低血糖素对家兔生长代谢的影响

利用低血糖素饲喂家兔,旨在探讨其对家兔生长代谢的影响。结果表明,试验组与对照组相比,青干草采食量试验第10天平均提高47.66%(P<0.01),第20天提高31.20%(P<0.01)。体增重试验第10天提高126.54%(P<0.05),第20天提高72.79%(P<0.05)。血清葡萄糖水平第10天降低26.57%(P>0.05),第20天降低11.36%(P<0.01)。其血糖动态表现为采食前最低,进食后1 h、2 h、3 h逐渐升高。血清胰岛素水平在第20天提高30.28%(P<0.01),第20天血清氨基氮提高76.14%(P<0.01),血清氨氮提高89.46%(P<0.01)。因此,日粮中添加适量低血糖素能够提高内源性胰岛素水平,促进家兔生长代谢。     

调节胚胎期代谢提高蛋鸡抗热应激能力

应用维生素E、维生素C及普鲁卡因组合的生理调节剂对蛋鸡胚胎期进行调控，试验分为对照组和3个不同剂量组合的试验组，即试验1组（VE＋VC）、试验2组（VE＋普鲁卡因）、试验3组（VE＋VC＋普鲁卡因），研究不同剂量及组合的胚胎调节剂对出壳后母鸡在热应激条件下生产性能、血液指标和卵泡的变化。试验结果显示：试验1组应激前后平均蛋重分别提高7．50％和9．82％（P〈0．01）；热应激期产蛋率提高5．81％（P〈0．05）。试验2组应激前后产蛋率分别提高了7．45％和9．69％（P〈0．01）。试验1、2、3组总产蛋量在应激前后均有提高，尤其试验1组和2组（P〈0．01）。常温期试验1组胰高血糖素和试验3组T4水平分别提高55．52％和10．03％（P〈0．01）；试验1、2、3组热应激期T4水平分别提高28．65％、132．74％和72．79％（P〈0．05）或（P〈0．01）。试验2组热应激期白蛋白水平和常温期葡萄糖水平分别提高27．36％和31．16％（P〈0．05）；试验3组常温期葡萄糖水平提高25．15％（P〈0．05）。试验2组异嗜性粒细胞和H／L的比值下降，单核细胞数上升（P〈0．05）。试验2组卵泡中大白泡和小白泡的数量显著增多（P〈0．05）。以上结果表明，补充适量的Ve、Vc和普鲁卡因能提高蛋鸡抗热应激能力，改善产蛋性能。     

大肠杆菌外膜蛋白F的原核表达、多克隆抗体制备及生物信息学分析

为获得大肠杆菌外膜蛋白OmpF并对其耐药性功能进行研究,通过分子克隆技术构建OmpF蛋白重组表达菌株,利用正交试验法获得OmpF菌株的最佳培养条件和表达条件,采用SDS-PAGE电泳切胶纯化方法获得OmpF蛋白,免疫小鼠获得OmpF蛋白多克隆抗体,Western blotting方法检测多克隆抗体的特异性,使用DNAMAN 8.0与MEGA 5.0软件对OmpF蛋白进行同源性和系统发生分析。结果显示,PCR扩增获得1 089 bp的ompF基因,成功构建pET-32a-ompF载体,其诱导表达产物分子质量为38 ku,与预期大小一致。正交试验获得OmpF菌株的最佳培养条件为葡萄糖浓度为0,转速为230 r/min,装液量为50 mL;最佳表达条件为诱导时菌液OD_(600)为0.5,IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为8 h,温度为28℃。SDS-PAGE切胶纯化获得高纯度的OmpF蛋白后,利用Western blotting证实OmpF蛋白抗血清具有较好的特异性。OmpF蛋白序列系统发生分析发现,OmpF蛋白在不同种类的细菌中具有较高的同源性,OmpF蛋白产生的抗体可能为不同种细菌的感染提供交叉免疫保护作用,并且不同种类细菌中OmpF蛋白可能具有相似的分子功能。     

我国国家公园建设中社区权利新探

国家公园建设中的社区权利是社区面向国家公园建设中其他治理主体的权利,是贯穿于整个国家公园建设全过程的权利,是一种兼具“公权利”与“私权利”色彩的双重权利。国家公园建设中的社区权利可以分为行动权利和接受权利,前者主要包括知情权、评论建议权、信息发布权以及动议权等,后者主要包括接受生活扶助权、获得平等对待权、获得通知权以及获得理由权等。《中华人民共和国宪法》为我国国家公园建设中的社区权利提供了根本性规范依据,相关文件与地方立法则为国家公园建设中的社区权利提供了直接规范依据。     

重组铜绿假单胞菌外膜蛋白D的原核表达与多克隆抗体制备研究

为获得铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD并研究其分子功能。本研究采用分子克隆构建OprD蛋白重组表达菌株,用正交试验设计方法获得OprD菌株的最优表达条件和培养条件,通过SDS-PAGE切胶的方法纯化OprD蛋白,小鼠免疫制备OprD多克隆抗血清,蛋白质印迹法检测抗血清的特异性。使用DNAMan和MEGA软件对OprD蛋白进行同源性和系统发生分析。结果表明,OprD重组载体双酶切、DNA测序鉴定结果、OprD蛋白表达与纯化条带大小分别与预测相符。正交试验获得OprD菌株的最优培养条件为:葡萄糖浓度为0,转速230r/min,装液量为50mL;最优表达条件为:菌液OD600=0.8时加入终浓度为0.3mmol/L的异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),37℃诱导12h。SDS-PAGE电泳切胶纯化获得纯度较高的OprD蛋白。蛋白质印迹法证实OprD蛋白抗血清具有较好的特异性。OprD蛋白序列系统发生分析发现,同菌属细菌存在较高的同源性,并且亲缘关系较近的细菌中OprD蛋白可能具有相似的分子功能。     

嗜水气单胞菌外膜蛋白AH6169的生物信息学分析及其原核表达

为嗜水气单胞菌外膜蛋白AH6169亚单位疫苗的研究奠定理论基础,采用生物信息学方法分析了AH6169的理化性质、结构与功能;分子克隆构建AH6169表达菌株,正交试验筛选其最佳诱导表达条件;通过包涵体洗涤和SDS-PAGE电泳切胶纯化AH6169蛋白;小鼠免疫蛋白制备多克隆抗血清;Western blotting鉴定抗...     

大肠杆菌免疫蛋白OmpA生物信息学分析及表位多肽疫苗设计

为进一步提高大肠杆菌外膜蛋白(OmpA)的免疫效果,对大肠杆菌的OmpA进行生物信息学分析并设计其表位多肽重组疫苗。运用DNAMAN 8.0和MEGA 5.0分别对OmpA进行同源性及系统发生分析,通过ExPASy-ProtParam对OmpA的理化性质进行分析,分别采用Signal P 4.1与TMHMM Serverv.2.0对OmpA进行信号肽和跨膜结构预测,应用SOPMA和SWISS-MODEL对OmpA进行二级结构和三级结构预测,通过String进行蛋白质互作网络分析,使用BepiPred 1.0和ABCpred方法预测OmpA的B细胞抗原表位,利用神经网络法与MHC-Ⅱ类分子结合肽在线预测程序预测OmpA的CTL和Th细胞抗原表位,采用DNASTAR.Lasergene.v 7.1拼接获得优势抗原表位。进化关系结果显示,OmpA在肠道菌属间遗传进化关系较近,OmpA抗体可能为不同种肠道细菌的感染提供交叉免疫保护。OmpA为亲水性蛋白质,第1—21位氨基酸为信号肽位置,具跨膜结构。OmpA的二级结构中以无规则卷曲(45.66%)、α-螺旋(31.79%)、β-片层(16.18%)和β-转角(6.36%)为主,其三级结构为桶状结构。OmpA与par、coa蛋白之间存在互作。OmpA可能有4个B细胞抗原表位,1个CTL细胞抗原表位,1个Th细胞抗原表位,且重组获得抗原性较好的OmpA表位多肽。     

小麦面筋蛋白对山羊瘤胃运动的影响

采用活体瘤胃运动测定装置，测定山羊日粮中添加小麦面筋蛋白条件下瘤胃运动的变化。结果表明；4只山羊试验期与对照期相比，瘤胃平滑肌收缩力平均提高31．2％，差异极显著（P〈0．05）。15min内，瘤胃平均蠕动持续时间延长34．1％，差异显著（P〈0．05）。瘤胃蠕动频率下降25．1％，差异显著（P〈0．05）。建立的瘤胃运动检测装置能够灵敏地检测山羊瘤胃运动变化规律。同时利用家兔小肠体外培养装置检测到小麦面筋蛋白通过瘤胃微生物降解作用生成的阿片肽活性，为反刍动物瘤胃代谢调控的研究提供理论依据。     

鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白P5的原核表达、免疫保护及抗血浆杀菌作用研究

研究鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白P5的免疫学功能,为相关疫苗开发奠定理论基础.采用生物信息学方法分析P5的理化性质;分子克隆构建P5表达菌株并确定其最佳诱导表达条件,包涵体洗涤和SDS-PAGE电泳切胶纯化P5蛋白,并免疫小鼠制备P5抗血清;Western blotting检测抗血清特异性与效价,免疫酶联法模拟P5抗血...     

鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白TolC的原核表达及抗原性分析

探究鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白TolC的免疫原性与抗原性,评价其免疫学功能,以期为嗜水气单胞菌亚单位疫苗的开发提供理论依据.采用生物信息学方法预测TolC蛋白的理化性质,分析其菌属间同源性与进化关系,构建TolC蛋白表达菌株并确定其最佳诱导表达条件,包涵体洗涤和SDS-PAGE电泳切胶纯化TolC蛋白,免疫小鼠制备T...