排序方式: 共有51条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1.
根据家兔基因密码子使用偏好性,对引自GenBank的秀丽隐杆线虫fat-1基因编码序列进行密码子优化,通过全基因合成的方法获得优化后的fat-1基因(命名为opfat-1);从秀丽隐杆线虫中RT-PCR扩增获得fat-1.将扩增的fat-1和合成的opfat-1基因分别构建到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中.采用脂质体LipofectamineTM转染法将fat-1和opfat-1基因转入家兔胎儿成纤维细胞(Rabbit fetal fibroblast cells,rFFCs)中.对比不同DNA和转染试剂用量以及细胞暴露于DNA、转染试剂中作用时间探讨影响rFFCs转染效率的参数,经过优化,最优的rFFCs转染条件为:LipofectamineTM用量2~3μl,DNA量0.8~1.0μg,LipofectamineTM与DNA、细胞共培养时间为8 h.通过绿色荧光标记和RT-PCR检测转染细胞中融合蛋白和目的基因的表达.密码子优化的opfat-1与fat-1相比,体外瞬时表达效率有极为显著的提高;G418抗性筛选获得转基因单克隆细胞,RT-PCR初步验证fat-1和opfat-1基因均在家兔胎儿成纤维细胞中稳定转录表达. 相似文献
2.
3.
4.
5.
本文通过了解滨海度假酒店的概念和特点,并从空间组织设计、平面布局等分析建筑形式和空间变化的设计手法,希望对同类海滨度假酒店建筑给以一定的启示. 相似文献
6.
针对牧草干燥过程中,易受气候条件制约的实际事实,文章提出了一种能够满足牧民对牧草干燥要求、方便灵活的风力发电电气控制技术。此种控制技术,补充了小型风力发电机在牧草干燥领域的空白。 相似文献
7.
针对科技论文中如何正确判断“年”、“天”是否为时间单位的问题, 通过实例对科技论文中如何正确使用时间“年”、“天”进行了详细分析, 指出“年”、“天”用于计量时, 为时间单位, 应用单位符号a、d;而用于表示时序、计数、习惯时间及特定的时间段等情况时, “年”、“天”并不是表达精确的时间长度, 不是时间单位, 不能使用单位符号, 应使用汉字“年”、“天”。 相似文献
8.
基于DEA模型的湖南省财政支农支出效率评价 总被引:1,自引:1,他引:0
准确评价财政支农支出的效率,有助于了解财政支农支出的实际效果,发现财政支农资金管理和使用中存在的问题,进而采取相应措施提升财政支农支出绩效。以2008-2013年湖南省14个市(州)财政支农支出面板数据为样本,运用DEA模型分析全省和市(州)层面财政支农支出的效率,探讨各地区提升财政支农支出效率的有效途径。结果表明,湖南省财政支农支出效率整体较高,6年综合技术效率均值都在0.8以上,且逐年略有提升。从市(州)层面看区域间差异较大,综合技术效率最高值与最低值之间相差0.637,且大部分地区纯技术效率较高而规模效率较低,这在湘中和湘东部分经济相对发达的地区尤为突出,需要在维持现有支出规模的基础上调整支出结构和整合支农资金;还有部分经济相对落后的湘中和湘西地区财政支农纯技术效率和规模效率都不高,规模报酬均呈现递增趋势,这些地区既需加强资金管理,更需加大财政支农规模,以提升综合效率水平。 相似文献
9.
秀丽隐杆线虫fat-1基因密码子优化、克隆及家兔表达载体构建 总被引:1,自引:0,他引:1
提取秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)总RNA,采用RT-PCR法扩增出fat-1基因cDNA全长.根据家兔基因密码子使用偏好性,对引自GenBank的fat-1 cDNA序列进行密码子优化,通过全基因合成的方法获得优化后的fat-1基因(命名为opfat-1).将扩增的fat-1 cDNA和opfat-1基因分别与pGEM-T Easy和pUC57载体连接,转化大肠杆菌DH5α,获得2种重组克隆子.2种重组子经双酶切后获得的目的片段分别定向克隆入绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中,构建重组表达载体,并对其进行PCR、限制性内切酶酶切分析和测序鉴定,结果表明,成功构建了fat-1基因家兔表达载体pEGFP-opfat-1和pEGFP-fat-1,且读码框正确. 相似文献
10.