ND-IBD二联灭活苗对100日龄种母鸡的免疫效果研究

本试验旨在研究鸡新城疫(Newcastle Disease,ND)-传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)(ND-IBD)二联灭活苗对种母鸡的免疫效果。选用100d种母鸡50只,随机选择25只皮下注射ND-IBD二联灭活疫苗作为免疫组,对照组注射灭菌生理盐水;采集血清检测种母鸡及各批次雏鸡的ND和IBD抗体水平;最后对各批次雏鸡进行攻毒保护试验。结果表明:(1)免疫组种母鸡在100d免疫接种ND-IBD二联灭活苗后,产生了较高的ND和IBD抗体;(2)免疫组和对照组子代ND和IBD抗体水平在20d内呈下降趋势,免疫组免后20d抗体水平高于对照组(P0.01);(3)对照组和免疫组的子代ND和IBD抗体水平在四个时间段逐渐降低,另外,免疫组在种母鸡免后120d,其对应的子代ND和IBD抗体水平分别在第四批次15d和10d,仍然处于合格线之上。结论:种母鸡接种ND-IBD二联灭活苗之后产生了较高的ND和IBD抗体水平,种母鸡得到了很好的免疫,并且其免疫保护力能够持续120d,同时也可以提高子代的母源抗体水平。     

猪流行性腹泻病毒M蛋白的原核表达

本试验设计了M基因的特异性引物,扩增了M基因,成功构建了重组质粒,并转化至Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞中,优化了异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达条件.结果表明,重组表达的融合蛋白Pet-32a-M大小约为43 ku,与预期大小相符.十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,M蛋白为包涵体蛋白,且在IPTG浓度为0.8 mmol·L-1,温度为37℃,诱导时间为8 h的条件下,蛋白表达效果最佳.蛋白免疫印迹检测结果进一步显示,重组蛋白Pet-32a-M在体外可以被成功表达.     

简析非洲猪瘟防控措施

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、高度接触性、高致死率传染病,以家猪、野猪以及蜱虫作为主要的中间宿主.该病对我国生猪规模养殖业造成沉重的打击,引起我国猪肉市场价格持续上涨.目前研制的ASF弱毒疫苗还未应用于生产中,现阶段主要通过切断传播途径进行ASF防控.     

鸭坦布苏病毒LH株E蛋白基因的克隆与结构

采用分子克隆技术对鸭坦布苏病毒(DTMUV)E蛋白基因进行克隆,同时运用多种生物学软件对该基因进行结构和生物学功能预测和分析.结果表明,本试验成功克隆了DTMUV LH株E蛋白基因,该基因包含一个1 500 bp的开放阅读框,编码500个氨基酸.遗传进化树分析表明,该蛋白与我国其他省份分离株的同源性很高.该蛋白的分子质量为54.3 ku,等电点为7.63,不存在信号肽序列,含有17个糖基化位点,有13个丝氨酸、4个络氨酸和8个苏氨酸的磷酸化位点.该蛋白存在跨膜区域,为亲水性蛋白.抗原位点分析表明,该蛋白有21个抗原肽段.本试验结果为E蛋白的生物学功能和致病机理的研究奠定重要的分子理论基础.     

新-法二联灭活疫苗免疫不同日龄商品蛋鸡的效果

为探讨新城疫-传染性法氏囊病二联灭活疫苗(ND-IBD二联灭活苗)对不同日龄商品蛋鸡的免疫效果,选择360只1日龄商品蛋鸡,分别于1、7日龄接种ND-IBD二联灭活苗,对照组接种灭菌生理盐水,分别于21-56日龄,每隔7d采血,分离血清,检测ND和IBD抗体水平,剖检取脾脏与法氏囊观察病变,荧光定量PCR检测免疫因子CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量,并进行攻毒保护试验。结果表明,1、7日龄商品蛋鸡接种ND-IBD二联灭活苗,其ND和IBD的抗体水平均有效提高,且在免疫后可以有效保护IBDV强毒的感染,但7日龄免疫效果更好。免疫因子的mRNA表达量检测结果表明,7日龄接种疫苗的免疫组免疫因子CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量明显高于对照组1日龄。综上,ND-IBD二联灭活疫苗7日龄免疫商品蛋鸡免疫效果更好。