秦川牛PDHB基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

[目的]旨在通过构建秦川牛丙酮酸脱氢酶β亚基(Pyruvate dehydrogenase β subunit,PDHB)基因的重组腺病毒载体,为研究PDHB基因在牛前体脂肪细胞分化过程中的功能做准备。[方法]根据牛PDHB基因mRNA序列(GenBank Accession No.NM_001035435)设计引物,克隆该基因的编码区(Coding Sequence, CDS)序列。测序验证后将其重组到穿梭载体pAdTrack-CMV上,经PmeⅠ线性化后,转化到含有pAdEasy-1腺病毒骨架载体的E. coli BJ5183感受态细胞中进行同源重组,以获得重组质粒pAd-PDHB。再将经PacⅠ酶切线性化的pAd-PDHB转染到HEK 293A细胞中,进行病毒包装并扩增高滴度病毒Ad-PDHB,绿色荧光蛋白(GFP)标记法测定病毒滴度。将高浓度的Ad-PDHB病毒感染牛肌内前体脂肪细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PDHB的表达量。[结果]经测序验证,本实验克隆获得的牛PDHB基因CDS与数据库GenBank收录的序列一致。将PDHB基因CDS与穿梭载体pAdTrack-CMV重组并转染HEK 293A细胞后成功获得了重组腺病毒Ad-PDHB,其滴度为1.66×10⁹ PFU.mL^-1。腺病毒Ad-PDHB侵染牛肌内前体脂肪细胞后,PDHB在mRNA的表达水平比对照组高25.5倍。[结论]成功克隆了秦川牛PDHB基因并构建了重组腺病毒质粒pAd-PDHB,并获得能够在牛肌内前体脂肪细胞中过表达PDHB基因的高滴度重组腺病毒Ad-PDHB。     

四种糖作为碳源对凡纳滨对虾生长、肠道消化酶及肠道菌群的影响

为研究4种常见的糖源对凡纳滨对虾生长、肠道消化酶及肠道菌群的影响,选取初始体质量为(0.36±0.02) g的凡纳滨对虾为研究对象,从多种糖类中选择常见的4种糖(葡萄糖、果糖、淀粉、蔗糖)作为糖源配制饲料,实验共计4个处理,每个处理3个重复,每个重复40尾虾,养殖周期为56 d,每种糖源的添加量为20%。结果显示,(1)凡纳滨对虾的特定生长率和蛋白质效率均存在显著性差异,淀粉组显著高于其他3组,但各组间的肝体比和含肉率无显著差异。全虾体成分,蔗糖组的粗脂肪显著低于其他3组,葡萄糖组的灰分显著高于其他3组,粗蛋白与水分各组间无显著差异。(2)各组间对虾肠道的脂肪酶活性,淀粉组与蔗糖组显著高于葡萄糖组及果糖组,胃蛋白酶活性方面,淀粉组显著高于其他3组。(3)各组间凡纳滨对虾肠道的OTU、Ace指数及Chao指数无显著差异,Shannon指数淀粉组及蔗糖组显著高于葡萄糖组,Simpson指数淀粉组显著低于蔗糖组,而蔗糖组又显著低于葡萄糖组。门水平上,变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)与放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度差异显著,但疣微菌门(Verrucomicrobia)相对丰度各组间无明显差异;在纲水平上,各处理组间的对虾肠道菌群的差异性较显著,淀粉组对虾肠道中黄杆菌纲(Flavobacteriia)、γ变形菌纲(Gammaproteobacteria)、放线菌纲(Actinobacteria)及噬纤维菌纲(Cytophagia)是明显高于蔗糖组与葡萄糖组。研究表明,凡纳滨对虾对淀粉和蔗糖的吸收利用优于葡萄糖和果糖,同时,淀粉和蔗糖对凡纳滨对虾肠道菌群多样性存在一定的影响,淀粉和蔗糖为凡纳滨对虾饲料中的适宜糖源。     

黄淮海玉米品种九玉Y02的选育和应用

由九圣禾种业有限公司筛选的适宜黄淮海地区推广的优秀玉米杂交种九玉Y02,其具有高产、稳产、广适、抗病性好、耐密植、籽粒容重高的特点。九玉Y02于2015年和2016年参加审定试验,顺利完成所有审定程序,于2018年通过审定。通过叙述品种的选育过程、品种在审定试验中的表现、适宜推广的区域等,为新品种的选育提供借鉴,同时也为九玉Y02的推广销售提供参考。     

平凉红牛产业链发展成效、存在问题及对策建议

平凉红牛产业是全市聚力打造的九大重点产业链之一,是富民强市的主导产业,也是助推脱贫攻坚成果同乡村振兴有效衔接的传统特色优势产业。通过调查研究、比对分析平凉红牛产业链发展成效,指出了产业链发展中存在龙头企业少、链主企业规模小、产业规模不大、产值不高、产业效益不明显等新问题,提出了行之有效的发展对策与建议。旨在为平凉红牛产业链高质量发展提供决策与参考。     

上海市三大饮用水源地水库鳙(Aristichthys nobilis)肌肉特性的比较

为了探究不同运营管理模式、不同水库鳙(Aristichthys nobilis)肌肉的生化和物理特性差异。采用常规生化分析法和组织学特性分析法,对上海三大饮用水源地青草沙、陈行、金泽水库2龄鳙肌肉的脂肪、蛋白、氨基酸、脂肪酸等生化特性和质构等物理特性进行了分析。结果显示：鳙肌肉的粗蛋白含量在18.11%~18.63%之间、粗灰分1.27%~1.34%之间,二者在三个水库之间均无显著差异(P>0.05);青草沙水库鳙肌肉的pH值(6.45%)和水分(80.69%)含量显著高于陈行(6.27%、78.43%)、金泽水库(6.24%、79.28%)(P<0.05);金泽水库鳙的粗脂肪含量(0.76%)显著高于青草沙(0.29%)、陈行水库(0.28%)(P<0.05);三个水库鳙肌肉检出的氨基酸和脂肪酸均为17种,金泽水库(10.49%)鳙肌肉的总SFA含量显著高于青草沙 (8.46%)、陈行水库(9.30%)(P<0.05);质构指标除黏附性没有显著差异(P>0.05),其余指标如硬度、弹性、凝聚性等均有显著差异(P<0.05);金泽水库鳙的肌细胞数量、长径显著低于青草沙、陈行水库(P<0.05)。研究表明,不同水库环境对鳙肌肉的蛋白、灰分含量影响差异不显著,对脂肪含量、肌纤维组织学特性影响差异显著,三个水库鳙肌肉均为优质蛋白源,陈行水库鳙肌肉的营养价值更高。     

多效唑对芒果炭疽病调控作用研究

摘 要 多效唑作为生长调节剂主要用于促进植物成花和座果等,但其是否能减轻植物病害的发生尚缺乏实验验证。本文以芒果炭疽菌(Colletotrichum gloesporioides)为样本,采用分生孢子萌发与离体叶片接种等方法,测定多效唑对芒果炭疽病的调控作用。结果表明供测试的700mg/L、800mg/L、900mg/L、1000mg/L 4个浓度的多效唑药液都能一定程度影响炭疽病菌在芒果离体叶片上的扩展,但800mg/L多效唑能明显减轻炭疽病病症。800mg/L多效唑在玻璃纸上能够抑制芒果炭疽菌菌丝生长,致使孢子畸形,不形成附着胞,但其在寄主叶片上对病原菌生长影响较小,病菌孢子形态正常,能萌发产生附着胞,但附着胞产生的时间晚于对照1d,说明药剂在寄主上对病原菌的抑制作用不强烈。因此,一定浓度的多效唑能减轻病原菌对寄主的危害,但其可能主要通过调控寄主抗病性抑制病菌的侵染。