疯牛病活体检测的研究进展

近几年来 ,疯牛病的流行已给许多国家尤其是欧共体各国的畜牧业带来了巨大的经济损失 ,并开始威胁人类健康。目前一个国家的疯牛病 (BSE)风险程度、发病状况及监测系统的完善程度成为牛及牛产品国际贸易中的一个重要参考指标。其中监测系统是否有效 ,关键取决于检测技术的有效性。虽然人们已开发出各种病牛尸检方法 ,但这并不能有效的防止疯牛病的传播和降低经济损失。因此 ,如何对牛进行活体检测已成为生物界竞相研究的热点。虽然目前疯牛病的活体检测技术还不成熟 ,但进展很快 ,本文总结了近年来BSE活体检测的方法及一些相关研究。1　…     

胚胎干细胞定向分化研究进展(上)

胚胎干细胞 (ES细胞 )是由哺乳动物早期胚胎分离克隆的一类未分化二倍体细胞 ,能在体外增殖 ,又能保持未分化状态。在一定条件下 ,ES细胞可向多个方向分化 ,并生成多种功能细胞。ES细胞在遗传上具有可操作性 ,即导入外源基因、标志基因和报告基因 ,诱导基因突变 ,基因打靶或导入额外原有基因使之过度表达等。利用该特性可制作各种实验模型并进行各种基因分析。ES细胞能被诱导分化为构成机体的任一种细胞类型 ,可用于临床细胞、组织和器官的修复和移植治疗 ,研究ES细胞的定向分化有着重要的理论和应用价值。1　ES细胞分化机制研究现状目…     

上海首次发现仔猪附红细胞体病

附红细胞体病(Eperythrozoonosis)是由专性血液寄生生物——附红细胞体(Eperythrozoon)引起的一种以贫血、黄疽、发热为主要临床特征的疾病。我国自晋希民(1981)首先报道家兔附红细胞体病以来,牛、羊的附红细胞体病也相继见报.近年来猪的附红细胞体在我国少数地区也已发现.笔者在国内首次发现犬附红细胞体病后(已报道),1991年在上海地区又首次发现仔猪罹患本病.病猪死亡率最高可达50％,耐过的猪则生长发育受阻而成为僵猪,对养猪业危害较大.     

粗酶制剂对鹅消化酶活力的影响

本文综述了近年来添加于大麦和米糠饲料中的酶制剂对鹅主要消化酶活力的影响的研究进展。     

附红细胞体病患畜病理组织学及血液学变化的研究

对急性附红细胞体病患畜病理组织学,血液学和部分生理生化变化指标变化的显示：患畜均有体温升高,呼吸和心跳加快,谷－丙转氨酶和血清胆红素增高,血糖降低,红细胞压积,红细胞总数,淋巴细胞下降,白细胞总数上升等血液学和生理生化指标变化;     

TTMV间接ELISA检测方法的建立

以TTMV重组蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了检测人TTMV血清抗体的间接ELISA方法,结果显示：抗原最佳包被浓度为1．63μg／mL,37℃孵育1h后4℃过夜;血清稀释度为1：320;酶标二抗孵育时间为37℃60min;ELISA酶标板的临界值为0．211。运用该方法对上海市和辽宁省共计280份血清样品进行检测,阳性检出率分别为34．68％和39．74％。检测结果表明,建立的间接ELISA方法特异性与重复性均较好,为进一步完善TTMV临床诊断方法打下了基础。     

鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白基因的遗传变异分析

对鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白基因进行了RT—PCR扩增、克隆和测序。结果表明，PSH株S基因由3504个核苷酸组成，编码1条由1167个氨基酸残基组成的多肽。S基因编码产物裂解后形成的S1和S2亚单位分别由541和626个氨基酸残基组成。PSH株S蛋白切割识别位点为精氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-精氨酸（RRFRR），与多数鸡传染性支气管炎病毒（IBV）切割识别位点相似（RRF／SRR）。与GenBank中其他冠状病毒毒株S基因的推导氨基酸序列相比较，PSH株与IBV参考毒株的同源性为79．3％～99．6％，而与其他冠状病毒包括火鸡蓝冠病病毒和SARS病毒的同源性均小于37．8％。表明，鸽源冠状病毒PSH株属于第3抗原群冠状病毒，且与IBV亲缘关系较近。     

实验用小型猪吸入性全麻效果观察

为实验外科教学培训需要,对62头实验用小型猪采用氯胺酮(10 mg/kg)和速眠新Ⅱ(亦称846,0.1mL/kg)联合应用诱导麻醉的方法肌肉注射,待动物进入麻醉诱导状态后再行气管内插管,连接麻醉机,开启2%异氟醚吸入麻醉维持,同时接入血氧监护仪(Nellcor),对动物生理指标无创血氧饱和度SpO2和心率进行监测.结果表明:吸入麻醉前后SpO2差异显著(P＜0.05);吸入麻醉15 min后小型猪生理指标开始趋于稳定;吸入麻醉后2小时和3小时SpO2和心率分别维持在98%和78次/min.术中无疼痛反射,肌肉松弛度良好.     

猪博卡病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

根据GenBank公布的猪博卡病毒(PBoV)序列,通过VP1/2基因设计引物和Taq Man探针建立实时荧光定量PCR检测方法。建立的方法与PPV、PRRSV及PCV均无交叉反应,具有较高特异性,在107 copies/mL～101 copies/mL模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为0.997,最低可检测到101copies/mL的阳性质粒。说明所建立的PBoV实时荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性好和精确性高等优点。     

猪星状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增ORF2基因片段,将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线,并对其灵敏性、特异性和重复性进行验证。结果表明,猪星状病毒荧光定量PCR的标准曲线Ct值与模板浓度呈良好的线性关系,熔解曲线特异,灵敏度可达1×101拷贝,是普通PCR检测方法的100倍,特异性和重复性较好。本次建立的猪星状病毒荧光定量PCR检测方法具有快速、简便、敏感等优点,有重要的实用价值。