GC克隆载体的制备及其克隆效率研究

为了研究GC克隆技术的克隆效率,从商品化T载体出发,构建了一个含有2个XcmI位点的质粒;通过PCR技术引入突变后,经XcmI酶切得到3′端各突出一个C碱基的线性化载体。随后将该线性化载体与Taq酶催化得到的PCR产物进行了连接测试。结果表明:GC克隆效率低于同等条件下的TA克隆,对不同5′端碱基引物没有表现出明显偏好性。该研究为GC克隆技术在分子生物学实验上的应用提供了一定的理论依据。