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对从含有鸡毒霉形体H3株TM-1基因的大肠埃希氏菌DH5α中提取的质粒,进行EcoR Ⅰ和Sα/Ⅰ双酶切,获得了大约为786bp的目的片段。将此片段与经EcoRⅠ和Sαl Ⅰ双酶切的线性原核表达载体pET-30a-1连接。转化宿主菌BL21(DE3),筛选阳性克隆。提取质粒,经酶切、PCR扩增和测序分析确证其插入正确,从而构建成了重组表达载体。阳性克隆用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析,证明其分子质量约为29ku;Western-blotting分析表明,该蛋白可被鸡毒霉形体阳性血清识别,具有生物学活性。 相似文献
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4种草本植物浸提液对长柄扁桃种子萌发及幼苗生长的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为恢复长柄扁桃群落,促进长柄扁桃人工林生长,以苜蓿、沙打旺、红豆草、苦豆子4种多年生草本为供体植物,长柄扁桃为受体植物,研究草本植物浸提液对长柄扁桃的种子发芽率、发芽势、苗高、根长、根鲜重、苗鲜重的影响。结果表明,苜蓿,沙打旺浸提液在浓度为30mg·mL~(-1)时对长柄扁桃种子发芽率有显著促进作用;在浸提液浓度为5mg·mL~(-1)时,长柄扁桃发芽势在苦豆子及苜蓿浸提液作用下显著高于对照;而红豆草浸提液对种子萌发有抑制作用。长柄扁桃幼苗苗高,除在红豆草浸提液浓度60mg·mL~(-1)时,其余处理均有一定程度促进作用;长柄扁桃的苗鲜重在苦豆子浸提液5mg·mL~(-1)时达到所有处理的最大值(270.94mg)。各草本植物浸提液除沙打旺浸提液对根长具有促进作用外,其余浸提液都对根长生长有抑制作用。长柄扁桃幼苗根鲜重在各处理中,红豆草浸提液有抑制作用但差异不显著,其余草本植物均有促进作用。综合分析表明,苜蓿、沙打旺、红豆草及苦豆子4种草本植物均对长柄扁桃种子萌发幼苗生长具有化感作用且存在浓度效应。苜蓿、沙打旺、苦豆子3种植物可促进长柄扁桃种子萌发和幼苗生长,适合与长柄扁桃进行品种搭配形成林草复合系统,进行沙区矿业迹地植被建设及长柄扁桃群落恢复。 相似文献
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抗菌肽CecropinB对人工感染大肠杆菌雏鸡的治疗效果研究 总被引:1,自引:1,他引:0
以1日龄来航蛋雏鸡为试验对象,研究重组抗菌肽CecropinB治疗雏鸡大肠杆菌感染的效果.120只雏鸡分6个组,每组20只,其中不同剂量抗菌肽治疗组又分为口服和肌内注射两个不同的处理,每个处理10只.致死剂量大肠杆菌肌内注射24 h后,肌内注射和口服不同浓度的重组CecropinB抗菌肽,连续治疗5 d.结果表明,重组抗菌肽CecropinB对大肠杆菌病有较好的治疗效果.其中高剂量(0.75 mL)口服组的效果最佳,治愈率达到80%,中剂量(0.5 mL)口服组与高剂量肌内注射组治愈率同为70%.中剂量肌内注射组与环丙沙星组效果一致,治愈率达到60%,低剂量抗菌肽治疗组治疗效果不如上述所有治疗组.与感染对照组相比,所有组别的雏鸡死亡率显著降低. 相似文献
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抗菌肽天蚕素B基因及其串联体在毕赤酵母中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点.亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用Sac Ⅰ酶切使之线性化,采用电击法转化毕赤酵母SMD1168,转化子用小瓶发酵.经Tricine-SDS-PAGE检测,在α信号因子的引导下,表达产物可以分泌到培养基中,且具有明显抑菌活性. 相似文献
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通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点.亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用Sac Ⅰ酶切使之线性化,采用电击法转化毕赤酵母SMD1168,转化子用小瓶发酵.经Tricine-SDS-PAGE检测,在α信号因子的引导下,表达产物可以分泌到培养基中,且具有明显抑菌活性. 相似文献
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为揭示古茶园土壤肥力特征及其对土壤微生物的影响.以森林土壤为对照,对云南景迈山、布朗山和南糯山古茶园和现代茶园土壤表层(0~20cm)的pH值,阳离子交换量(CEC),有机质(SOM)与氮磷钾养分分析和土壤微生物类群培养进行了研究.结果表明:茶园土壤pH值在4.30~4.75之间,南糯山茶园和景迈山现代茶园的土壤pH值显著高于森林土壤,布朗山古茶园的土壤pH值也显著高于现代茶园,并且各茶园土壤的CEC均显著低于森林土壤;3座茶山古茶园土壤SOM,全氮(TN),全磷(TP),碱解氮和速效磷质量分数显著高于现代茶园;茶树种植年限对茶园土壤pH值,CEC和各养分质量分数没有一致性影响规律;茶园土壤细菌、真菌和放线菌的数量普遍高于森林土壤,并且微生物的总数量:现代茶园高于古茶园,但各微生物数量与茶园土壤养分质量分数之间相关性无统计学意义.植茶和植茶年龄的增加并未加剧茶园土壤酸化,茶园土壤酸化可能与土壤钾素营养水平关系密切;与现代茶园相比,古茶园良好的小气候环境、低强度生产模式和较小干扰栽培管理是古茶园土壤肥力持续利用和微生物群落多样性的基础,将为现代茶园土壤管理和调控提供理论依据. 相似文献
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天蚕素类杂合肽cecropinA-magainin突变体的合成以及在毕赤酵母中的分泌表达 总被引:1,自引:1,他引:0
根据天蚕素类抗菌肽作用机制假说,设计引物对前期构建成功的载体天蚕素类杂合肽cecropinA-magainin进行定点突变,使其生成杂合肽的衍生物,测序正确后转化Pichia pastoris受体菌SMD1168,在醇氧化酶(AOX)启动子调控下,分子质量约119ku的cecA-mag杂合抗菌肽突变体获得表达,并通过琼脂扩散试验对表达产物的抑菌活性与cecA-mag进行了比较。结果表明,突变体对金黄色葡萄球菌抑菌活性比cecA-mag提高了1.2倍。 相似文献