遗传资源创新是我国地方猪种保存和利用的重要途径——记我国近交系小型猪培育、利用20年

<正>近交系实验动物基因高度纯合,能象物理学研究中的精密仪器和化学反应中的分析纯试剂那样,为生物医学及生命科学研究提供灵敏的、偏差极小的实验结果。为满足人类生     

生长因子EGF、bFGF对猪孤雌胚体外发育的影响

在胚胎发育的不同阶段，分别在培养基中添加EGF和bFGF，研究EGF和bFGF对猪孤雌胚体外发育的作用。结果表明：在1细胞阶段添加EGF或bFGF，添加EGF能够显著提高孤雌胚的卵裂率（P〈0．05）；2～4细胞阶段添加EGF和bFGF，添加EGF组和添加bFGF组的囊胚率都显著高于对照组（P〈0．05），而添加bFGF组的囊胚率和囊胚细胞数都略高于对照组和添加EGF组。说明EGF和bFGF有利于猪孤雌胚的体外发育，而且，bF-GF能够通过提高囊胚细胞数而提高猪孤雌胚的质量。     

体细胞干细胞研究进展

综述目前研究较多的5种体细胞干细胞各自的生存小环境及生化特性，阐述体细胞干细胞生存小环境对干细胞的影响及体细胞干细胞的可塑性，展望了体细胞干细胞在人类医学上的应用前景。     

五指山小型猪对猪病毒瘟的敏感性试验

本试验证明,２～４月龄猪瘟抗体阴性的五指山小型猪对猪瘟石门系病毒具有良好的敏感性。     

猪早期胚胎体内、外发育规律研究

系统地掌握猪早期胚胎体内外发育规律是进行猪胚胎冷冻、胚胎分割、鲜胚移值、长途运输引种以及基因转移等生物技术研究和应用的基础。本研究包括２个实验，实验１，利用８９头超排母猪和１９头自然发情母猪，于配种后第２、３、４、５、６、７、８、９和１０天手术采得胚胎１６１２枚，系统地观察猪早期胚胎体内发育规律，即：２日龄胚胎中原核胚占７７．３９％（３９７／５１３），３日龄胚胎中４和６细胞胚占７９．０５％（８３／１０５），４日龄胚胎中４～８细胞占４０％（３５／７６），５日龄胚胎多为桑椹和囊胚８３．１２％（６４／７７），６日龄胚多为膨胀囊胚４２．０９％（１８１／４３０）和孵化囊胚３４．１９％（１４７／４３０），７和８、９、１０日龄胚发育到孵化囊胚分别为７６．３４／ｏｏ（７１／９３）和１００％（７７／７７），而自然发情的５日龄胚胎中桑椹和囊胚仅占３２．５％（１３／４０），６日龄胚胎中膨胀囊胚仅占１１．１１％（１７／１５３），孵化胚仅占１９．６１％（３０／１５３）。各发育阶段的胚胎比例均明显低于５、６日龄超排供体（Ｐ＜０．０５）。实地２，将１３８枚囊胚和膨胀囊胚，分别体外培养２４和１２小时，囊胚发育阶段的胚胎５０％（４８／９６）?     

猪胚胎多能性干细胞的分离培养

收集妊娠26．0～29．0d的猪胚胎，分离培养原始生殖细胞(PGCs)，在STO细胞饲养层上生长，形成了多能性干细胞(EG)。发现其具有干细胞的显著特性，并能在体外定向分化为神经细胞、上皮细胞和胚泡细胞。试验使用A、B、C3种不同的培养基培养PGCs，结果在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距，说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的影响。     

中国小型猪内源性反转录病毒研究进展与对策

作者介绍了国内外猪内源性反转录病毒（PERV）研究进展,简述了中国不同品种小型猪PERV存在情况、PERV前病毒全基因克隆与序列分析、细胞水平鉴定方法、感染HEK293细胞研究平台的创建、猪A3F对PERV的抑制作用研究,以及从分子遗传学上揭示不同品系PERV特异性等创新性研究成果,分析了五指山小型猪近交系具有PERV基因拷贝少且没有PERV-C等特异性,以及展望培育中国PERV阴性猪新品系方法等研究,以期为人类异种器官移植和生物医用材料产品安全性研发,解决小型猪PERV疾病传播危险性提供科学对策和新的方向。     

猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素的研究

从五指山猪(WSZP)近交系第8～13代培育群中，先后选用21头5～10月龄青年母猪，分别于授精后25～30d采集胎儿106个，进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM F10(1:1)为基础培养液，按添加或不添加生长因子，将培养液分为A、B、C3种，并以STO细胞作饲养层，在38℃、5.0％CO2和湿润的气相中进行培养建系。结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株，其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存。并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究。研究发现：不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响，不同培养液对EG细胞建系效果不同，STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一。EG细胞系的初步建立，为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能。     

小型猪近交系新品种的培育与开发利用

小型猪近交系是中国农业科学院北京畜牧兽医研究所以2头五指山猪(Sus scrofa)为系祖,历时15年,采用“近亲交配”、提高营养水平、同期发情以及笼架等饲养技术,逐步克服后代畸形率高、弱仔率高、成活率低等3大阶段性难题,育成国际上首个近交系猪.本文介绍小型猪近交系的培育过程、近交系研究鉴定、新遗传资源种质特性,以及开发利用.该研究成果填补了国内外近交系猪的研究空白,为大型哺乳近交系动物培育理论和应用研究提供了新的视角.