鸡大肠杆菌、沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和奇异变形杆菌SYBR Green Ⅰ多重定量PCR方法建立

研究旨在鉴别检测鸡场中大肠杆菌、沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和奇异变形杆菌等4种常见病原菌。试验在已有4种病原菌单一定量PCR检测方法的基础上,采用SYBR GreenⅠ多重定量PCR检测方法检测大肠杆菌、沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和奇异变形杆菌。结果显示,建立检测鸡大肠杆菌、沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和奇异变形杆菌SYBR GreenⅠ多重定量PCR检测方法与其他菌株无交叉反应;大肠杆菌、沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和奇异变形杆菌的最低检测限分别为5.6×10¹、8.9×10⁰、7.8×10⁰、3.8×10¹CFU/mL;Ct值变异系数在2.22%之内。研究表明,试验所建立的方法特异性强、灵敏性高、重复性好,可应用于临床中大肠杆菌、沙门氏菌、空肠弯曲杆菌和奇异变形杆菌感染的快速检测。     

畜禽粪便中抗菌药物降解方法及残留检测技术研究进展

随着我国畜禽养殖业的迅速发展,兽药和饲料添加剂在促进动物生长、降低动物发病率与病死率和改善畜产品品质等方面起着重要的作用,在畜牧业发展中占重要部分。这些抗菌药物在动物机体内不能被完全代谢,积聚在动物体内随着粪便排出体外,由此类粪便造成了严重的环境污染,不仅使细菌的耐药性不断增强,甚至还出现畜禽产品安全等问题危害动物以及人类健康。因此,去除畜禽粪便中残留的抗菌药物和耐药基因是最有效的解决方法。论文主要从畜禽粪便中抗菌药物的降解方法和残留检测手段进行综述。     

鸭腺病毒3型荧光RPA恒温快速检测方法的建立与应用

鸭腺病毒3型(Duck adenovirus type 3,DAdV-3)是我国近年来新发的禽腺病毒，致病力较强，已经严重影响到鸭养殖业。为实现对DAdV-3的快速检测，以DAdV-3的Hexon基因为靶基因，设计特异性重组酶聚合酶扩增(Recombinase polymerase amplification, RPA)引物和探针，并构建重组标准质粒命名为DAdV-H-18T,优化RPA反应条件后，建立DAdV-3的荧光RPA恒温快速检测方法。结果显示，该检测方法最佳反应条件为38℃、18 min;特异性强，与其他常见鸭病病原如鸭肝炎病毒、鸭坦不苏病毒等均无交叉反应。对重组质粒DAdV-H-18T的最低检测限为1 copy/μL;采用建立的RPA检测方法和qPCR对55份鸭组织临床样本进行检测，阳性率分别为65.4%、50.9%,检测符合率为92.7%。研究建立的DAdV-3荧光RPA方法，检测速度快，敏感性高，特异性强，为该病临床快速检测提供了有力工具。