不同核成熟抑制剂对延边黄牛卵母细胞发育的影响

通过在卵母细胞成熟液中单独添加卵母细胞核成熟抑制剂--次黄嘌呤(hypoxanthine,HX)、异丁基甲基黄嘌呤(isobutylmethylxantihine,IBMX),研究其对卵母细胞卵丘扩散程度、极体形态以及后期发育的影响.结果表明:抑制剂(HX、IBMX)组卵母细胞卵丘扩散程度与对照组相比差异不显著(P>0.05),抑制剂组第一极体完整率显著高于对照组,但抑制剂组囊胚发育率与对照组相比差异不显著.最终结果提示,虽然HX和IBMX并未明显提高卵母细胞发育潜力,但仍为两种行之有效的核成熟抑制剂.     

延边奶山羊血清蛋白组分正常值的研究

本试验用醋纤薄膜电泳法测定了延边奶山羊泌乳期母羊和种公羊的血清蛋白各组分的百分比值。其平均值(X±S)分别为白蛋白59.12±3.21、α_1-球蛋白4.31±1.79、α_2-球蛋白2.76±1.21、β_1-球蛋白6.13±1.28,β_2-球蛋白5.01±1.94、γ-球蛋白22.68±6.44,球蛋白总量40.88±8.21,白、球蛋白比值(G/A)0.73±0.28。     

生产转基因五指山小型猪重构胚条件优化

利用体细胞核移植技术是得到具有优良特征及抗病性五指山小型猪快速有效方法,因此将外源基因安全高效导入到供核细胞至关重要。利用不同转染试剂、转染方法对转染效率进行研究,确定G418筛选浓度。同时利用体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白重构胚。结果表明,使用U-023细胞核电转程序能有效介导质粒pCX-mRFP1转染猪耳成纤维细胞,转染率可达到83.33%。确定G418最佳筛选浓度为200μg.mL-1。利用转基因细胞作为核供体生产重构胚卵裂率是83.08%(221/266),囊胚率是11.65%(31/266)。研究结果为生产表达单体红色荧光蛋白五指山小型猪提供参考,从而为人类疾病发病机理研究以及生产人类疾病模型动物奠定了基础。     

孕马血清促性腺激素对狗卵母细胞体外核成熟的影响

[目的]研究孕马血清促性腺激素(PMSG;eCG)对狗卵母细胞体外成熟效果的影响。[方法]采用切割法收集卵巢表面卵丘卵母细胞复合体(COCs),并且随机分为4组,在添加不同浓度的PMSG的基础培养液(含有10%胎牛血清的DMEM)中,5%CO2,38.5℃培养箱内培养48 h。在含有0.1%透明质酸酶的D-PBS中用细小玻璃管剥离卵丘细胞从而获得裸卵,为了鉴别核成熟期,用4%甲醛溶液固定裸卵15 min,然后用10μg/ml Hoechst33342染色、压片,荧光显微镜下观察核形态。[结果]体外培养48 h后,添加PMSG处理组卵丘扩散明显,但发育到MⅠ-MⅡ的比率都没有显著差异(P(0.05)。100 IU/ml PMSG处理组GVBD期率显著低于对照组。[结论]添加PMSG改善了卵丘扩散的效果,但是没有提高核成熟率,需进一步改进狗卵母细胞体外成熟率的培养体系。     

引流取胆熊胆汁及粪中潜血指标的检测分析

随着养熊业的发展,熊的疾病也随之而来,特别是取胆熊的粪及胆汁中潜血现象较普遍,为了查清原因,我们检测了粪及胆汁中潜血指标,现报告如下。 1 材料与方法 1.1 动物来源龙井熊场取胆黑熊24只,平均年龄4岁,体重200千克左右;延吉熊场取胆黑熊36只,平均年龄3岁,体重100千克左右。均在铁     

微滴单培养犬卵母细胞的体外成熟能力及直径、透明带变化规律的研究

为了完善犬卵母细胞体外培养体系,试验以犬卵巢为材料,研究微滴单培养犬卵母细胞的体外成熟能力及卵母细胞直径与透明带厚度的变化规律。结果表明:体外培养48 h后,卵泡期与黄体期犬卵母细胞达到第1次减数分裂中期-第2次减数分裂中期(MⅠ-MⅡ期)比率分别为(15.9±8.0)%、(17.1±4.9)%,两者差异不显著(P>0.05),但均显著高于乏情期[(6.1±5.5)%](P<0.05),可见微滴单培养犬卵母细胞具有一定的体外成熟能力;处于生发泡期(GV期)、生发泡破裂期(GVBD期)、MⅠ期和MⅡ期的犬卵母细胞直径分别为155.42,171.12,183.50,155.96μm,透明带厚度分别为29.20,33.70,33.91,30.31μm,均无显著性差异(P>0.05),但均存在由小变大再逐渐变小的趋势。     

胰岛素对犬卵母细胞体外成熟的影响

研究不同浓度胰岛素及不同培养时间对犬卵母细胞体外成熟率的影响,为改善犬卵母细胞体外培养体系提供参考,采用切割法收集卵巢表面卵丘—卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes, COCs),在含有0.6%葡萄糖的TCM199中添加不同浓度的胰岛素（0、3、6、9 IU/mL）,38.5 ℃、5% CO₂培养箱内成熟培养,观察卵丘扩散程度,剥离卵丘细胞获得裸卵后,室温下固定15 min;Hoechst 33342染色,压片,荧光显微镜下观察核形态,用SPSS 14.0软件统计试验数据。不同浓度胰岛素培养48 h后,各组卵丘细胞扩散效果都不明显;卵母细胞核成熟期没有达到减数分裂中期（MⅡ）,但是6 IU/mL胰岛素组生发泡破裂期（GVBD）比率（35.88%±14.63%）显著高于对照组（11.25%±9.75%）;6 IU/mL胰岛素组延长培养时间至72和96 h后,MⅠ-MⅡ期卵母细胞成熟率分别为13.33%±1.5%、20.8%±1.9%。以上结果表明,犬体外成熟培养基中添加胰岛素既没有提高犬卵母细胞核成熟到MⅡ期,也没有改善犬卵母细胞卵丘扩散效果。但是,在6 IU/mL浓度下延长培养时间,相对增加了成熟率。