丹参多糖对氟苯尼考处理的雏鸡肝脏中PPAR信号通路的调节作用

将120只雏鸡随机平均分为空白对照组、氟苯尼考(florfenicol, FFC)组和FFC+丹参多糖(Salvia miltiorrhiza polysaccharides, SMPs)组。从1日龄起,连续给药5 d。于第6天采取肝脏样品,进行转录组和蛋白组测序;采集和制备血清样品,保存剩余肝组织,用于检测其他相关的试验指标。采用qPCR和PRM的方法验证测序结果。测序和验证结果显示,暴露于FFC之后,雏鸡肝脏中1 989个基因和917个蛋白质发生了显著变化。这些显著改变了的基因和蛋白与对刺激的反应、异生物质的代谢与氧化解毒等生物功能有关。FFC显著改变了PPAR信号通路中的13个基因和18个蛋白,SMPs的干预则调整了其中的7个显著差异基因和8个显著差异蛋白的表达水平。此外,FFC还显著地提高了雏鸡血清中AST和ALT的含量,降低了肝脏中TG、TC和ANDP的含量。SMPs则有效逆转了以上因子的变化趋势。结果表明,FFC改变了PPAR信号通路关键因子的表达水平,进而造成了雏鸡肝脏的脂质代谢紊乱。SMPs则通过进一步调控该通路,在一定程度上改善了雏鸡肝脏的脂质代谢紊乱,进而维护了肝脏...     

基于网络药理学和分子对接探究芪芝口服液提高家禽免疫功能的作用机制

试验旨在探究芪芝口服液提高家禽免疫功能的作用机制。采用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）收集该复方中黄芪和灵芝2味药材的活性成分及其作用靶点,并与OMIM、TTD和GeneCards数据库收集免疫的靶点进行交集,获得芪芝口服液作用于家禽免疫的潜在靶点。运用Cytoscape 3.9.1软件构建中药-成分-靶点-通路-疾病网络图和蛋白质相互作用（PPI）网络,并对靶点进行GO富集和KEGG通路分析。使用分子对接技术进行活性成分和核心靶点的分子对接验证。结果显示,芪芝口服液30个成分对应66个靶点,家禽免疫329个靶点,其中交集靶点17个,PPI核心靶点包括核因子κB抑制因子α (NFKBIA)、白细胞介素-6 (IL-6)和干扰素-γ(IFNG)等。GO功能富集共有38条结果,包括33个生物过程条目、4个分子功能条目和1个细胞成分条目;KEGG通路分析显示交集基因主要富集于C型凝集素受体信号通路、FoxO信号通路和Toll样受体等信号通路。分子对接结果显示,关键成分与核心蛋白靶点有较好的结合活性,证明了网络药理学预测结果的可靠性。研究表明,芪芝口服液可通过多成分、多靶点、多通路...     

基于Box-Behnken设计-响应面法优化改良葛根芩连汤提取工艺研究

优化和评价改良葛根芩连汤的提取工艺,为提高其临床适用性以及开发新兽药奠定基础。采用Box-Behnken设计-响应面法,以葛根素含量为评价指标,对提取次数、煎煮时间、加水量3个影响因素进行考察,并对响应面条件下17批样品进行定量分析,得出各因素对葛根素提取率的影响程度。通过Box-Behnken中心组和设计建立数学模型分析回归模型方差以及响应面曲面图,获得改良葛根芩连汤最佳提取工艺为：提取3次,提取时间2 h,加水量9倍。通过工艺验证测得葛根素含量平均值为0.810 8 mg/mL,与预测值0.811 0 mg/mL接近。优化的改良葛根芩连汤最佳提取工艺特征有效成分溶出率高,稳定可行,可为该复方制剂的进一步研究提供理论依据。     

麻黄配方颗粒提取工艺优化及质量标准的建立

为优化麻黄配方颗粒提取工艺，并且建立其质量标准，以出膏率、麻黄碱和伪麻黄碱总生物碱含量为响应值，选取提取次数、提取时间、加水量为影响因素，在单因素试验的基础上，通过Box-Behnken响应面法优化提取工艺，以TLC法进行定性鉴别，采用HPLC法测定麻黄碱、伪麻黄碱的含量。结果表明，麻黄配方颗粒提取最佳工艺为提取4次，提取时间2 h，加水量10.8倍，验证试验的结果与模型预测值相符；TLC斑点清晰，重现性好，麻黄碱、伪麻黄碱含量稳定。麻黄配方颗粒提取工艺参数合理可靠，具有可行性；质量评价方法简便易行，重复性好。     

中兽药苦虎益母口服液TLC与HPLC检测方法的建立

为更好地控制苦虎益母口服液的品质和安全性，研究并制定苦虎益母口服液质量标准，采用薄层色谱法（TLC）对方中苦参、虎杖、益母草、黄芪进行定性鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）对虎杖苷进行定量检测。结果显示，苦参、虎杖、益母草、黄芪薄层鉴别斑点显色清晰，分离效果较好，阴性无干扰，能很好地鉴别目标成分。虎杖苷质量浓度在0.035～0.282 mg/mL范围内与峰面积有良好的线性关系，回归方程为y=29 086x-173.16，相关系数r=0.999 3，平均回收率为98.82%,RSD值为0.73%。苦虎益母口服液的质量控制中定性鉴别分离度好，含量测定结果重现性好。     

我国部分地区鸡滑液囊支原体分离株vlhA基因遗传进化和同源性分析

为了探究鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae, MS)在我国的遗传变异情况，试验采集北京市、河南省、辽宁省、河北省、天津市、山东省、安徽省、江苏省、湖北省、江西省10个地区疑似感染MS的发病鸡上颚裂黏液，进行MS分离、纯培养及鉴定，采用PCR方法扩增阳性分离株vlhA基因片段并对其进行测序分析，利用MEGA 7.0软件构建分离株与GenBank中28株参考株的系统发育树并分析遗传进化关系，再利用MegAlign软件分析分离株和参考株vlhA基因的同源性。结果表明：共得到17株MS分离株，其中16株的基因型为K型，1株为L型。分离株与国外不同地区的参考株vlhA基因同源性较低，在71.8%～91.8%之间；与国内不同地区的参考株vlhA基因同源性较高，在82.3%～95.9%之间。说明目前在我国流行的MS分离株的优势基因型是K型，并存在一定变异。