赖氨酸修饰对梯棱羊肚菌黑色素结构和理化特性的影响

为了进一步提高梯棱羊肚菌黑色素的提取率及溶解性,本试验采用单因素、Plackett-Burman试验、响应面试验对纤维素酶-超声波协同提取梯棱羊肚菌黑色素的提取工艺进行优化研究。通过赖氨酸修饰,并对修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素进行结构表征、理化性质及稳定性研究。结果表明,在NaOH浓度为1.54 mol/L,纤维素酶添加量为20 mg/g,纤维素酶酶解时间为78.6 min,料液比为1:30,酶解温度为40 ℃,超声时间为80 min条件下提取的梯棱羊肚菌黑色素最优。未修饰的梯棱羊肚菌黑色素不溶于水,色价值为480.24,修饰后的黑色素溶解度为1 016 g/L,色价值为1 771.18,比未修饰的黑色素在溶解性、色价值方面均有所提高。此外,在不同的温度、光照、pH条件下,修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素均比较稳定。以上研究结果为梯棱羊肚菌黑色素的高效提取及其产品的开发利用奠定了理论基础。     

烟草丛顶病毒RNA依赖RNA聚合酶(RdRp)介导的体外复制体系

通过重叠PCR扩增得到烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)中国分离物RdRp的编码序列,构建以pMALC2X为基础载体的原核表达载体pMAL-TB-RdRp。0.5 mM IPTG诱导可特异性表达分子量约为120 kDa的MBP-RdRp融合蛋白。温度梯度实验显示,18℃下诱导表达的MBP-RdRp融合蛋白的可溶性比例较高,约17%;经亲和层析纯化的MBPRdRp可特异性识别TBTV正链和负链的3'末端序列,催化体外复制;对正负链的3'末端的体外复制效率存在差别,识别负链3'末端的体外复制效率明显高于正链3'末端。本研究创建的TBTV RdRp介导的体外复制体系为进一步研究TBTV基因组复制调控奠定了基础。     

Expression of natural killer cell stimulatory receptor NKG2D and its ligand MICA in Tibetan patients with gastric cancer at Qinghai plateau

AIM: To investigate the expression of natural killer cell stimulation receptor D(NKG2D) in peripheral blood and the expression of major histocompatibility complex class I chain-related protein A(MICA) on the gastric carcinoma tissue and the neighboring non-cancerous tissue in Tibetan patients with gastric cancer at Qinghai plateau. METHODS: Samples of 33 patients and 20 healthy persons were collected to detect NKG2D in peripheral blood by Flow cytometry analysis. The expressions of MICA in part of the correspondent tissues were examined by RT-PCR and immunohistochemistry.RESULTS: The expression of NKG2D in the plateau of Tibetan patients with gastric cancer group (13.47 ±5.26)% was significantly lower than that in healthy groups (32.62±10.08)%. The mRNA level of MICA in gastric cancer was significantly higher than that in neighboring non-cancerous tissue (P<0.05). The expressions of MICA proteins showed a significant difference between the neighboring non-cancerous tissue (21.21%, 7/33) and the gastric carcinoma tissue (78.79%, 26/33), between the high differentiation (60.00%, 3/5) and the moderate (72.73%, 8/11), low differentiation (88.24%, 15/17). The expressions of MICA were not correlated with tumor size, sex, age, lymph node metastasis of the patients (P>0.05). Spearman rank correlation displayed that the expressions of MICA mRNA were positively correlated with the MICA protein level (r=0.903, P<0.01).CONCLUSION: The immune escape in Tibetan patients with gastric cancer at Qinghai plateau probably relates to the down-regulation of NKG2D and the up-regulation of its ligand MICA. The activity of NK cells and the anti-cancer cellular immunity level are descending in the plateau of Tibetan patients with gastric cancer. The decrease in the receptor NKG2D is a reason for the activity of NK cell descending.     

贵州省辣椒炭疽病病原鉴定及协同增效药剂筛选

以采自贵州省贵阳市和遵义市的辣椒炭疽病病样为试材,采用组织分离法分离病原菌,依照柯赫氏法则确定病原菌的致病性,根据菌株形态特征及rDNA-ITS序列分析鉴定,研究引起贵州省辣椒炭疽病的病原;采用菌丝生长抑制法,研究了致病菌株对甲基硫茼灵等11种原药和10％苯醚甲环唑等6种成品药的敏感性,从而在此基础上选择不同作用机理的药剂组合复配,测定抑制活性.结果 表明:结合形态学及分子生物学确定其为辣椒炭疽病菌,分别为尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)、斯高维尔炭疽菌(Colletotrichum scovillei)和疑似新种(Colletotrichum sp.);经敏感性测定,所选药剂对菌株均有一定程度的抑制作用;咪鲜胺、双苯菌胺、唑胺菌酯、戊唑醇等4种原药对3株辣椒炭疽病菌药效比较稳定,抑制效果较好;辣椒炭疽病菌对22.50％啶氧菌酯和10％苯醚甲环唑2种成品药剂的敏感性较高,EC50值分别为1.60 mg·L-1和2.12 mg·L-1;戊唑醇与吡唑醚菌酯3∶1和1∶1复配时,SR分别为1.7453和2.0611,1∶1时增效效果最好.啶氧菌酯与咪鲜胺1∶3、1∶1和1∶5复配时,SR分别为1.7234,1.6611和1.6585,1∶3增效效果最好.综上所述,引起贵州省辣椒炭疽病的病原菌有GY-1尖孢炭疽菌(C.acutatum);ZY-1斯高维尔炭疽菌(C.scovillei);ZY-2疑似新种(Colletotrichum sp.).     

河北猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3(cz)株N基因变异分析及原核表达

为了给河北地区预防和控制猪繁殖与呼吸综合征提供理论数据。应用RT-PCR方法特异性扩增HB-3(cz)株的ORF7(N)基因片段,将扩增片段克隆入pMD-T载体后测序,应用DNAstar分析软件对序列进行分析,并与GenBank中发表的PRRSV毒株序列进行比较。结果显示:HB-3(cz)株与高热病毒株JXA1、HUB2等及传统河北分离株HB-1(sh)氨基酸同源性高达97.6%,属美洲型毒株。将目的片段克隆入原核表达载体pGEX-6P-1,重组质粒pGEX-N转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得表达,经Western-blot-ting分析表明:表达的融合蛋白分子量约为39.5 kDa,能与PRRSV的阳性血清发生特异性反应,为PRRSV血清学诊断方法的建立奠定了基础。     

基因表型诱导剂对黄瓜生育及产量和品质的影响

在保护地栽培条件下,以清水浸种和嫁接黄瓜为对照,进行了不同浓度的基因表型诱导剂浸种对比试验.结果表明,适宜浓度的基因诱导剂浸种能够在一定程度上控制黄瓜茎的纵向生长,使其茎的横向生长、叶和根的生长明显加快,根系活力明显增强,壮苗指数和G值有所提高,第1雌花节位明显降低,雌花节率和坐果率显著提高,采收期提前1～8d,前期产量和总产量均显著提高;以浸种浓度为1:100的处理最为适宜,前期产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产40.6%和20.6%,总产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产63.8%和18.1%:浸种浓度为1:70的处理次之,前期产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产35.0%和15.8%,总产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产54.2%和10.9%.同时,诱导剂浸种还可明显提高黄瓜干物质、可溶性糖和VC的含量,改善黄瓜品质;但诱导剂浸种的浓度过高或过低均不利于诱导效果的提高.     

外源水杨酸与钼酸钠提高光叶叶子花耐寒性及相关机制

为综合评价水杨酸和钼酸钠处理对光叶叶子花耐寒性的影响,为园林绿化管养提供理论指导,以园林观赏植物光叶叶子花为试材,通过0.5 mmol/L水杨酸和2.0 mol/L钼酸钠单独及复合处理,测定在-3、0、3、6、25℃处理后,叶片的相关生理指标。结果表明：水杨酸和钼酸钠处理能够不同程度地降低低温胁迫下光叶叶子花叶片的相对电导率和MDA含量,其中复合处理的效果更好;在25和6℃时,氧自由基产生速率随温度的降低而上升,但在3,0和-3℃时,则呈下降趋势;在0℃和-3℃时,水杨酸处理使CK的SOD活性显著低于其他处理;药剂处理提高了POD活性,特别在0℃时,T1、T2、T3均显著大于CK;此外,低温胁迫下,各处理的可溶性糖、淀粉、游离脯氨酸含量均出现先上升后下降的趋势,且处理后,可溶性糖在-3℃时,淀粉和脯氨酸在0℃和-3℃时其含量均显著高于CK。通过综合评价发现,水杨酸和钼酸钠处理能够提高光叶叶子花的耐寒性,特别是复合处理效果更佳。     

日粮不同蛋白质水平对三元肥育猪生产性能和胴体品质的影响

本文旨在研究不同日粮蛋白质水平对三元肥育猪生产性能、血液参数、胴体性状和肉质性状的影响.试验选取36头杜长大三元杂交猪,体重约为(47±4.2)kg,随机分为3个处理,每个处理12个重复,各处理分别饲喂低(12.9%)、中(15.4%)、高(18.7%)3个蛋白质水平日粮.试验第46天后,分别检测血液生化指标、激素水平、胴体品质和肉质性状.结果显示,3个日粮蛋白质水平对日增重、采食量、料重比及胴体品质和肉质性状均无影响(P>0.05);血清碱性磷酸酶、低密度脂蛋白、甘油三酯、胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血清尿素氮以及生长激素均以中蛋白质水平组最高;随着日粮蛋白质水平的增加,肥育猪血清胰高血糖素有降低的趋势(P=0.089).以上结果表明,日粮蛋白质水平降低到12.9%并不影响肥育猪生长性能、胴体品质和肉质性状.     

切削参数对加工质量影响的有限元模拟

通过DEFORM软件模拟,研究了零件机械加工过程中切削速度、切削深度和进给量对切削力的影响,切削用量、切削深度和走力量对零件表面质量的影响。     

全血体系下草鱼红细胞免疫粘附功能及其调控因素研究

采用经典的红细胞C3b受体(erythrocyte C3b receptors,E-C3bR)与红细胞免疫复合物(erythrocyte immune complexes,E-IC)花环实验,检测草鱼红细胞在全血体系与洗涤红细胞体系下的E-C3bR与E-IC粘附率,同时检测未灭活血清与灭活血清(58℃处理30 min)对洗涤草鱼红细胞免疫粘附功能的调控作用.结果显示:全血体系下草鱼红细胞E-C3bR粘附率与E-IC粘附率均显著高于洗涤红细胞体系条件下的相应值(p<0.05).进一步研究显示,灭活血清组处理的洗涤草鱼红细胞E-C3bR粘附率与E-IC粘附率显著高于未灭活血清组及生理盐水组(p<0.05);未灭活血清组处理的洗涤草鱼红细胞E-C3bR粘附率与E-IC粘附率显著低于生理盐水组(p<0.05).结果提示,草鱼红细胞的免疫粘附功能受全血反应体系中相关因子的调控,其血清中存在热不稳定的抑制因子和热稳定的促进因子.