人血清白蛋白载体的构建及其在山羊乳腺中的瞬时表达

根据GeneBank中人血清白蛋白(HSA)的基因序列,设计一对特异性的引物,从人肝cDNA文库中扩增出其编码序列,并加入酶切位点XhoⅠ,以pCDNA 3.1为模板,设计特异性的引物,并在上游引物加入NotⅠ,下游加入ApaⅠ和NotⅠ,扩增出筛选标记新霉素抗性基因neo,然后再以pBC1为基本骨架,在其NotⅠ、XhoⅠ位点处分别插入hsa和neo,从而得到乳腺表达载体pBC-NEO-HSA,将该质粒注射入奶山羊乳腺中进行暂时性的表达,结果显示所构建的载体能够有效地指导目的基因的表达,从而为下一步构建细胞系、克隆动物作好基础。