鹿茸多肽对冈田酸诱导的小鼠海马神经元HT22细胞损伤模型中PI3K、AKT、Caspase-9表达的影响

目的观察鹿茸多肽对冈田酸(OA)诱导的小鼠海马神经元HT22细胞损伤模型中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)表达的影响,探讨鹿茸多肽对HT22细胞损伤模型的保护作用机制。方法采用含10%胎牛血清(FBS)培养液(DMEM/F12)传代培养HT22细胞7d后,分为正常对照组、二甲基亚砜(DMSO)对照组、OA细胞损伤模型组、鹿茸多肽高、中、低剂量组。正常对照组给予含10%FBS的DMEM/F12,DMSO对照组给予DMSO终浓度<0.01%的DMEM/F12,OA细胞损伤模型组给予10nmol OA的DMEM/F12,鹿茸多肽高、中、低剂量组分别给予50、500、1000μg/ml的DMEM/F12,于37℃、5%CO2条件下孵育24h。利用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,酶联免疫法(ELISA)检测各组实验细胞内PI3K、AKT含量,蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组实验细胞内PI3K、AKT、Caspase-9表达水平。结果MTT比色法检测结果表明,与OA细胞损伤模型组比较,鹿茸多肽能够明显提高细胞存活率(P<0.05);ELISA检测结果表明,与OA细胞损伤模型组比较,鹿茸多肽能够明显提高受损HT22细胞内PI3K、AKT含量(P<0.05或P<0.01);Western Blot检测结果表明,与OA细胞损伤模型组比较,鹿茸多肽能够明显提高受损HT22细胞内PI3K、AKT、Caspase-9表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论鹿茸多肽对OA诱导的HT22细胞损伤模型具有保护作用,作用机制可能与调节受损HT22细胞内PI3K、AKT、Caspase-9表达水平相关。     

煎煮时间对防风中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的影响

目的:通过测定不同煎煮时间对防风药液中有效成分升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的影响,探讨防风的最佳煎煮时间,为中药特殊煎煮方法临床应用提供理论依据。方法:采用HPLC法测定。色谱条件:Inertsil ODS-3柱(250×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(40:60),流速为1 mL·min-1,检测波长为254nm,柱温30℃。结果:防风的有效成分升麻素苷浓度在0.1-0.8mg/mL、5-O-甲基维斯阿米醇苷浓度在0.1-0.5mg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9992,r=0.9997)。防风煎煮20min升麻素苷含量以及5-O-甲基维斯阿米醇苷含量为4.712mg/g和1.860mg/g,煎煮25min为7.316mg/g和3.472mg/g,煎煮30min为7.564mg/g和3.472mg/g,煎煮35min为5.828mg/g和3.472mg/g,煎煮40min为5.456mg/g和2.976mg/g,煎煮45min为5.332mg/g和2.356mg/g,煎煮50min为4.588mg/g和1.860mg/g,煎煮55min为3.844mg/g和1.736mg/g,煎煮60min为3.224mg/g和1.736mg/g。结论:防风饮片煎煮30min时,其有效成分升麻素苷的含量最高,在煎煮25~35min时5-O-甲基维斯阿米醇苷含量最高且基本稳定,表明煎煮30min时有效成分总溶出率最高,同时,如果煎煮时间过低,其有效成分不能充分溶出;而且,如果煎煮过程过长,同样会降低其主要成分的溶出率;故临床应用防风以先煎10min为宜。药喷雾技术,以便遏制西洋参病虫害,确保苗株健壮,促成西洋参种植业的优质、高产和高效。     

鹿茸多肽对氢溴酸东莨菪碱致小鼠学习记忆功能障碍的改善作用研究

目的观察鹿茸多肽具有对氢溴酸东莨菪碱(SCOP)致小鼠学习记忆功能障碍的改善作用。方法 60只小鼠随机分为6组,空白组、模型组、阳性对照组、鹿茸多肽低剂量组、鹿茸多肽中剂量组及鹿茸多肽高剂量组,连续灌胃给药21d。通过Morris水迷宫和跳台实验,测试小鼠学习能力变化。通过生化检测法测定谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果水迷宫实验结果表明,与模型组相比,阳性对照组及鹿茸多肽低、中、高剂量组小鼠逃避潜伏期和总路程明显缩短(P0.05),跳台实验结果表明,与模型组相比,阳性对照组及鹿茸多肽低、中、高剂量组小鼠潜伏期明显增加,错误次数明显减少(P0.05)。给予鹿茸多肽后,能够降低MDA含量,升高GSH、SOD活性。结论鹿茸多肽具有改善小鼠学习记忆功能障碍的作用。