犬细小病毒CPV-JL19株分离鉴定及遗传进化分析

为探究吉林地区犬细小病毒(CPV)的生物学特性及当前CPV流行株的遗传变异,采集吉林省长春市某动物医院疑似感染CPV病犬的肛拭子,经PCR鉴定为CPV阳性.利用F81细胞进行病毒培养,通过电镜形态学观察、血清学、分子生物学及攻毒试验等方法进行验证.结果 表明,成功分离鉴定出1株CPV,命名为CPV-JL19株;电镜下病...     

山羊痘病毒ORF8～ORF18缺失重组毒株的构建和鉴定

本研究旨在通过敲除山羊痘病毒(GTPV)大段基因组片段尝试构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体.采用PCR方法,克隆了GTPV AV41株基因组ORF7～ORF8间1 242 bp的基因片段,以及ORF18～ORF19间1 355 bp的片段.接着分别以上述2片段作为左、右侧同源重组臂,构建了包含报道基因EGFP和抗性基因gpt的GTPV重组转移载体pCF-Eg.然后采用脂质体介导法,将重组转移载体pCF-Eg与GTPV AV41株共转染原代羊睾丸细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,并鉴定重组病毒的遗传稳定性和生长特性.结果成功获得1株敲除掉ORF8～ORF18间9个ORF、长达7 kb基因组片段的重组病毒vCF-Eg.该重组病毒能稳定表达绿色荧光蛋白至少10代,并且其增殖滴度与亲本毒株基本相同.表明上述区域是GTPV的复制非必需区.     

貉细小病毒性肠炎研究进展

貉细小病毒性肠炎是由貉细小病毒(RDPV)引起的一种急性、高度接触性传染性疾病.近些年来,细小病毒变异率不断升高,致使貉细小病毒性肠炎不能得到很好地防控.本文从貉细小病毒性肠炎的病原特性、临床特征及病理变化、实验室诊断方法和疫苗研究进展等多方面对貉细小病毒性肠炎的研究进展进行综述分析,为貉细小病毒性肠炎的研究提供一定的...     

日光温室秋冬茬番茄品种筛选试验

为了筛选适合密云地区栽培的高产、优质并受市场欢迎的日光温室秋冬茬番茄品种,选取了13个品种在日光温室内进行比较试验。结果表明:春展33-2品种667 m^2产量达到10 362.43 kg,且各方面性状都表现较好,适宜在密云地区进行示范种植。     

山东半岛暖棚蓝莓栽培管理历

<正>蓝莓学名越桔,属于杜鹃花科越桔属灌木小浆果果树。蓝莓具有防止脑神经衰老、增强心脏功能、预防视力疲劳及防癌抗癌的独特功效,是联合国粮农组织推荐的五大健康水果之一。中国对蓝莓引种栽培研究始于20世纪末,山东半岛气候凉爽,温度适宜,     

牛蛙(Rana catesbeiana)蛙皮抗菌肽基因的克隆、测序及其表达

利用RT—PCR的方法从牛蛙皮肤组织中克隆到大小为270bp的片段RCABP，将其克隆到pGEM—T载体，测序获得1个新的碱基序列。将此基因克隆到原核表达载体pQE一80L，获得融合表达质粒pQE一80L／DHFR／ABP，在1％IPTG诱导下进行表达。SDS—PAGE检测表明，重组蛙皮抗菌肽蛋白的表达量占菌体总蛋白的24％，以包涵体形式存在。体外抑菌试验表明，所构建的质粒能在大肠杆菌中表达具有体外抑菌活性的蛙皮抗菌肽，该融合蛋白具有良好的应用前景。     

耐低钾玉米苗期O2·含量、POD活性及其与钾素分布的关系

以耐低钾玉米自交系和不耐低钾玉米自交系为试验材料,比较低钾胁迫条件下两个玉米自交系苗期各个部位超氧阴离子(O2)产生速率、过氧化物酶(POD)活性和钾素分布的动态变化。结果表明,低钾胁迫下耐低钾玉米自交系上部叶片的O2产生速率较低,叶片及根系的POD活性较稳定,能将较多的钾素转移到上部叶片;钾离子在植株体中的分布与O2数量、POD活性存在相关性。     

鸭MyoG基因启动子的生物信息学分析及其甲基化频率对基因表达的影响

采用RT–PCR技术扩增和克隆鸭Myo G基因启动子,并对其启动子序列进行生物信息学分析,采用Sequenom Mass Array技术检测Cp G岛在鸭肌肉组织中的甲基化水平,用q RT–PCR检测Myo G基因的表达量。结果表明,扩增得到鸭Myo G基因启动子序列2 730 bp,对启动子序列预测后,发现存在2个Cp G岛,其中Cp G岛(–2 536~–1 997 bp)存在5个转录因子结合位点和多个真核生物结构元件。甲基化检测结果表明:在鸭的个体和组织水平上,启动子甲基化率均未聚类在一起;Cp G位点甲基化频率存在个体差异,22%Cp G位点的甲基化频率与Myo G的m RNA表达量呈负相关(P0.05),78%Cp G位点的甲基化频率呈正相关(P0.05),其中,腿肌甲基化位点Cp G_1、Cp G_26.27.28.29的甲基化频率与Myo G基因表达水平均呈显著相关(P0.05)。Myo G基因在鸭与在哺乳动物中的转录调控机制存在差异。试验中发现多个影响鸭Myo G基因转录的潜在甲基化位点,其中Cp G_1与Cp G_26.27.28.29能通过DNA甲基化修饰影响Myo G基因在鸭腿肌中的转录。本研究结果可为鸭Myo G基因转录调控提供参考依据。     

lnc-005028序列及其在鹅肥肝形成中的作用

为了研究lnc-005028在鹅肝中的具体序列和功能,以四川白鹅为研究对象,通过克隆发现lnc-005028全长1 066 bp。荧光定量RT-PCR分析表明lnc-005028在正常鹅肝脏中特异性高表达,极显著高于其他组织(P<0.01);填饲后肝脏中lnc-005028表达水平与皮脂中无显著差异(P>0.05)。0.2、0.4和0.6 mmol/L的棕榈酸处理鹅原代肝细胞能极显著影响lnc-005028的表达(P<0.01),且其表达水平的变化趋势与半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)相似。提示:lnc-005028的作用可能与鹅原代肝细胞凋亡有关,为进一步研究鹅肝中lnc-005028的功能提供了科学依据。     

大棚型日光温室光照、温度及湿度等性能的初步研究

节能日光温室为改善中国北方冬春季节蔬菜、瓜果的供应做出了重大贡献,具有很好的可持续发展性.目前蔬菜设施主要以带后墙的日光温室、塑料大棚为主,尤其是目光温室由于冬季基本不需加温即能进行蔬菜生产,因而得到了广泛的推广.