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对已经构建保存的PET-28a-GSTK1、PET-28a-GSTE3、PET-28a-Fe1、PET-28a-Fe2和PET-28a-CPL质粒,利用PCR技术检测目的基因,经IPTG诱导后通过SDS-PAGE检测5种重组蛋白(rGSTK1、rGSTE3、rFe1、rFe2和rCPL)的表达,利用His标签蛋白纯化试剂盒纯化4种重组蛋白(rGSTK1、rFe1、rFe2和rCPL),并使用BCA蛋白定量测定试剂盒测定蛋白浓度后,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,经Western blot测定4种重组蛋白的反应原性,采用间接Elisa测定多克隆抗体效价以及免疫后抗体消长规律。结果显示,5种目的基因条带正确,并未发生丢失;SDS-PAGE检测发现除rGSTE3外,其余4种蛋白(rGSTK1、rFe1、rFe2和rCPL)均能稳定表达且大小分别为28、25、26、27 kDa,以包涵体形式表达;利用His标签纯化蛋白后测定蛋白浓度,结果显示,以250 mmol/L咪唑进行洗脱时可获得高纯度的目的蛋白,蛋白质量浓度分别为2.633、2.532、2.582和2.506 g/L;将纯化后的重组... 相似文献
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为测量犬腹腔主要实质脏器的电子计算机断层扫描(CT)值,本试验从456例CT病例中筛选预研究脏器状态正常的犬53只,应用兴趣区域(ROI)测量法,95%置信区间标准,利用SPSS软件进行医学统计学分析。结果显示,犬正常状态肝脏CT值为(59.79±1.55) HU(P=0.887),胰腺CT值为(50.04±1.18) HU(P=0.529),脾脏CT值为(60.04±1.14) HU(P=0.806),肾上腺CT值为(27.02±1.00) HU(P=0.127),肾脏皮质CT值为(35.93±1.37) HU(P=0.312),肾脏髓质CT值为(30.27±1.00) HU(P=0.882);中华田园犬、贵宾犬和杂犬中各脏器CT值无显著差异,即犬的品种对于腹腔主要实质脏器的CT值无影响。结果表明,CT值可作为犬腹腔实质脏器的定量描述参数,应用于辅助诊断,提高诊断精确度。 相似文献
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