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北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23 kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1.设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆了北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506),将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-N3-purH,将其导入北京油鸡体外培养细胞中.转染后24、48和72 h,pEGFP-N3-purH转染率为10.3%～53.2%,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中.随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状.结果表明,构建的北京油鸡肝脏组织cDNA文库符合建库要求. 相似文献
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