,共分离到45株大肠杆菌。对上述大肠杆菌发病病例及发病日龄分析发现,1~3月龄发病数量占到64.4%;通过对其他病原的分离鉴定发现,不同病例存在球虫、魏氏梭菌、巴氏杆菌、波氏杆菌、链球菌、兔瘟等混合感染问题,混合感染病例占总病例近50%;对分离菌进行了药敏试验,发现其存在不同程度的耐药情况,其中对复方新诺明耐药性高达95.6%,对环丙沙星、阿莫西林、庆大霉素、新霉素的耐药性比率超过60%,而且二重耐药、多重耐药的情况较为普遍。 相似文献
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猪附红细胞体病研究进展 总被引:4,自引:2,他引:2
根据国内猪附红细胞体病最新的研究进展及临床诊治,作者主要从病原学、发病机理、流行病学、临床症状、病理变化、诊断和防治等方面对该病的研究现状进行了综述,为今后的研究提供理论依据。 相似文献
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谷氨酸脱氢酶(GDH)在猪链球菌35个血清型中都存在,是一种具有免疫原性的保护性抗原。本试验PCR扩增出GDH基因,酶切定向插入pET-32a中构建表达载体pET-32a-GDH,将其转化E.coli BL21(DE3)表达菌中,培养并诱导表达rGDH蛋白,产物纯化后免疫新西兰白兔,免疫攻毒保护试验检验该蛋白的免疫原性。PCR试验获得约1 300 bp的GDH基因,双酶切pET-32a-GDH表达载体获得5.4和1.3 kb的片段,IPTG诱导表达获得融合蛋白,免疫保护结果达到70%。结果表明,本试验成功构建表达猪链球菌GDH蛋白的原核表达载体pET-32a-GDH,rGDH蛋白以蜂胶为佐剂免疫模型动物后,免疫保护率达到70%,为猪链球菌亚单位疫苗的研制提供了技术支持。 相似文献
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