利用CODEHOP设计简并引物克隆镰刀菌果胶酶基因片段

利用CODEHOP(Consensus-degenerate hybrid oligonucleotide primers)设计真菌果胶酶基因片段的简并引物,并对设计的多对引物进行筛选,比较了普通PCR和Touchdown-PCR(TD-PCR)程序的扩增效果,并对产物进行了测序、比对和分析。结果表明:利用CODEHOP设计简并引物可信性强,阳性率高,能够从供试菌株中获得与目的片段大小相近的产物。利用TD-PCR程序扩增比普通PCR扩增效果好。扩增产物序列BLASTX比对和分析结果表明,产物片段编码的氨基酸序列与镰刀菌属来源的果胶酶氨基酸片段相似性均超过90%,说明所扩增的序列即为镰刀菌果胶酶基因片段。     

不同树龄苹果园土壤微生物的差异及对苹果砧木生长的影响

以平顶海棠(Malus robusta Rehd.)为试验材料,以4个不同树龄苹果园的土壤为对象,研究了不同树龄苹果园土壤对再植平顶海棠幼苗生长的影响。结果表明,在前茬树龄为3、8、15和24 a苹果园土种植的平顶海棠幼苗比正茬土对照的平均株高分别减少31.22%、46.38%、57.66%和63.10%;再植平顶海棠幼苗地上部干质量分别减少0.96%、57.58%、76.88%和78.10%;地下部干质量分别减少40.38%、48.79%、64.03%和79.43%。在24 a生苹果树土壤中再植海棠幼苗校正发病率达到了72.73%,而在3 a生苹果树的土壤中再植海棠幼苗校正发病率只有18.18%。对不同树龄的苹果园土壤根际细菌和真菌群落结构的差异进行分析,其结果为,随着苹果树龄的提高,根际土壤中真菌种类和数量显著增加,而细菌的种类和数量则随着树龄的增加显著减少。