鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立和应用

为建立特异性和敏感性较高的鸭坦布苏病毒(DTMUV)抗体检测方法,采用原核表达系统对DTMUV E蛋白的DⅢ结构域进行了双串联融合表达,SDS-PAGE电泳结果显示目的蛋白大小约25 Ku。Western blot结果显示,经亲和层析纯化的重组蛋白能与DTMUV阳性血清发生特异性反应。以纯化的重组DⅢ蛋白作为包被抗原,初步建立了检测DTMUV血清抗体的间接ELISA方法。采用梯度稀释法对ELISA各种反应条件进行优化,确定最适工作条件。重组抗原最适包被浓度为5μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶100,兔抗鸭酶标抗体最适稀释度为1∶1000;抗体临界值S/P≥0.336判定为阳性,S/P≤0.287判定为阴性,介于两者之间为可疑。该方法检测禽流感病毒、鸭源新城疫、鸭甲肝病毒、鸭圆环病毒、鸭细小病毒、经典呼肠孤病毒及新型鸭呼肠孤病毒等血清均为阴性,4个批次批内与批间重复试验的OD值变异系数分别为6.21%~7.27%和3.4%~7.2%,显示该法具有很好的特异性、稳定性和重复性。用建立的间接ELISA与中和试验分别对108份疑似鸭坦布苏病血清样品进行检测,两种方法的阳性符合率为83.3%。     

1株伪狂犬病病毒的基因变异及其对小鼠的致病性分析

本研究旨在了解我国猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)流行毒株的分子遗传变异及毒力特点。对1株分离自1个接种了Bartha-K61疫苗的规模猪场的PRV ZJ株进行了主要糖蛋白基因序列(gB、gC和gE)的测定分析及对6周龄BALB/c小鼠的致病性研究。遗传变异分析显示,该毒株与我国2012年后的流行毒株高度同源,具有变异毒株基因特征,但gE基因的510位氨基酸出现了不同于变异株的独特变化S⁵¹⁰G。ZJ株对小鼠具有较高的致病性,攻毒小鼠呈现典型的神经症状,以100 LD₅₀感染小鼠,第5天死亡率达100%。本研究为进一步探索该病毒的毒株变异特点与致病机理奠定基础。     

探索农科类院校形势与政策教育研究

随着全球化进程的推进和中国改革开放的深化,中国发展面临诸多新情况和新问题。高等院校有责任和义务开展形势与政策教育引导当代大学生认清国内外形势,使他们树立正确的世界观、人生观和价值观,成为中国特色社会主义事业的合格建设者和可靠接班人。农科类院校因其自身专业特点,在形势与政策教育方面既存在与其他高等院校相同的地方,也有其特殊性。通过梳理和分析农科类院校形势与政策教育研究的意义、现状、内容及目标,研究建立具有农科类院校特色的形势与政策教育模式,探索培养具有时代责任感和历史使命感的当代大学生的新途径、新方法。     

违反生猪屠宰管理法律规范之案由剖析

本文针对目前屠宰行政执法中存在的案由不规范问题,就违反《生猪屠宰管理条例》和《生猪屠宰管理条例实施办法》的案件进行剖析,对其中涉及的25条案由加以归纳,为规范屠宰执法行为提供参考。     

北方寒地玉米大垄高产栽培技术

正北方寒地玉米大垄高产栽培技术是通过测土配方施肥、优良品种选用、通透栽培以及植保等先进、适用、成熟技术的综合配套使用,使等量经济成本效益最大化,有效提高了北方寒地玉米的产量与质量,增加了农民收入,为玉米各生产产业的扩大发展提供了坚实的基础。1各项先进、适用、成熟技术的增产机理1.1测土配方施肥技术是玉米增产高效的有力措施在玉米生产过程中,根据玉米需肥规律、土壤供肥性能与肥料效应等条件测土配方施肥,做到氮、磷、钾及微量元素合     

纤维素降解菌的筛选及其酶学性质研究

从霉变甘蔗叶中分离到1株纤维素降解菌,对其部分重要培养条件和酶学性质进行了研究,结果表明:该降解菌最适培养条件为碳源羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、碳源浓度2.0%、氮源酵母粉、培养温度20℃、培养p H 6.5,培养时间96 h。该降解菌所产滤纸酶和CMC酶的酶活性最适温度为40℃,最适p H为5.5。     

芦笋秆栽培灵芝试验简报

芦笋属百合科天门冬属，是一种多年草本植物，可食部分为地上部嫩茎。芦笋营养丰富，具有保健药用价值。经我省科研人员的努力，芦笋的栽培面积已越来越大，并作为我省农村产业结构调整的一个主要品种进行推广，因而芦笋秆资源较丰富。为了利用我省的芦笋秆资源，我们进行芦笋秆栽培灵芝可行性试验，现将结果报告如下：     

河北省实行动物疫病风险监管的几点体会

实施动物疫病风险管理是控制动物疫病的一种有效方法,河北省对此开展了积极的探索,并取得显著成效。本文简要介绍了《河北省动物疫病风险评估与分级管理办法》和相关做法,探讨了实施动物风险管理在贯彻落实《动物防疫法》、实现动物疫病的科学监管、增强相对人的动物疫病风险管理意识、提高产业化水平、维护动物卫生监督执法人员的合法权益等方面的重要作用。     

浙江地区鹅星状病毒分离鉴定及其衣壳蛋白多克隆抗体的制备

鹅星状病毒(GAstV)是当前鹅养殖业的重要病原,易引起雏鹅内脏痛风症状和死亡,造成巨大经济损失。于浙江省内采集30份病料,进行核酸检测、病原分离和测序,并克隆其ORF2序列至pET-28a原核表达载体,转化BL21菌株后经诱导获得衣壳蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果显示,临床死亡雏鹅剖检均发现典型内脏痛风症状,核酸检测鉴定为鹅星状病毒阳性,且出现不同基因型鹅星状病毒混合感染情况。共分离得到ZJC14和ZJLD20两个毒株,其中,ZJLD20在鹅胚和LMH细胞中均稳定增殖,但ZJC14并不能适应LMH细胞。病毒基因组测序显示,ZJC14与ZJLD20亲缘关系较远,ZJC14属于GAstV-Ⅰ基因型,而ZJLD20为GAstV-Ⅱ基因型。重组表达载体pET28a-ORF2诱导后获得纯化目的蛋白,经免疫成功制备兔源多克隆抗体,该抗体可与目的蛋白结合。此外,间接免疫荧光和Western-blot试验结果显示,ZJLD20衣壳蛋白制备的多克隆抗体可与病毒结合反应。研究成果有利于后续对该病原致病能力的研究,同时,试验制备的ORF2衣壳蛋白与多克隆抗体为鹅源星状病毒感染的诊断试剂开发奠定了基础。