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鉴别猪瘟强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法的建立 总被引:13,自引:0,他引:13
[目的]建立一种能区分猪瘟病毒(classical swine fever,CSFV)强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法。[方法]根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列,选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物,并在该对引物跨越区域的内部设计了猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒特异性引物,建立了一种能区分猪瘟强毒和弱毒的RT-nPCR鉴别诊断方法。[结果]应用该方法从猪瘟兔化弱毒疫苗和石门强毒株基因组中扩增出了大小分别为447和343bp的一条特异性片段,从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为447和343bp的两条特异性片段,但对牛病毒性腹泻病毒和其它常见猪源病毒细胞培养物以及正常细胞基因组进行检测时均为阴性。该方法可以检测出0.04pg的CSFV RNA。对从黑龙江省采集的15份疑似猪瘟病料进行了检测,结果表明,有14份类似猪瘟强毒,1份类似弱毒疫苗。限制性片段长度多态性和种系发生分析证实了RT-nPCR的检测结果。[结论]本研究建立的RT-nPCR可以有效区分猪瘟强毒和弱毒,减少了未感染的免疫猪被误杀的可能性。 相似文献
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人们大部分时间是在家庭居室、办公室、公共建筑等室内环境中度过的,但传统的地毯容易释放甲醛等有害致癌物质。草坪在当前的城市绿化、美化以及休闲和运动场地的建设中起着重要的作 相似文献
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花前花后有雨水或田间潮湿的葡萄园,花序分离期可以施用40%嘧霉胺1000倍液+78%科博800倍液,开花前,再用70%甲基硫菌灵800倍液+80%喷克800倍液。如果是巨峰系品种,穗轴褐枯病较重,可换成花序分离期50%多菌灵·乙霉威600倍液+78%科博800倍液,开花前70%甲基硫菌灵800倍液+80%喷克800倍液。如果这两次药没用好,花期出现烂花序情况,尽可能选择晴天的午后用药,以97%抑霉唑4000倍液+40%嘧霉胺1200倍液或40%嘧霉胺1200倍液+70%甲基硫菌灵800倍液喷花序,80%落花后再加强友霉病的防治。 相似文献
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1适当增加饲料营养浓度生产实践证明,在夏季高温期间饲料中添加1.5%的熟豆油,其产蛋率可显著提高。此时谷物类饲料如玉米的用量一般为50%~55%。2酌情增加蛋白饲料供应夏季天热,鸡采食量减少,只有适量增加饲料中的蛋白质水平,并保证氨基酸平衡,才能满足蛋鸡对蛋白质的需要。产蛋鸡饲料中蛋白质的含量应比其他季节提高1~2个百分点,达到18%以上。增加配合饲料中豆粕、棉仁饼等 相似文献
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分子佐剂C3d增强猪流感病毒HA-DNA疫苗免疫原性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨分子佐剂C3d对猪流感病毒HA-DNA疫苗免疫原性的影响,本研究构建了3种表达不同形式HA的重组质粒,分别为:表达分泌型HA的质粒p-sHA、表达全长HA的质粒P-tmHA和融合表达3拷贝鼠C3d与HA的质粒P-sHA/mC3d3.3种质粒与空载体pCAGGS分别免疫BALB/c小鼠后,采用ELISA和HI试验检测抗体水平.结果显示,免疫后第8周,P-sHA组与P-tmHA组的抗体水平没有明显差别,而P-sHA/mC3d3免疫组的抗体水平显著高于这两组,说明分子佐剂C3d增强了抗体应答水平.淋巴细胞增殖试验及细胞因子检测实验结果显示,免疫后第8周,P-tmHA诱导了更强的淋巴细胞增殖反应和更高水平的IFN-,而p-sHA/mC3d3诱导了更高水平的IL-4,说明HA表达形式的变化影响了免疫反应的类型,C3d与HA融合后通过诱导IL-4的产生而使免疫反应倾向于Th2型.总之,本研究证实3拷贝分子佐剂C3d与分泌型HA融合后显著提高了DNA疫苗诱导的抗体水平.这提示质粒P-sHA/mC3d3免疫可能对接种动物提供高水平的保护,有希望成为抗猪流感病毒的候选疫苗. 相似文献