以bar基因为筛选标记转基因大豆的获得及鉴定

在已优化的大豆农杆菌介导转化体系基础上,以发芽1～2 d的成熟大豆子叶节为外植体,以bar基因作为筛选标记基因,采用农杆菌介导法将胰蛋白酶抑制剂基因(Sporamin)和几丁质酶基因(Chitinase KDEL)转入大豆品种YC-2中.T0代得到生根苗115株,其中采用除草剂叶片涂抹法和目的基因PCR检测法鉴定出阳性...     

不同药剂处理对瑞都红玉葡萄果实品质的影响

探究了不同药剂GA_3(赤霉素)、CPPU(吡效隆)和TDZ (噻苯隆)处理对瑞都红玉葡萄果实膨大及果实品质的影响。以2年生瑞都红玉葡萄为试材,在盛花期采用不同药剂组合浸蘸花穗,花后两周采用不同药剂组合浸蘸花穗,研究不同激素组合处理对瑞都红玉葡萄生长及果实品质的影响。结果表明:不同处理的果实横纵径、单果重、可溶性固形物含量均有所不同;各处理间果形指数无显著差异,趋于长椭圆形。瑞都红玉葡萄在盛花期用GA_(3 )25 mg/L,盛花后两周GA_(3 )25 mg/L+CPPU 2 mg/L处理的综合表现最佳,可有效提高果实商品性,增加经济效益。     

农杆菌介导的RNAi CP基因在大豆中的转化

花叶病毒(soybean mosaic virus, SMV)病是大豆主要病害之一,生产上常采用种植抗性品种方法来防治。本研究以RNA干扰花叶病毒衣壳蛋白(coat protein, CP)基因为表达载体,Bar基因作为筛选标记基因,成熟子叶节为外植体,采用农杆菌介导法获得了22株T₀代转基因大豆生根苗,经草丁膦涂抹、Bar试纸条和PCR法鉴定,获得RNAi CP转基因植株18株;对转基因植株T₁代的遗传分析表明,外源基因能够稳定遗传到下一代且符合孟德尔遗传规律;T₁代Southern杂交表明,导入的干扰片段为单拷贝;花叶病毒摩擦接种表明RNAi CP转基因大豆植株具有抗花叶病毒特性;摩擦接种后3周,DAS-ELISA检测进一步表明,RNAi CP转基因植株花叶病毒检出率仅为7.69%,而非转基因植株为100%。这表明RNAi花叶病毒CP基因可用于抗大豆花叶病毒的研究。