猪痢疾的诊疗建议

猪痢疾为猪密螺旋体感染而诱发的肠道传染病，此病目前无明显季节性，传播缓慢，流行时间长，长期危害猪群，影响猪场养殖效益。此病传染源为病猪、康复猪、隐性带菌猪，排出体外的致病菌可经消化道传播感染。典型症状为下痢、便血、消瘦、病畜脱水、皮毛暗淡无光等等。根据病程长短，有急性、亚急性、慢性之分。此病的防重于治，具有更好的现实意义。日常应注意：改善猪群管理，预控各类不良应激导致的免疫抑制；定期检测病原，净化改良猪群；一旦有疑似病例，及早全群给药，等等，要点性知识以供参考和借鉴。     

应用正交设计优化南苍术快速繁殖培养基的研究(英文)

[目的]为保护野生苍术资源,并为南苍术工厂化生产提供技术指导。[方法]以南苍术(Atractylodes lancea(Thunb.)DC)种子为材料得到无菌试管苗,应用正交试验法L(934)研究6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、激动素(KT)及其配比对南苍术无菌苗增殖的影响;NAA浓度对南苍术苗生根的影响;以泥土、河沙、棉籽壳为材料,采用正交试验方法设计9种轻型基质配方,研究其对南苍术生长的影响。[结果]适合南苍术试管苗增殖的培养基为MS+6RR鄄BA2.0mg/L+NAA0.4mg/L+KT0.4mg/L;适合南苍术生根的培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L;最适基质配比为泥土:河沙:棉籽壳(体积比)=3:3:2。[结论]筛选出了南苍术增殖培养,生根的最佳配方,基质的最佳配比,为苍术资源的实验室保存和种苗工厂化生产提供了技术依据。     

cry基因保守序列克隆及其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达

[目的]对cry基因保守序列进行克隆,并使其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。[方法]根据NCBI数据库信息设计引物序列,采用PCR技术从抗虫棉基因组DNA中扩增出抗虫基因cry的保守序列,构建重组载体并转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中,利用pGEX原核表达系统诱导蛋白表达。同时,分析了不同IPTG浓度及不同诱导时间对蛋白表达量的影响。[结果]扩增出抗虫基因cry的两段保守序列,长度分别为304和853 bp;SDS-PAGE检测结果显示,经IPTG诱导后重组质粒pGEX-4t-1-304和pGEX-4t-1-853成功地表达了大量GST融合蛋白,分子量分别为39和62.4 kDa,与预期结果一致;确定了IPTG最佳诱导浓度为0.15 mmol/L,最佳诱导时间为7h。[结论]为今后检测转Bt基因农作物奠定了基础。     

正交设计优化南苍术快速繁殖培养基的研究

[目的]保护野生苍术资源,并为南苍术工厂化生产提供技术指导。[方法]以南苍术[Atractylodes lancea(Thunb.)DC]种子为材料得到无菌试管苗,应用正交试验法研究6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、激动素(KT)及其配比对南苍术无菌苗增殖的影响;同时研究了NAA浓度对南苍术苗生根的影响;以泥土、河沙、棉籽壳为材料,采用正交试验法设计9种轻型基质配方,研究其对南苍术生长的影响。[结果]适合南苍术试管苗增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+KT 0.4 mg/L;适合南苍术生根的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L;最适基质配比为泥土∶河沙∶棉籽壳=3∶3∶2(体积比)。[结论]筛选出了南苍术增殖培养和生根的最佳配方,以及基质的最佳配比,为苍术资源的实验室保存和种苗工厂化生产提供了技术依据。     

草胺膦浓度对黄芩植株生长和愈伤组织生长分化的影响

通过研究除草剂草胺膦对黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)植株生长和愈伤组织生长分化的影响,发现草胺膦对黄芩植株生长和愈伤组织生长分化具有强烈的抑制作用。并在此基础上找到了合适的草胺膦筛选压,对于黄芩植株生长是30mg/L;对于黄芩愈伤组织生长是3.5mg/L;对于黄芩愈伤组织分化是3.0 mg/L。     

cry基因保守序列克隆及其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达(英文)

[目的]对 cry 基因保守序列进行克隆,并使其在大肠杆菌 Rosetta(DE3)中进行表达。[方法]根据 NCBI 数据库信息设计引物序列,采用PCR 技术从抗虫棉基因组 DNA 中扩增出抗虫基因 cry 的保守序列,构建重组载体并转化到大肠杆菌 Rosetta(DE3)菌株中,利用 pGEX 原核表达系统诱导蛋白表达。同时,分析了不同 IPTG 浓度及不同诱导时间对蛋白表达量的影响。[结果]扩增出抗虫基因 cry 的两段保守序列,长度分别为304 和 853 bp;SDSPAGE 检测结果显示,经 IPTG 诱导后重组质粒 pGEX4t1304 和 pGEX4t1853 成功地表达了大量 GST 融合蛋白,分子量分别为39 和 62.4 kDa,与预期结果一致;确定了 IPTG 最佳诱导浓度为 0.15 mmol/L,最佳诱导时间为 7 h。[结论]为今后检测转 Bt 基因农作物奠定了基础。