猪附红细胞体病的研究进展

猪附红细胞体病是近几年引起医学和畜牧兽医工作者注意的一种人畜共患病。从附红细胞体的分类、形态结构、抵抗力、流行病学方面进行了综合论述,探讨了猪附红细胞体病的实验室诊断方法及防治措施等。     

单克隆抗体间接免疫荧光(IFA)检测猪附红细胞体

为建立利用单克隆抗体检测猪附红细胞体病的间接免疫荧光(IFA)方法,用抗猪附红细胞体的单克隆抗体,对48份疑似猪附红细胞体感染的病猪猪血进行免疫荧光检测,并与血涂片镜检及PCR检测方法进行比较,结果显示IFA检测的阳性率为68.75%,与PCR检测阳性率为77.08%符合率较高,比血涂片的瑞氏和姬姆萨染色镜检阳性率高出近30个百分点;而用猪肺炎支原体、猪链球菌和猪巴氏杆菌作对照,结果均呈阴性。建立的用抗猪附红细胞体的单克隆抗体检测猪附红细胞体病的IFA特异性强,敏感性高;检测临床样品的结果准确可靠。     

奶牛产后瘫痪的预防和治疗

奶牛产后瘫痪又称乳热症，是奶牛，特别是高产奶牛或分娩胎次较多的奶牛在产后发生的一种急性低血钙症。通常在产后12～72h发生，且发病率较高，给养殖户带来较大的经济损失。以全身肌肉无力、站立不稳，精神沉郁，食欲不振，知觉减退或消失及四肢瘫痪，卧地不起为主要特征。如果不注意平时的饲养管理或发生产后瘫痪后不及时治疗，将会使一批高产奶牛遭淘汰，给奶牛生产带来一定的经济损失。     

从遗传与生理角度看猪繁殖疾病防洽

各种原因引起的猪产科疾病而导致的猪繁殖障碍日益严重．给我国的养猪业带来了巨大的经济损失，本文主要从遗传性因素、饲养管理因素、生殖器官病理性及内分泌等引起猪产科疾病进而导致猪繁殖障碍的病因作一综述，并提供一些综合预防和治疗措施。     

添加剂在早期断奶仔猪上的应用现状

由于早期断奶的仔猪消化系统发育不成熟、消化酶和胃酸分泌不足、免疫力低及应激的产生,常常会表现出一系列的不良现象,如厌食或拒食、消化机能紊乱、腹泻水肿、生长迟滞、饲料利用率低等所谓的“仔猪早期断奶综合征”,从而严重影响了养猪业的经济效益。本文从添加剂的角度就如何消除或减轻仔猪断奶综合征作一综述。     

母猪病毒性繁殖障碍病之细小病毒病的诊断与防治

猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)病是引起猪繁殖障碍的主要病原之一。本病临床症状主要表现为胚胎和胎儿的感染及死亡,呈现早产、流产、死胎、畸形和木乃伊、弱仔、产仔不足以及不孕等繁殖障碍,而母猪本身通常并不表现明显的临床症状。在健康猪场,PPV一旦传入猪群,初次发病的各胎母猪都可能发生流产、死胎和木乃伊;在本病流行区内或猪场,7月龄以后的初产母猪往往容易发生流产、死胎和木乃伊等现象。PPVr在世界各养猪国家以及我国各地污染十分严重,生产繁殖猪群阳性感染率为70%～90%或更高,给养猪业造成巨大的经济损失。1流行病学PP…     

小鼠胚胎诱导型Hsp70基因的RNA干扰有效序列筛选

 【目的】应用RNA干扰技术沉默小鼠胚胎成纤维细胞（Mouse embryonic fibroblast,MEF）中诱导型热休克蛋白70（Hsp72）基因的表达,从而筛选出对Hsp72基因具有确实干扰作用的siRNA。【方法】设计并合成4对特异性针对Hsp72基因的siRNA,借助LipofectamineTM 2000瞬时转染MEF,41℃热应激处理后,采用RT-PCR和Western blot检测Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量。【结果】在热应激组中,siRNA1、siRNA2两组及阳性、阴性和空白3个对照组的Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量均极显著高于常温对照组（P＜0.01）,siRNA3和siRNA4两组的Hsp70 mRNA的表达量极显著低于常温对照组（P＜0.01）;siRNA3组Hsp70蛋白表达量极显著低于常温对照组（P＜0.01）,而siRNA 4组与常温对照组差异不显著（P＞0.05）。与空白对照相比,4对siRNA中siRNA3和siRNA4对MEF中Hsp72 mRNA有极显著（P＜0.01）的抑制作用,其对Hsp72 mRNA的抑制率分别为86.2%和75.4%（P＜0.01）,对Hsp72蛋白表达的抑制率分别为77.3%和57.0%（P＜0.01）。【结论】体外合成的四对特异性针对Hsp72基因的siRNA中,靶位点在Hsp72 mRNA二级结构表面位置的siRNA3和siRNA4对Hsp72基因具有显著的抑制作用,靶位点在Hsp72 mRNA二级结构复杂处的siRNA1和siRNA2对Hsp72基因的抑制作用不明显。     

热休克蛋白70在配子发生和胚胎发育中的表达

热休克蛋白(hsp)是机体在应激状态下迅速合成的一组蛋白质。热休克蛋白70(hsp70)是hsp中成员最多、最重要的一族,具有普遍性、高度保守性以及应激性。hsp70作为蛋白成熟过程中的分子伴侣,参与细胞周期调节、DNA损伤修复及细胞凋亡,在配子发生及胚胎发育、机体衰老过程中具有重要的生理作用。本文主要就hsp70在配子形成和胚胎发育中的作用进行了简述。     

奶牛诱导型热休克蛋白70基因片段的克隆及其在大肠杆菌中的表达

热休克蛋白(Heat shock proteins,Hsp)是细胞受应激后产生的一类蛋白质,其中最重要的、高度保守的一类热休克蛋白是Hsp70[1].Hsp70-1A和Hsp70-1B几乎被相同的基因编码,被统称为Hsp70(Hsp72或iHsp70).Hsp70在未应激正常细胞或组织内以较低的不可检测到的低水平表达,当机体发生生理变化或遭受应激后会被诱导而迅速表达,因此被称为诱导型Hsp70.     

猪附红细胞体实时荧光定量PCR检测方法的建立

参照猪附红细胞体16S rRNA基因序列设计了1对引物，分别以标准株和分离株的基因组DNA为模板，采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测猪附红细胞体，确定特异性产物的Tm值，同时做普通PCR。试验结果表明，特异性产物的Tm值为88．5℃，最低能检测到含0．036fg／μL阳性质粒的标准品。以阳性质粒标准品10倍倍比稀释的模板进行实时荧光定量PCR，通过对反应体系和反应条件进行筛选和优化，建立了检测猪附红细胞体的标准曲线。建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法显示了较好的特异性、敏感性和广谱性，为猪附红细胞体病的临床检测和流行情况调查提供了新的技术手段。