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美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位基因表达及其产物的纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入E.coliBL21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上。将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入E.coliM15细胞中表达了重组蛋白His-N。超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上。Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别。纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础。 相似文献
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猪肠道螺旋体病是一种由结肠菌毛样螺旋体引起的结肠炎,主要发生于断奶仔猪和保育猪。育肥猪的临床症状为粪便稀软,逐步发展为粥样粪便,保育猪和断奶仔猪则出现绿色或棕色水样腹泻。目前,常规抗生素治疗和加强饲养管理能减少发病率,维持猪的生产性能。 相似文献
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参照PRRSV ATCC VR2332株基因序列设计1对引物P1、P2,经RT-PCR扩增出PRRSV SD-1株ORF7基因,经与PMD18-T Vector连接后筛选出阳性克隆株测序。把PRRSV SD-1株ORF7 cDNA亚克隆到PQE上构建PQE-N原核重组表达载体。结果表明,PRRSV SD-1株ORF7核甘酸序列与PRRSV ATCC VR2332株ORF7核甘酸序列完全一致,与欧洲株LV符合率为58%。成功构建原核表达载体PQE-N,为N蛋白的研究和制备诊断性抗原奠定了基础。 相似文献
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山东省PRRS血清学调查及PRRSV分离株ORF3-7基因的克隆及序列分析 总被引:9,自引:0,他引:9
摘要:应用荧光抗体技术对山东省猪场PRRS的流行情况进行了血清学调查并分离到一株PRRSV。用5对引物分别扩增了PRRSV山东分离株ORF3-ORF7,将其克隆入PMD18-TVector并进行了序列测定。结果表明,山东分离株与美洲疫苗株ATCCVR-23320RF3-ORF7各读码框核苷酸同源性分别为98%、99%、99%、100%,氨基酸同源性分别为97%、98%、98%、98%、100%。 相似文献
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发病情况2006年4月,德州市齐河县一农户饲养的3000只肉鸡,在20日龄时突然发现大群发病,表现为精神萎靡不振,食欲下降,呼吸困难,排白色稀粪,粪便中几乎全是尿酸盐,个别排绿便,病鸡体重减轻,怕冷挤堆,饮水增加,腿爪干枯,平均每天死亡40多只,并且死亡率逐渐升高。剖检变化肾肿大、 相似文献