检测鸡TRIM25蛋白的免疫组化方法

为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免疫组化方法,对鸡肺、脾、肝组织中TRIM25蛋白进行检测。结果显示,克隆的鸡TRIM25抗原基因大小为1 012bp,构建的重组表达质粒能够在大肠杆菌中稳定表达,经纯化后的重组蛋白质能够诱导兔和小鼠产生效价为1∶106以上的血清抗体,该血清抗体免疫组化检测发现鸡肺、脾和肝组织中均有不同程度的TRIM25蛋白表达,在肺组织中主要存在肺泡周围的内皮细胞、淋巴细胞等的细胞质内;脾组织主要出现在脾淋巴细胞和血管内皮细胞等的细胞质中;肝组织中主要出现在肝小叶肝细胞、淋巴细胞以及血管内皮细胞细胞质中。该研究为深入研究鸡TRIM25蛋白的组织分布、动态表达和生物学活性提供物质基础和方法依据。     

水泡性口炎病毒2种血清型核衣壳蛋白的原核表达及生物信息学分析

用RT-PCR方法从水泡性口炎病毒(vsv)扩增印第安纳(Indiana)和新泽西(New Jersey)血清型核蛋白N基因,分别克隆至pMD20-T载体进行序列鉴定及生物信息学分析.构建重组表达质粒VSV-IN-pBCX和VSV-NJ-pB-CX,并经SDS-PAGE和Western-blot鉴定表明2种血清型病毒核衣壳蛋白N基因在BL21(DE3)宿主菌中成功表达,重组蛋白相对分子质量约为82 000,并能够与各自对应血清型阳性血清反应.这表明2个重组蛋白具有良好的抗原性,可作为用于建立水泡性口炎血清学诊断方法的诊断抗原.     

99%绿颖乳油对柑橘介壳虫的防治效果

柑橘介壳虫是永春县柑橘重要害虫之一,危害叶片、果实,一般百叶平均156头,严重(失管)的百叶平均312头,对当年和来年树势及产量造成严重影响.每年给当地柑橘生产带来不同程度的经济损失.一些果农由于防治不当造成用药次数增加或加大农药用量,不但增加了生产成本,而且降低了果品质量,同时造成农药残留问题.因此,为了更好地防治介壳虫,生产绿色安全果品,今年在县猛虎场柑橘园做了99%绿颖乳油对柑橘介壳虫的防效试验.     

螨危24%悬浮剂对柑桔红蜘蛛防治效果示范试验

柑桔红蜘蛛是我县柑桔生产上的主要虫害,各个柑桔园均有不同程度的发生.受害重的平均百叶9.87头,虫叶率100%,一般平均百叶5.57头,虫叶率100%,对当年和来年树势及产量造成严重影响.为了更好地防治红蜘蛛,我站进行螨危24%悬乳剂防治柑桔红蜘蛛的效果和对柑桔的安全性试验.     

芦柑柑桔砂皮病的综合防治技术

柑桔砂皮病是永春县芦柑生产上的重要病害之一,特别是东关镇果园发生最严重.多年来,由于果园生态环境变化,生产技术变迁,市场开放与对外交流增多,柑桔砂皮病危害加剧,加上果农经验不足,疏于防治,造成蔓延传播.每年发生面积330公顷,轻的损失5%～10%,中等损失20%～30%,重的损失80%以上,严重影响果实外观品质与商品价值,减少了芦柑出口量.通过采取综合防治措施,柑桔砂皮病从叶发病率100%降到1%,果发病率从100%降到15%,可挽回产量0.15万吨.现将其发生特点及综合防治措施总结如下:     

用地高辛标记的PCR－ELISA技术快速检测转基因鱼

取含有小鼠重金属螯合蛋白（mMT)基因启动子及人生长激素（hGH)基因的鱼样品，以Qiagene核酸纯化技术对鱼组织DNA进行纯化。常规PCR检测显示，mMT启动基因和hGH基因的PCR产物分别为240bp和130bp，与设计相符。PCR产物的核酸测序结果证实其扩增产物具特异性。地高辛-PCR（Dig-PCR)标记反应显示，2个基因均产生1条Dig标记的特异产物带。Dig-PCR-ELISA检测敏感性试验显示，对mMT启动子和hGH基因的检测敏感性可达10^-3，与常规PCR结合琼脂糖胶电泳检测方法相比，检测敏感性可提高至100-1000倍。试验证明，针对mMT和hGH基因所建立的Dig-PCR-ELISA技术特异可靠。     

柑桔桔小实蝇的发生与防治

1发生特点 桔小实蝇没有明显的越冬现象，全年均能诱到成虫。在果实转色后（9-11月），虫口数量急剧上升，果实受害严重。每头雌虫可产卵200～400粒，每孔内产卵5～10粒，卵期3天左右。轻的落果率为0．5％，严重的落果率达65％～87％，甚至绝收。在与番石榴、青枣、柚子、杨桃等混栽的柑园受害最为严重，低海拔比高海拔的柑园受害严重。     

作物缺素症状

营养元素的丰缺对农作物的影响很大,从农作物长相特征我们可大致判断农作物缺乏什么营养元素。根据我们的经验和试验结果,列举农作物缺乏某些营养元素的症状,供参考。     

鸡毒支原体和滑液支原体的种特异性寡核苷酸探针

支原体可使家禽饲养蒙受重大经济损失。从家禽中已至少分离到16种支原体，其中以鸡毒支原体（Myc叩办。gallisePticum）和滑液支原体（Mxconlasmasynoviae）最为重要，可引起鸡和火鸡严重的呼吸道病。通常，对支原体的防治策略是直接扑灭种禽中的致病支原体。因此，需要确定种禽是否受到致病支原体的感染。但现行的支原体的鉴定方法其准确率和灵敏度均不高，需要发展新技术。本研究设计了两种rDNA寡核昔酸探针，通过直接滤膜杂交法（directjilterhybridizationexperhoent）分别用于鉴定鸡毒支原体和滑液支原体。借助计算机软件分析，将鸡…     

实行动物检疫证明网络机打出证，提升动物卫生监督信息化管理水平

动物检疫证明网络机打出证系统是在我市畜牧业快速发展,出栏动物大幅增加,动物卫生检疫监督管理相对置后的情况下,为了提高动物检疫监督管理水平,更好地履行动物卫生监管职责,通过多方研究探索实践开发出来的。实施动物检疫证明网络机打出证,解决了很多以前无法解决的问题,弥补了手工出证的不足,实现了规范出证、便捷高效、网络查询、安全追溯、有效防伪、准确统计。为动物卫生及动物产品安全监管提供强有力的支撑平台和工作手段,加