Fat-1基因载体构建及其在家鸡中的体外表达

试验旨在构建一种适合于家禽体外表达的ω-3脂肪酸脱氢酶Fat-1基因的真核生物表达载体,为后续转基因鸡的生产奠定基础。根据家鸡密码子使用频率,对秀丽隐杆线虫Fat-1基因进行优化改造;将改造后的Fat-1基因(cFat-1)连接至pLL3.7表达载体,构建重组质粒pLL3.7-cFat-1;经PCR、酶切、序列分析等手段对重组质粒进行鉴定;用胰酶消化法培养鸡成纤维细胞,利用TurboFect^TM转染试剂将pLL3.7-cFat-1转染体外培养的成纤维细胞;通过RT-PCR检测和绿色荧光观察分析cFat-1基因在细胞中的表达。结果表明cFat-1基因在鸡成纤维细胞中高效转录并表达,成功构建了可在家禽体外表达cFat-1基因的特异性表达载体。本研究首次获得可在家禽体外表达cFat-1基因的转基因细胞系,证实了经基因改造后cFat-1基因可在家禽体外的高效转录和表达,为后续制备富含ω-3脂肪酸的转基因鸡奠定基础。     

梅山猪和杜洛克猪卵泡中差异表达lncRNA克隆鉴定及与miRNAs相关性分析

【目的】通过克隆鉴定梅山猪和杜洛克猪卵泡期第4天M2卵泡中差异表达的lncRNA-ALDBSSCT0000005583,分析其在猪颗粒细胞与miRNAs表达量的相关性,为探究lncRNA调控miRNA在母猪卵泡发育过程中的作用提供理论依据。【方法】对课题组前期在梅山和杜洛克M2卵泡中筛选出的差异表达lncRNA-ALDBSSCT0000005583,进行RT-qPCR验证,并利用RACE克隆其全长序列;根据编码潜力评估工具CPAT、CPC对该lncRNA的编码能力进行预测,原核表达试验进一步鉴定其编码能力;核质分离试验对lncRNA-ALDBSSCT0000005583进行亚细胞定位,RT-qPCR检测其在各组织中的表达水平;利用miRBase网站查找猪的miRNA数据库,结合RNAhybrid、miRanda在线软件预测与lncRNA-ALDBSSCT0000005583有相互作用的物种间保守miRNA,使用TargetScan和miRanda预测与lncRNA-ALDBSSCT0000005583具有相互作用miRNA的靶基因,并对其靶基因进行GO富集和KEGG信号通路分析;通过过...     

庭院养鱼营造枣庄市宜人小环境

民谚：“家有小鱼塘,胜过小银行”。近两年来,山东省枣庄市庭院养鱼已成为一条谋富之路。1998年该市庭院养鱼发展到2880个,以此业年增加收入3000元以上的有1930户,1－5万元的50户,有的多达10万元以上。养殖品种除观赏鱼外,还有鳖、鳝、鳍、鲶、泥鳅和淡水白娼等。养殖方式灵活多样：有房顶、房内、房前的,有控温、常温的,有养成、繁育、暂养、垂钓的,有专业、兼业的。在产业引导和典型示范带动下,枣庄市庭院养鱼不仅同该市网箱养鱼、跨地区养鱼、工厂温流水养鱼一样能够形成特色,而巨渐成该市一项有潜力、有活力的产业。发展庭院…     

FSH-β、PRLR和FUT1基因多态性与母猪繁殖性状的关联性分析

为探讨FSH-β、PRLR和FUT1基因多态性与母猪繁殖性状的相关性,采用PCR-RFLP检测技术在269头大白猪群体中进行FSH-β、PRLR和FUT1基因的多态性检测,并对不同基因型的总产仔数、产活仔数、健仔数、窝质量等繁殖性状进行了关联性分析。结果显示,在试验群体中FSH-β和FUT1的优势等位基因均为B基因,PRLR的优势等位基因为A基因。在试验群体中FSH-β基因不同基因型对各繁殖性状的影响均不显著。PRLR基因多态性对大白猪总产仔数有显著影响,AA、AB型比BB型分别高2.07、1.30头/胎(P0.05)。FUT1基因AA型弱仔数显著低于AB、BB型,畸形仔猪数极显著高于AB、BB型。合并基因型分析发现,大白猪繁殖性状FSH-β-PRLR最优分子标记组合为AAAA,FSH-β—PRLR—FUT1最优分子标记组合为BBAABB。     

实施新战略开创新局面

2001年山东枣庄市水利与渔业局对产业结构进行了战略性调整,开创了新的发展局面.全市放养面积10.4万亩,水产品总产量4.03万吨,渔业一、二、三产业总收入7.9亿元,同比分别增长7%、8%和8%;水产品出口1614吨,在日、韩减少农产品出口的情况下,全市鲜活鱼出口量与上年持平,出口品种增多;精加工水产品出口量增长54%;渔业基础设施建设也有新的突破性进展.     

他乡水中“淘金”——山东枣庄库民跨地区养鱼

最近,枣庄库区出现跨地区网箱养鱼热,千余人奔赴山东各地和云南省江川县的水库,开发水面10万多亩,投放网箱数千只。 枣庄市各类水库可养鱼水面4.5万亩,1995年投放网箱1.5万只,使70％的库民脱了贫;今年限量1.5万只,达到饱和。对此,人称“马百万”的马洪法提醒乡亲们:继续富,走新路！老马识途,他1994年就预见本市网箱养鱼有饱和趋势,当年带着几个养鱼户到外地开发水库资源。初涉他乡水,安全靠“头人”。可当一筐筐活蹦乱跳的成鱼换来大把大把的票子时,外地人有的红了眼,要鱼、抢鱼,吓跑了贩鱼人。自发的跨地区养鱼     

应加快发展跨地区渔业

山东枣庄跨地区渔业发展到3省16个区县,数百个渔产开发外埠水面10多万亩发展集约化网箱养鱼,取得了良好的社会、经济、生态效益。一、可行性与必要性分析1．1994年来,枣庄市水产科技人员和养鱼户闯出了一条从跨市地到跨省份,从探索、发展到规范、提高的跨地区渔业发展路子,先后应邀开发了山东临沂K县）、日照、济宁、泰安、烟台和云南的江川、湖北长阳等市、县16个大中型水库、规模逐渐扩大,至1998年外埠网箱达190亩,仅临沂的会宝岭水库单茬网箱就有2300只。因新开发水面水质好店种和成鱼辐射销售面广、鱼种选择范围大等因素,效益…     

lncLER在卢氏绿壳蛋鸡肝脏中表达调控的研究

长链非编码RNA（lncRNA）在许多生物学过程中发挥着重要的调节作用。河南农业大学家禽种质资源创新工程研究中心通过对产蛋前期（20周龄）和产蛋高峰期（30周龄）卢氏绿壳蛋母鸡肝脏组织的转录组分析,筛选出了一个在产蛋高峰期母鸡肝脏中表达水平显著上调的lncRNA（lncLER）。本研究利用半定量PCR（RT-PCR）、实时荧光定量PCR分析了lncLER在卢氏绿壳蛋母鸡不同发育时期和不同组织中的表达规律,并从个体和细胞水平研究了体内、体外雌激素处理对lncLER表达的影响。结果表明,lncLER在卢氏绿壳蛋母鸡各组织中均有不同程度的表达,且在产蛋高峰期肝脏中的表达量较高;雌激素在个体和细胞水平可显著上调lncLER的表达。本试验初步阐明了lncLER基因在卢氏绿壳蛋母鸡中的表达调控规律,为进一步研究lncLER在鸡产蛋过程中的生物学功能奠定了基础。     

猪lncRNA-ENSSSCT00000018610的克隆及其在猪卵泡中的表达

为了探究lncRNA-ENSSSCT00000018610在猪卵泡发育过程中的作用,本研究采用RACE技术对lncRNA-ENSSSCT00000018610的全长序列进行了扩增克隆,用Real-time PCR进行组织表达谱分析,并分析其在梅山猪和杜洛克猪卵泡中的表达情况以及采用顺式和反式两种方法对lncRNA-ENSSSCT00000018610靶基因进行预测。结果表明,克隆获得了lncRNA-ENSSSCT00000018610全长序列1 731bp;lncRNA-ENSSSCT00000018610在肌肉、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、卵巢、输卵管、子宫、垂体、黄体、下丘脑中均有不同程度的表达,其中以肾、肺、子宫、卵巢表达量相对较高;lncRNA-ENSSSCT00000018610在杜洛克猪S、L卵泡中的表达量显著高于梅山猪(P0.05),在杜洛克猪M1和M2卵泡中的表达水平极显著高于梅山猪(P0.01)。lncRNA-ENSSSCT00000018610的潜在靶基因TNIP1、CYP2J2、SCARB1、IBSP等与猪产仔性状相关,并且参与猪的卵泡发育。提示其可能通过对靶基因的调控间接参与卵泡发育过程。     

ESR、OPN和RBP4基因多态性对大白猪繁殖性状的影响

为了探讨雌激素受体（estrogen receptor,ESR）、骨桥蛋白（osteopontin,OPN）和视黄醇结合蛋白4（retinol binding proteins 4,RBP4）的多态性对大白猪繁殖性状的影响,本研究采用PCR-RFLP技术检测试验猪群ESR、OPN和RBP4基因的多态性,并分析其对大白猪总产仔数、产活仔数、健仔数、窝重、初生重、死胎、木乃伊、弱仔数和畸形数等性状的影响。结果显示,在大白经产母猪中,ESR和OPN基因的优势基因为A等位基因,RBP4基因的优势基因为B等位基因;ESR基因AB与BB基因型在总产仔数、产活仔数性状上均高于AA基因型;OPN基因在总产仔数性状上AA基因型最高,在产活仔数、健仔数、窝重性状上均为BB > AA > AB;RBP4基因在总产仔数、产活仔数、健仔数、窝重性状上均为AA > BB > AB;合并基因型分析发现ESR-RBP4最优的分子标记组合为ABAA;OPN-RBP4最优的分子标记组合为BBAA。因此,ESR、OPN和RBP4基因多态性与大白猪繁殖性状相关。