山羊IFN-γ基因的克隆表达与多克隆抗体制备

为获得山羊IFN-γ重组蛋白,提取山羊外周血淋巴细胞总 RNA,反转录得到 cDNA,以此为模板经PCR扩增获得IFN-γ的ORF区,构建重组克隆载体。经PCR扩增得到编码山羊IFN-γ成熟肽的基因序列,连入重组表达载体 pET-32a,转入 BL21（Codon Plus）感受态细胞中,测序并分析。重组表达载体经IPTG诱导后,对产物进行SDS-PAGE分析,并过镍柱纯化。用获得的纯化蛋白免疫家兔制备抗体。结果显示,编码山羊IFN-γ成熟肽部分的片段长432 bp;SDS-PAGE分析显示,融合蛋白大小约为34．9 ku,在30℃条件下,以0．3 mmol／L的IPTG诱导6 h,可得到大量可溶性表达的目的蛋白;间接 ELISA测定制得的多克隆抗体效价为1∶106。     

青海半细毛羊血红蛋白多态性及其与血清生化指标的相关性分析

[目的]探讨青海半细毛羊的血红蛋白多态性及其与7项血清生化指标间的相关性.[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法对29只青海半细毛羊的血红蛋白多态性及其与7项血清生化指标间的相关性进行分析.[结果]青海半细毛羊血红蛋白多态性存在HBA和HBB2种变异体,以HBB为优势基因.构成HBAA、HBAB和HBBB3种基因型,其基因型率分别为0.1379、0.5862和0.2759.HBA和HBB基因频率为0.431 0和0.5690,基因杂合度为0.4904.青海半细毛羊血液蛋白多态性与7项血清生化指标间均无显著相关性（P＞0.05）.[结论]该研究可为青海半细毛羊种质资源、亲缘关系以及品种选育和改良等方面的研究提供基础试验资料.     

三种佐剂对奶山羊乳房炎灭活疫苗免疫效果的影响

为筛选奶山羊乳房炎灭活疫苗的有效佐剂,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,经甲醛37℃灭活,分别与铝胶盐、蜂胶和转移因子混合,制备铝胶盐佐剂疫苗、蜂胶佐剂疫苗和转移因子佐剂疫苗,免疫泌乳期奶山羊,免疫剂量为2mL,共免疫2次,免疫间隔14d。分别在免疫前及每次免疫后第10天采集血样和乳样,ELISA测定抗体效价,用快速诊断液检测隐性乳房炎,统计隐性乳房炎检出率。结果显示,铝胶盐佐剂疫苗刺激机体产生的抗体水平在首免和二免后均显著高于对照组(P0.05);3个免疫组中,铝胶盐组抗体水平最高,转移因子组次之,蜂胶组则不显著;铝胶盐佐剂疫苗还能显著降低隐性乳房炎的检出率,使隐性乳房炎检出率由免疫前的60%下降至二免后的30%。结果表明,同蜂胶和转移因子相比,铝胶盐佐剂能刺激机体产生更强的体液免疫应答,对隐性乳房炎的治疗效果更显著。