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为了研制新型有效安全的牛坏死杆菌病亚单位疫苗和诊断试剂,试验利用PCR扩增技术获得了牛坏死杆菌H05菌株hly基因的全长及5个相互重叠的截短片段的核苷酸序列,并利用原核表达载体p ET-32a对hly基因的5个截短片段进行了表达和抗原性分析。结果表明:hly-2、hly-3和hly-4片段获得了成功表达,且hly-2(aa 278~567)、hly-3(aa 566~888)和hly-4(aa 887~1163)重组蛋白能够与牛坏死杆菌多克隆抗体反应。说明hly-2、hly-3和hly-4可以用于研制新型牛坏死杆菌病亚单位疫苗和诊断试剂。 相似文献
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中草药饲料添加剂与绿色生态畜牧业 总被引:17,自引:0,他引:17
抗生素作为饲料添加剂在饲料工业中的应用已有 40多年历史,曾对预防动物疾病、促进动物生长及提高养殖业产量起到了积极的作用。但是,近年来一些科学研究认为,人类健康常见的癌症、畸形、抗药性和某些中毒现象与肉、蛋、奶中的抗生素、激素和其他合成药物的残留有关,而提出限制抗生素的使用。最近世界卫生组织正式提出抗生素不可用于人类以外的领域,如在动物中使用。开发和推广无抗生素绿色饲料及添加剂即绿色生态畜牧业越来越受到人们的重视和关注。于是,人们的目光又开始转向天然的中草药。因为在中草药浩瀚的资源中,完全可以筛… 相似文献
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研究亚硒酸钠在低硒籽鹅体内的药物代谢动力学,为临床合理地用药预防籽鹅缺硒病提供科学依据。选择1日龄健康籽鹅80只(公母各半)作试验动物,复制缺硒动物模型后,口服0.1%亚硒酸钠溶液,分别于投药后第0、1、2、4、8、12、24、48、72、96、144、192 h剖杀籽鹅,采取心脏、肝脏、肾脏、脾脏、胰脏、肌胃、肌肉组织样品,应用2,3—二氨基萘荧光法测定各组织中的硒含量,应用MCPKP软件计算药动学参数。肝脏、肾脏、脾脏、胰脏、肌胃均符合一级吸收二室开放模型,肌肉符合滞后一级吸收一室开放模型,心脏符合一级吸收一室开放模型。硒在肝脏中吸收最快,其次为心脏、肌胃、胰脏、肾脏、脾脏,肌肉吸收最慢;硒的消除都比较慢,最快的为肌肉,其次为心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胰脏、肌胃。亚硒酸钠在低硒籽鹅不同组织中吸收、分布和消耗时间不同,这主要是由于硒缺乏损伤了动物机体的某些组织器官所致。 相似文献
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【目的】奶牛乳房炎是奶牛养殖业中最为常见,同时也是带来经济损失最为严重的疾病之一,其主要病因是细菌感染。奶牛乳腺的固有免疫是抵抗病原菌入侵的第一道防线。NOD2是机体固有免疫模式识别受体核苷酸结合寡聚域(nucleotide-binding oligomerization domain,NOD)蛋白家族中的重要一员,通过识别其特异性配体胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)——一种广泛存在于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁中的成分,而参与抵抗多种病原菌入侵。奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMEC)除泌乳以外,还是奶牛乳腺的免疫屏障。本试验欲探究MDP对BMEC体外生长状态及胞内NOD2表达量的影响。【方法】选取健康泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺腺泡为组织原材料,采用胶原酶Ⅰ消化法结合梯度浓度胰蛋白酶纯化法分离BMEC;使用上皮细胞特异性表达的角蛋白-18(cytokeratin-18,CK-18)及成纤维细胞特异性表达的波形蛋白(Vimentin)抗体,通过免疫荧光技术对纯化后获得的细胞进行鉴定;将BMEC设为6个处理组,分别添加浓度为0(空白对照组)、1、5、10、15及20μg·mL~(-1)的MDP,24 h后显微镜下观察细胞状态,同时提取细胞RNA并反转录为cDNA,采用实时荧光定量PCR方法检测BMEC中NOD2的表达量。【结果】(1)胶原酶Ⅰ消化法结合梯度浓度胰蛋白酶纯化法分离得到的细胞CK-18免疫荧光结果为阳性,而Vimentin反应为阴性;细胞生长状态良好。(2)空白对照组、1、5及10μg·mL~(-1) MDP刺激组的BMEC生长状态良好,无任何肉眼可见变化;15μg·mL~(-1) MDP刺激组可见少量的BMEC脱落;而20μg·mL~(-1)MDP刺激组可见大量BMEC脱落,漂浮,且即使仍贴壁的细胞,其形态也发生了变化。(3)与空白对照组相比,各刺激组细胞NOD2 mRNA的表达量与MDP的刺激浓度呈正相关,即刺激时间为24 h时,随着MDP浓度的增加,BMEC中NOD2受体mRNA的表达量逐渐增加(P0.05)。【结论】成功获得了纯度较好的BMEC,该细胞生长状态良好,可以用于后续试验;虽然BMEC中NOD2受体mRNA的表达量与MDP的刺激浓度呈正相关,但在保持BMEC生长状态正常的前提下,MDP体外刺激浓度应控制在10μg·mL~(-1)以下。这些结果提示我们:当病原菌入侵乳腺时,BMEC可以通过NOD2受体途径参与免疫防御反应,但这种防御能力受细菌数量或毒力强度的影响。即在一定的细菌数量或毒力范围内,随着细菌数量的增加或毒力的增强,奶牛乳腺的免疫防御反应也增强,进而清除外来病原菌;而当细菌数量或毒力强度超过一定范围时,乳腺组织受到严重损伤,免疫防御屏障也随之崩溃,奶牛乳腺局部甚至全身将呈现出明显的临床症状。 相似文献
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为适应高等农业类院校对动物医学专业学生培养的新要求,提高课堂教学质量,黑龙江八一农垦大学基于线上病理学公益平台构建兽医病理学特色教学资源库,利用资源库特征性临床病例,将“PBL+CPC”教学模式引入兽医病理生理学和兽医病理解剖学课堂,通过问卷调查和学生考核成绩对“PBL+CPC”教学模式进行综合评价,分析其存在的问题。结果表明,“PBL+CPC”教学模式能提高学生学习兽医病理学的积极性、自主性和主动性,培养学生的临床思维能力和创新能力。对两种教学模式进行有机融合将成为动物医学专业兽医病理学教学改革的新方向,结合PBL+CPC式教学促进兽医病理学教学启发与创新的发展将是解决传统教学弊端的关键所在。 相似文献
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