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猪生长激素基因的克隆及在哺乳动物细胞中的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
应用RT—PCR技术克隆了猪生长激素(pGH)cDNA,该基因编码蛋白的信号肽序列与已有报道的pGH基因存在2个氨基酸残基的差异,而成熟肽却无差异。将pGHcDNA定向插入真核表达载体VRl020,构建了重组真核表达质粒VpGH;利用脂质体法转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT—PCR、ELlSA和免疫荧光分析,分另1在转录和翻译水平证实了目的基因在COS7细胞中得到正确转染表达。 相似文献
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猪生长激素基因的原核表达及其抗体制备 总被引:6,自引:0,他引:6
通过构建pGH基因的原核表达质粒,转化大肠埃希氏菌TOP10,经IPTG诱导,成功表达了重组猪生长激素的融合蛋白。经SDSPAGE分析,在分子质量50.4ku处有1条新的特异蛋白质条带。对以包涵体形式表达的融合蛋白进行SDSPAGE分离,并经透析得到了重组融合蛋白,以此融合蛋白免疫家兔,制备并纯化了抗pGH多克隆抗体,经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹分析和免疫组织化学方法检测,此抗体具有较高效价和特异性。成功地表达了pGH基因并获得了多克隆抗体。 相似文献
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